Los huevos de ventanas de pollo para Estudios del Desarrollo

Bienvenido al Laboratorio Kramer. Soy Matt Korn, del departamento de Neurobiología y Conducta de la Universidad de California en Irvine. Hoy les mostraré cómo preparar huevos de pollo para una variedad de manipulaciones, incluyendo la colocación de cuentas, la inyección de colorantes o la exploración in ovo.

Así que, sin más preámbulos, comencemos. Bien, vamos a proceder a limpiar el huevo. La razón es que hay muchas cosas que podrían depositarse en él durante la incubación.

Vamos a sellar esto con cinta. No queremos que entren pequeñas partículas en el área donde la ventana permitirá acceder al huevo, lo que aumentaría la probabilidad de que el embrión muera antes de que deseemos extraerlo. Entonces, si observaron desde el incubador, los huevos están colocados con el lado más grande hacia arriba.

Lo que vamos a hacer es tomar el huevo y girarlo hacia un lado. Esto tendrá dos efectos: primero, nuestra ventana quedará justo aquí; y segundo, el embrión necesita flotar hacia la parte superior para que podamos realizar cualquier tipo de manipulación.

Así que voy a colocar algunos de estos desde el estante que estaba en el incubador hasta un portahuevos de cartón. Esta pieza en realidad viene en la caja cuando se entregan los huevos. Por lo tanto, hoy vamos a usarla simplemente para sostener los huevos.

Ahora, la disposición depende de usted. Me gusta hacerlo de esta manera porque puedo acceder a todos los huevos en cualquier momento y ninguno está tocando al otro. En caso de que encuentre uno suelto que tenga una grieta y se me caiga, todos tienen un poco de espacio entre sí.

Así que voy a tomar mi gasa aquí y sacaré una buena pila como esta, dividiéndola en dos. Voy a tomar alcohol al 70% aquí y simplemente la llenaré hasta que pueda sentir que la parte inferior está empezando a humedecerse. Esto se debe a que voy a usar toda la pila para limpiar con ella todos los huevos.

Luego tomaré un par de capas de la parte superior, adelante y simplemente trabajaré en la parte superior, pero en efecto lograré rodear casi por completo todo el huevo aquí. Y después de que esto esté hecho, el alcohol se seca bastante rápido y entonces podemos proceder a colocar cinta adhesiva. La cinta se adherirá bien y para cuando termine de colocar un conjunto, generalmente el primero ya estará seco y podremos pasar al siguiente paso en la preparación del huevo.

Entonces nuevamente, coloque eso de vuelta en la basura y estamos listos para pasar al siguiente paso. Bien, ahora que todos nuestros huevos han sido limpiados con alcohol, podemos proceder a hacer un orificio de drenaje en el lado grande del huevo, en la base del huevo. Esto nos permitirá ingresar y extraer algo de albúmina, ya que si no extraemos la albúmina, el embrión no se asienta adecuadamente.

No podemos realizar manipulaciones. Así que esto simplemente implica que tome una cuchilla y esta cinta plástica. Tiene un poco de elasticidad, lo cual es excelente.

No solo nos permite ampliar la superficie si el agujero es un poco más grande de lo deseado, sino que, cuando cubramos completamente el huevo, necesitaremos estirar esto. Por lo tanto, la zona donde estará la ventana debe quedar totalmente cubierta. Así que procederé a cortar este trozo de esta manera y luego haré una tira de aproximadamente un milímetro.

Luego, con esto puedo hacer un trozo de cinta de aproximadamente un milímetro cuadrado. A continuación, voy a colocarlo justo encima y a la izquierda de la fecha. Colóquelo justo ahí y podrá verlo.

Se adhiere muy bien. Luego puedo regresar a la tira que ya hice, cortar otro trozo de cinta de un milímetro. Y nuevamente, colocarlo a la izquierda del número, que en realidad es la parte superior del huevo.

Ahora que lo hemos girado lateralmente, está a la derecha. Y otra pieza más aquí. Ahora no llevo guantes porque los guantes harían que esta cinta se pegara a ellos, y me he lavado las manos.

