Name: Microscopía fluorescente sin lentes en un chip (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-08-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 23 s
Description: Aprende microscopía fluorescente sin lentes sobre chip utilizando algoritmos de decodificación digital y muestreo compresivo. Esta plataforma compacta permite imágenes de alto rendimiento con resolución menor a 4μm.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

A. Ozcan agradece el apoyo del premio CARRERA NSF, el ONR Premio Jóvenes Investigadores 2009 Premio a la Innovación y el Nuevo Director del NIH DP2OD006427 de la Oficina del Director de la NIH. Los autores también agradecen el apoyo de la Fundación Bill &amp; Melinda Gates Foundation, Vodafone Americas Foundation, NSF y programa de Bish (bajo Premios # 0754880 y 0.930.501).

<ol><li>Coskun, A. F., Su, T., Ozcan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wide+field-of-view+lens-free+fluorescent+imaging+on+a+chip%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Wide field-of-view lens-free fluorescent imaging on a chip.</a> Lab Chip. 10, 824-824 (2010).</li>
<li>Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lensless+wide-field+fluorescent+imaging+on+a+chip+using+compressive+decoding+of+sparse+objects%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Express%22%5BJournal%5D)">Lensless wide-field fluorescent imaging on a chip using compressive decoding of sparse objects.</a> Opt. Express. 18, 10510-10523 (2010).</li>
<li>Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lensfree+Fluorescent+On-Chip+Imaging+of+Transgenic+Caenorhabditis+elegans+Over+an+Ultra-Wide+Field-of-View%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Lensfree Fluorescent On-Chip Imaging of Transgenic Caenorhabditis elegans Over an Ultra-Wide Field-of-View.</a> PLoS ONE. 6, e15955-e15955 (2011).</li>
<li>Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wide-field+lensless+fluorescent+microscopy+using+a+tapered+fiber-optic+faceplate+on+a+chip%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Wide-field lensless fluorescent microscopy using a tapered fiber-optic faceplate on a chip.</a> Analyst. , (2011).</li>
<li>Seo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-Throughput+Lens-Free+Blood+Analysis+on+a+Chip%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">High-Throughput Lens-Free Blood Analysis on a Chip.</a> Analytical Chemistry. 82, 4621-4627 (2010).</li>
<li>Mudanyali, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compact%2C+light-weight+and+cost-effective+microscope+based+on+lensless+incoherent+holography+for+telemedicine+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Compact, light-weight and cost-effective microscope based on lensless incoherent holography for telemedicine applications.</a> Lab Chip. 10, 1417-1417 (2010).</li>
<li>Tseng, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lensfree+microscopy+on+a+cellphone%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Lensfree microscopy on a cellphone.</a> Lab Chip. 10, 1787-1787 (2010).</li>
<li>Lucy, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+iterative+technique+for+the+rectification+of+observed+distributions%5BTitle%5D)+AND+%22The+Astronomical+Journal%22%5BJournal%5D)">An iterative technique for the rectification of observed distributions.</a> The Astronomical Journal. 79, 745-745 (1974).</li>
<li>Richardson, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bayesian-Based+Iterative+Method+of+Image+Restoration%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Opt.+Soc.+Am%22%5BJournal%5D)">Bayesian-Based Iterative Method of Image Restoration.</a> J. Opt. Soc. Am. 62, 55-59 (1972).</li>
<li>Biggs, D. S. C., Andrews, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acceleration+of+iterative+image+restoration+algorithms%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Opt%22%5BJournal%5D)">Acceleration of iterative image restoration algorithms.</a> Appl. Opt. 36, 1766-1775 (1997).</li>
<li>Candes, E., Wakin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Introduction+To+Compressive+Sampling%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Processing+Magazine%2C+IEEE%22%5BJournal%5D)">An Introduction To Compressive Sampling.</a> Signal Processing Magazine, IEEE. 25, 21-30 (2008).</li>
<li>Kim, S., Koh, K., Lustig, M., Boyd, S., Gorinevsky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Interior-Point+Method+for+Large-Scale+L1-Regularized+Least+Squares%5BTitle%5D)+AND+%22Selected+Topics+in+Signal+Processing%2C+IEEE%22%5BJournal%5D)">An Interior-Point Method for Large-Scale L1-Regularized Least Squares.</a> Selected Topics in Signal Processing, IEEE. 1, 606-617 (2007).</li>
<li>Candes, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+restricted+isometry+property+and+its+implications+for+compressed+sensing%5BTitle%5D)+AND+%22Comptes+Rendus+Mathematique%22%5BJournal%5D)">The restricted isometry property and its implications for compressed sensing.</a> Comptes Rendus Mathematique. 346, 589-592 (2008).</li>
<li>Baraniuk, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compressive+Sensing+%5BLecture+Notes%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Processing+Magazine%2C+IEEE%22%5BJournal%5D)">Compressive Sensing [Lecture Notes].</a> Signal Processing Magazine, IEEE. 24, 118-121 (2007).</li>
<li>Romberg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+via+Compressive+Sampling%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Processing+Magazine%2C+IEEE%22%5BJournal%5D)">Imaging via Compressive Sampling.</a> Signal Processing Magazine, IEEE. 25, 14-20 (2008).</li>
</ol>

