Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 6:47 min. • July 8th, 2025
Comience incubando moléculas de colorante reportero Raman con nanopartículas de oro para que los reporteros se unan a las nanopartículas.
Agregue polietilenglicol, anticuerpos conjugados con PEG específicos para el antígeno diana. Los anticuerpos se adhieren covalentemente a las nanopartículas a través de la unión de disulfuro de oro. Agregue PEG conjugados con tiol para bloquear los sitios de nanopartículas restantes y evitar la agregación de nanopartículas, formando sondas de nanopartículas.
Cubra los pocillos de la placa de inmunoensayo con el antígeno diana. Bloquee los sitios restantes de la placa con una solución que contenga proteínas. Agregue las sondas de nanopartículas. Realice la dilución de la sonda en serie a través de los pocillos. Incubar para que los anticuerpos de las sondas se unan a los antígenos, formando complejos.
Utilice un microscopio Raman para determinar la respuesta óptica de la sonda. El láser monocromático incidente excita los electrones de la superficie de las nanopartículas de oro y provoca su oscilación, creando un alto campo electromagnético local en la superficie de la sonda.
El haz incidente y los reporteros Raman interactúan, causando una luz ine
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