No me preocupa realmente ninguna otra contaminación del activo en este momento. Así que voy a proceder a tomar un par de tijeras con la punta afilada. Voy a introducir la punta en el centro del lugar donde puse la cinta y simplemente voy a girarla en un movimiento circular en sentido horario hasta que se rompa un poco.

Y verá que hay un pequeño orificio allí. Ahora bien, el orificio no necesita ser muy grande porque, una vez que introducimos esta jeringa, hará que el orificio sea lo suficientemente grande. Pero esto es para no entrar directamente con una aguja e intentar romper el huevo con ella, ya que a menudo eso provocará que todo un lado del huevo se rompa por completo.

Luego ya no podemos usar el huevo. Bien, ahora voy a proceder a vaciar el huevo. Tenemos ese pequeño orificio en el costado y voy a utilizar esta jeringa de 10 mililitros y una aguja de calibre bastante grande para extraer el albúmino.

Ahora necesito aproximadamente tres o cuatro mililitros, definitivamente más de tres, pero no mucho más de cuatro y medio o cinco. Esto permitirá que nuestro embrión, que ahora está situado en la parte superior, se aleje un poco de la cáscara. Luego podremos realizar nuestras manipulaciones.

Al entrar en un ángulo de 45 grados, me sitúo debajo de la yema. Luego, solo quiero girar un poco hacia mi derecha para deslizarme por debajo, y se puede percibir cómo la punta de la aguja toca ligeramente el fondo del huevo. Voy a proceder a extraer aproximadamente tres o cuatro, y sale bastante bien.

Voy a proceder a colocar esa albúmina en mi recipiente de cintura aquí y ahora puedo continuar con los otros huevos. Bien, entonces voy a seguir adelante. Y verá aquí que el orificio que he hecho para el drenaje es un poco más grande de lo que me gustaría, pero resulta que eso está bien.

Lo que quiero tener en cuenta es que, al insertar la aguja, no se agriete más. Así que voy a proceder a hacerlo. Bien, ya puedo ver que el huevo tiene una pequeña grieta.

Ahora bien, pequeñas grietas están bien, pero debe preocuparse cuando se extienden a otro plano del huevo. Y en este caso, así ocurre. Puede verlo a partir del orificio.

Se extiende casi hasta la parte superior. Y de hecho, aquí es donde se colocará nuestra ventana. Por desgracia para este huevo, vamos a tener que descartarlo.

Y no hay nada especial en desecharlo. No es necesario redactar un protocolo particular ni nada por el estilo. Simplemente colóquelo en el recipiente de desechos.

Utilizamos estas basuras negras para designarlas como desechos animales, pero aparte de eso, ya se ha gestionado previamente. Podemos pasar al siguiente huevo. Bien, ahora que hemos drenado todos nuestros huevos, podemos proceder a tapar el orificio de drenaje.

Ahora esto es importante porque si no lo hacemos dentro del incubador, podríamos tener una evaporación considerable de lo que quede de albúmina. Y luego, un huevo seco es un huevo muerto. Así que vamos a seguir adelante y tomar una cinta del mismo tamaño, colocándola sobre el orificio, y así no tendremos que preocuparnos por volver a acceder a este orificio.

En algunos casos, si decide que desea intentar extraer más albúmina de un huevo, una vez abierto, este orificio actúa como una zona parcialmente sellada en la que puede insertar una aguja sin perder una gran cantidad de albúmina. ¿Bien, lo hace? Bien, entonces ahora vamos a proceder a cubrir los huevos con un trozo de cinta de buen tamaño.

Y yo comparo esto con colocar un trozo de cinta sobre un globo antes de insertarle una pequeña aguja. Lo bueno es que el globo no explota, y en este caso, con un poco de cinta sobre el huevo, el huevo no se agrieta en varios lugares. Luego, la ventana puede sellarse, y cuando la ventana se cierra, dado que hemos usado cinta, se forma un buen sello pequeño y no necesitamos preocuparnos por ninguna evaporación.

