Sonda de péptido biotinilado que penetra en las células para detectar interacciones proteína-proteína

En las células, las proteínas se unen a sus proteínas que interactúan a través de secuencias específicas en su estructura, modulando el funcionamiento de las proteínas intracelulares.

Para detectar interacciones de proteínas intracelulares, tome un cultivo celular adherente. Aspira el medio.

Agregue un péptido biotinilado que penetre en las células, una solución BCPP e incube.

Cada BCPP contiene una secuencia peptídica que ayuda en la unión específica a la proteína intracelular objetivo. El péptido tiene un péptido que penetra en las células, CPP, en el extremo N del péptido y biotina en el extremo C para una fácil detección.

Durante la incubación, la región CPP cargada positivamente facilita la entrada del péptido unido a través de la membrana de la célula, llegando al citoplasma. El péptido se une a su socio proteico de interacción intracelular, formando un complejo de proteínas diana BCPP.

Agregue un tampón que contenga moléculas de detergente que rompan la membrana de la célula y liberen complejos de proteínas diana BCPP y otros componentes celulares.

Agregue una solución de avidina unida a perlas de agarosa, una glicoproteína que se une específicamente a la biotina en los BCPP