Enfoque isoeléctrico en fase líquida: una técnica de electroforesis para separar moléculas bioactivas del extracto crudo de Gymnema sylvestre

Comience con una celda IEF de enfoque isoeléctrico preensamblada, una unidad de electroforesis en fase líquida. Esta columna es una cámara porosa horizontal compartimentada con distintos terminales positivos y negativos en los extremos.

Ahora, tome el extracto de la planta que contiene una mezcla compleja de componentes cargados de manera diferente con diferentes puntos isoeléctricos, pI, un pH donde la carga neta de una molécula es cero.

El extracto se complementa con anfolitos de cargas variables que facilitan el fraccionamiento posterior de los componentes de la muestra.

Cargue el ejemplo en los puertos de carga de la columna. Actualmente, la columna IEF tiene un pH constante. A continuación, aplique alto voltaje para iniciar la electroforesis.

Bajo el campo eléctrico, los anfolitos solubles migran hacia electrodos con carga opuesta y establecen un gradiente de pH lineal a través de la columna. Los componentes de la muestra comienzan a migrar a través del gradiente de pH de la fase líquida, y los colocados a pH por debajo de su pI tienen una carga positiva neta.

Estos migran hacia el electrodo negativo hasta que los componentes alcanzan su pI, donde su carga se neutraliza y la m