No hay conflictos de interés declarado.

Hemos demostrado una plataforma on-chip microscopía de fluorescencia que se puede lograr, por ejemplo, &lt;4μm resolución espacial sobre, por ejemplo,&gt; 0.6-8 cm 2 campo de visión sin el uso de las lentes, mecánico de exploración o de película delgada de la interferencia de filtros. En esta técnica, con el uso de una placa frontal de fibra óptica o una forma cónica, la emisión fluorescente de los objetos que se recoge con un 2D-serie de cables de fibra óptica antes de ser entregado a un sensor opto-electrón...

<table border="1"><tbody><tr><th> Nombre del Material </th><th> Empresa </th><th> Número de catálogo </th></tr><tr><td> Dispositivo de carga acoplada (CCD) </td><td> KODAK </td><td> KAF-8300 </td></tr><tr><td> Dispositivo de carga acoplada (CCD) </td><td> KODAK </td><td> KAF-11002 </td></tr><tr><td> Dispositivo de carga acoplada (CCD) </td><td> KODAK </td><td> KAF-39000 </td></tr><tr><td> Complementary Metal-Oxide-Semiconductor (CMOS) </td><td> Micrón </td><td> MT9T031C12STCD </td></tr><tr><td> LED de alta potencia fuente de luz </td><td> Thorlabs </td><td> M455L2-C2 </td></tr><tr><td> LED de alta potencia del controlador </td><td> Thorlabs </td><td> LEDD1B </td></tr><tr><td> De fibra, junto fuente de luz LED </td><td> Mightex </td><td> FCS-0625-000 </td></tr><tr><td> Pluma de vacío </td><td> Edmund Óptica </td><td> NT57-636 </td></tr><tr><td> 2, 4, 10 m Fluospheres </td><td> Invitrogen </td><td> F-8826, F-8859, F-8836 </td></tr><tr><td> RBS tampón de lisis 1X </td><td> eBioscience </td><td> 00-4333 </td></tr><tr><td> 16 SYTO etiquetado de reactivos </td><td> Invitrogen </td><td> S7578 </td></tr><tr><td> De fibra óptica frontal </td><td> Edmund Óptica </td><td> NT55-142 </td></tr><tr><td> De fibra óptica cónica </td><td> Edmund Óptica </td><td> NT55-134 </td></tr><tr><td> Prismas </td><td> Edmund Óptica </td><td> NT47-626, NT45-403 </td></tr><tr><td> Filtros </td><td> Edmund Óptica </td><td> NT39-417 </td></tr><tr><td> PDMS Elastómeros </td><td> Dow Corning </td><td> Slygard 184 </td></tr></tbody></table>