Así puede ver el tamaño de la cinta, probablemente es la más grande que he cortado hasta ahora, pero aun así voy a estirarla un poco y tirar de ella ligeramente, aplicando un poco de tensión, y colocarla sobre el huevo. Voy a rodear la parte trasera aquí y estirarla con mucho cuidado sobre el huevo para que no haya arrugas justo donde estará mi ventana. Y puede ajustar un poco la cinta.

No se adhiere tanto como para que tengas que preocuparte. Una vez que está adherido, ya está fijo. Y puedes ver que esta zona general aquí es donde voy a proceder a cortar la ventana.

Vale, ahora que tenemos cinta en todos los huevos, podemos proceder a cortar una ventana en la parte superior. Esta puede ser la parte más difícil y, a menudo, aquí es donde se pierde la mayor parte de los huevos. Así que voy a limpiar bien mis tijeras con una gasa que contiene alcohol y luego procederé a secarlas.

El alcohol prácticamente se evapora por sí solo, pero no deseas que el alcohol entre directamente en el huevo. Así que voy a colocarme justo en medio donde está la cinta y, nuevamente, usaré ese movimiento en sentido horario y antihorario hasta que escuche que hace un pequeño crujido. Entonces sé que mi cuchilla ya está dentro.

Luego, quiero mover mis tijeras hacia afuera para que queden casi planas contra la superficie del huevo. A continuación, hago pequeños cortes hasta poder introducir completamente la punta de las tijeras dentro. Una vez que haya realizado aproximadamente medio círculo, voy a regresar en la otra dirección; no quiero completar el círculo porque necesito una ventana, pero entonces podré abrir el huevo sin problema.

Y en este momento parece que tienen más o menos la edad que esperaba, no tienen muchos vasos sanguíneos, pero hay algo de sangre alrededor de la zona donde se encuentra el embrión, principalmente procedente de la región del delion, de donde ahora ha comenzado a salir la sangre y el latido cardíaco ha desaparecido. Así que simplemente voy a cerrarlo, dejarlo reposar así encima y rodearlo nuevamente, y procederé a cerrar las ventanas. Y nuevamente, simplemente colóquelo plano sobre la superficie y regrese en la otra dirección.

Vale, tenemos algunas burbujas aquí y resulta que el embrión está desviado hacia un lado. Ahora hay dos cosas que podemos hacer en este momento. Si tenemos suficientes huevos y no nos preocupa utilizar cada uno de ellos, podemos seguir adelante y descartar este.

O lo que podemos hacer es cerrar la ventana y simplemente ajustarla para que el embrión flote hacia la parte superior, donde nuevamente lo necesitamos. Y para el momento en que lleguemos a él durante nuestras manipulaciones, podría estar en la posición deseada. Si no es así, podemos descartarlo en ese momento.

Lo que he hecho aquí es colocarlo simplemente en un ángulo. Habrá un pequeño exceso de albúmina, pero esto ayudará al embrión a regresar al lugar donde debe estar. Bien, ahora que tenemos todas estas ventanas, debemos asegurarnos de que estén cerradas y queremos que permanezcan cerradas antes de realizar cualquier manipulación.

Luego podemos proceder a sellar nuevamente el huevo. Pero si tenemos una abertura, a veces la yema puede salirse. Si sabes que el huevo se inclina un poco mientras caminas de una habitación a otra, no querrás que todo salga.

Así que todo lo que hago es cortar otro trozo de cinta plástica de un milímetro de ancho, probablemente de dos o tres milímetros de largo. Y me gusta colocarlo justo en el centro. Y si puedo estirarlo hacia abajo por delante del huevo, entonces queda más tenso.

Y pueden ver dónde encaja la ventana, justo donde estaba la otra cinta, donde cortamos la abertura y queda bastante sellada por ahora. Quiero decir, vamos a proceder a realizar algunas manipulaciones dentro de un minuto, así que no necesita ser completamente hermética. Así es como se preparan y abren ventanas en los huevos.

Así que buena suerte con sus experimentos.