Imágenes de microscopía confocal de árboles dendríticos intactos y morfología de la columna vertebral en un cerebro de ratón despejado

Tome un cerebro de ratón despejado con células que expresan proteínas fluorescentes y lípidos eliminados para mayor transparencia para obtener imágenes de estructura profunda con alta resolución.

Una malla de hidrogel preserva las biomoléculas y mantiene las redes neuronales.

Transfiera el cerebro a una cámara de imágenes que contenga un anillo de agarosa como soporte.

Asegure el tejido con adhesivo y llene la cámara con una solución de coincidencia de índice de refracción para minimizar la dispersión de la luz y crear un entorno de imágenes estable.

Coloque la cámara en una platina de microscopio confocal y baje suavemente el objetivo en la solución para establecer una columna continua de contacto. Utilice la

epifluorescencia para localizar regiones de interés. A continuación, ajuste los parámetros láser y de imagen para optimizar la calidad de la imagen.

Capture una serie de pilas en Z para crear una representación tridimensional del tejido.

Utilice el software apropiado para analizar la morfología celular, incluidos los árboles dendríticos, sus espinas y la distribución y densidad de las neuronas.

Para construir una cámara de imágenes de tejidos grande para tejidos con más de 5 mi