microscopía fluorescente sin lentes en un chip

Lensless Fluorescent Microscopy on a Chip

En el chip de imagen sin lentes, en general, tiene como objetivo sustituir voluminosos lentes de los microscopios ópticos más simples y diseños más compactos, especialmente para aplicaciones de selección de alto rendimiento. Esta plataforma de tecnología emergente tiene el potencial de eliminar la necesidad de componentes ópticos voluminosos y / o costosa a través de la ayuda de nuevas teorías y los algoritmos de reconstrucción digitales. En el mismo sentido, aquí se demuestra una modalidad on-chip de microscopía de fluorescencia que se puede lograr, por ejemplo, &lt;4μm resolución espacial en un campo ultra amplio de visión (FOV) de&gt; 0,6-8 cm 2 sin el uso de las lentes , mecánicos de barrido o de película delgada filtros de interferencia de base. En esta técnica, la excitación fluorescente se logra a través de una interfaz de prisma o hemisféricas de vidrio iluminado por una fuente incoherente. Después de interactuar con el volumen de todo el objeto, esta luz de excitación es rechazada por el total-interna-reflexión (TIR) ​​proceso que está ocurriendo en la parte inferior de la muestra de micro-fluídica chip. La emisión fluorescente de los objetos emocionados se recoge por un frontal de fibra óptica o una forma cónica y se entrega a un conjunto de sensores optoelectrónicos, como un charge-coupled-device (CCD). Mediante el uso de un algoritmo de compresión de muestreo basados ​​en la decodificación, el adquirido lensfree primas imágenes fluorescentes de la muestra puede ser rápidamente procesados ​​para producir, por ejemplo, &lt;4μm resolución sobre un campo de visión de&gt; 0,6-8 cm 2. Por otra parte, apilados verticalmente micro-canales que están separados por ejemplo, 50-100 micras también puede ser con éxito imágenes utilizando la misma lensfree en el chip de plataforma microscopio, lo que aumenta el rendimiento general de esta modalidad. Este compacto en el chip de plataforma de imagen fluorescente, con un decodificador de la compresión rápida detrás de él, podría ser más valiosa de alto rendimiento para la citometría, la investigación de células raras y el análisis de microarrays.

Un sin cristalino en el chip de plataforma microscopía de fluorescencia se ha demostrado que puede objetos de imagen fluorescente sobre un campo ultra amplio de visión de, por ejemplo,&gt; 0,6-8 cm2 con &lt;4μm resolución utilizando una muestra de compresión basado en el algoritmo de decodificación. Dicho pacto y amplio campo fluorescentes en el chip técnica de imagen podría ser valiosa para alto rendimiento de citometría, la investigación de células raras y el análisis de microarrays.

Microscopía fluorescente sin lentes en un chip

El procesamiento de imágenes sin lentes en chip tiene como objetivo general sustituir los microscopios ópticos voluminosos basados en lentes por diseños más sencillos y compactos, especialmente para...

