Diferenciación de células madre pluripotentes inducidas en células progenitoras neurales

Tome una microplaca que contenga un cultivo adherente de fibroblastos embrionarios de ratón, o MEF, en un medio.

Los MEF adheridos funcionan como una capa alimentadora, proporcionando un microambiente de cultivo celular de apoyo.

Retire el medio e introduzca células madre pluripotentes inducidas humanas, o hiPSC, en un medio hiPSC complementado con pequeñas moléculas que mejoran la supervivencia celular.

Incubar para permitir que las hiPSC se adhieran a la capa alimentadora, que secreta factores de crecimiento que facilitan la proliferación de hiPSC.

Retire el medio y agregue una solución enzimática para separar las células. Transfiera las células y centrítelas, luego retire el sobrenadante y vuelva a suspenderlas en el medio hiPSC.

Transfiera las células a una placa recubierta de biopolímero. Incubar para permitir que los MEF se adhieran.

Transfiera las hiPSC suspendidas a una microplaca de fondo en V. Centrifugar las células e incubarlas, induciendo la formación de agregados celulares.

Reponer con un medio de diferenciación. Los nutrientes del medio y las interacciones célula-célula dentro del agregado facilitan la diferenciación de hiPSC en células progenitoras neurales.

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