Electroforesis en gel de agarosa de amplicones de ADN después de la PCR: un método para analizar los productos de la PCR multiplex y evaluar el éxito de la reacción de PCR

Para analizar amplicones de ADN (fragmentos de ADN amplificados de longitud específica) resultantes de la reacción en cadena de la polimerasa multiplex, la PCR, utilizando electroforesis en gel de agarosa, ensambla una bandeja de fundición con un peine para crear pocillos para la carga de muestras.

Vierta una concentración adecuada de agarosa fundida, un polisacárido lineal, disuelto en tampón de electroforesis, complementado con un tinte de ADN fluorescente, en la bandeja de fundición y deje que se solidifique.

La agarosa fundida se polimeriza, formando un gel tridimensional con poros microscópicos.

Coloque el gel fundido en un tanque de electroforesis, con el lado del peine orientado cerca del cátodo negativo. El tanque contiene el tampón de electroforesis utilizado en la preparación del gel para mantener una conductividad óptima. Retire el peine.

Transfiera la muestra del producto de PCR, mezclada con una solución de colorante de carga para monitorear la migración de la muestra, a los pocillos. Cargue un pozo con escaleras de ADN de longitud definida. Iniciar electroforesis.

Los amplicones de ADN, con grupos fosfato negativos espaciados uniformemente, migran desde los pocillos h