El objetivo general de este procedimiento es demostrar una plataforma de microscopía fluorescente sin lentes y basada en un chip para la obtención de imágenes de objetos fluorescentes en un campo de visión extremadamente amplio. Para lograrlo, se coloca suavemente encima de una matriz de sensores optoelectrónicos, o un sensor CCDC moss, un filtro de absorción delgado y una placa de fibra óptica. Luego, se posiciona un chip microfluídico encima de la placa de fibra óptica. A continuación, se ensambla un prisma con el microchip mediante el uso de aceite de adaptación de índice.La excitación fluorescente se logra a través de la cara lateral de un prisma romboide y la iluminación holográfica se realiza a través de la cara superior del mismo prisma. En definitiva, se pueden obtener imágenes microscópicas de alta resolución a partir de las imágenes fluorescentes adquiridas mediante la decodificación de las imágenes en bruto mediante algoritmos digitales. Si es necesario, los objetos fluorescentes decodificados pueden contarse automáticamente utilizando una interfaz desarrollada a medida.Lente en el chip. La imagenología en general busca reemplazar los microscopios ópticos basados en lentes voluminosos por diseños más simples y compactos. Esta plataforma tecnológica emergente tiene el potencial de eliminar la necesidad de componentes voluminosos y costosos mediante el uso de nuevas teorías y algoritmos digitales de reconstrucción.La lista de lentes en la plataforma de imagen en chip comprende varios componentes ópticos, incluyendo una matriz de sensores digitales, una fuente de iluminación incoherente, un prisma, un filtro de absorción y una placa frontal de fibra óptica, o un cono de fibra óptica. En esta plataforma, se pueden utilizar diferentes tipos de matrices de sensores para la detección de la señal fluorescente procedente de microobjetos diana. A efectos de este video, se utilizará un dispositivo acoplado por carga, y como fuente de luz incoherente se empleará, por ejemplo, un simple diodo emisor de luz para la excitación de fluorescencia.Se utilizan dos métodos diferentes de filtrado de excitación en paralelo para crear el fondo de campo oscuro requerido, como se muestra en este diagrama. Primero, se emplea un prisma de vidrio o una semiesfera de vidrio para generar reflexión interna total o TIR en la superficie inferior del chip microfluídico que aloja las muestras de interés. En paralelo a esto, se utiliza un filtro de absorción económico para eliminar las luces de excitación dispersadas débilmente que no obedecen el proceso de TIR.Tras el rechazo exitoso de la excitación mediante estos dos mecanismos, únicamente se adquiere en el plano del detector la emisión fluorescente de las muestras. A pesar de una apertura numérica de detección tan grande, las manchas fluorescentes crudas en la matriz de sensores se vuelven bastante amplias, lo que requiere ingeniería y un mejor control de la dispersión espacial de esta señal fluorescente. Se colocará una placa de fibra óptica entre los planos del objeto y del sensor como alternativa a una placa frontal convencional.Una placa frontal de fibra óptica cónica, que tiene una densidad significativamente mayor de cables de fibra óptica en su cara superior en comparación con la inferior, puede utilizarse para obtener imágenes de mayor resolución mediante ampliación. Los chips microfluídicos empleados en esta plataforma se fabrican utilizando paredes de poli dimetil Siloxano dispuestas sobre portaobjetos de vidrio para crear los microcanales necesarios para iniciar el ensamblaje de la plataforma de imagen sin soporte. Primero, retire el cubreobjetos de la matriz de sensores optoelectrónicos utilizando un lápiz de vacío y coloque suavemente un filtro absorbente delgado sobre el área activa del detector.Coloque una placa frontal de fibra óptica encima de este filtro de absorción. Luego, coloque el chip microfluídico fabricado directamente encima del arreglo de fibra óptica. A continuación, se ensambla un prisma de vidrio por encima del chip microfluídico utilizando aceite de adaptación de índice, de modo que el índice de refracción de la interfaz coincida con el índice de refracción del vidrio.Conecte las fuentes de luz a los cables de fibra óptica mediante el uso de conectores FC. Uno de los aspectos más difíciles de este procedimiento es la alineación de los componentes. Alinee cuidadosamente las distancias entre los componentes, la posición y el ángulo de la iluminación.Finalmente, acerque la fibra de iluminación lateral al prisma y ajuste su ángulo para asegurar que ocurra reflexión interna total en la interfaz vidrio-aire correspondiente a los chips microfluídicos. Se pueden obtener imágenes del sustrato inferior, diversas células o modelos animales pequeños mediante esta plataforma integrada en el chip, pero para los fines de esta demostración se obtendrán imágenes de los glóbulos blancos. Para marcar los glóbulos blancos con un colorante fluorescente, primero mezcle aproximadamente 100 microlitros de sangre completa con alrededor de un mililitro de tampón de resuspensión de glóbulos rojos, incube durante unos tres minutos a temperatura ambiente y luego centrifugue la solución sanguínea.Tras eliminar la capa superior utilizando una micropipeta, re suspenda la capa del sedimento en solución salina tamponada con fosfato para marcar el ácido nucleico de las células con un colorante fluorescente, agregue SYTO 16 a la suspensión re suspendida y luego incube la muestra durante aproximadamente 30 minutos a temperatura ambiente y en la oscuridad. Pasados los 30 minutos, centrifugue la muestra marcada. Elimine el sobrenadante para reducir el ruido de fondo debido a la emisión fluorescente de los colorantes no unidos.Reese ha resuspendido la capa del pellet de glóbulos blancos en aproximadamente cinco mililitros de PBS. La muestra ya está lista para cargarse en el chip microfluídico para la imagen fluorescente sin lente en el chip. Antes de realizar la imagen de los glóbulos blancos, la plataforma de imagen debe calibrarse utilizando microesferas fluorescentes.Prepare una muestra diluida de microesferas utilizando agua desionizada y la solución inicial de esferas. Con una jeringa de aguja fina, inyecte esta muestra inicial en el chip microfluídico desde el lateral de las paredes de PDMS.Después de ensamblar los componentes para lograr la imagen fluorescente en el chip, adquiera imágenes en bruto de microesferas fluorescentes utilizando la interfaz personalizada desarrollada en LabVIEW a través de una computadora. Asegúrese de verificar que haya al menos 20 imágenes de microesferas fluorescentes aisladas distribuidas en todo el campo de visión. Guarde los datos de calibración, que se utilizarán posteriormente para calibrar y extraer la función de dispersión puntual de la plataforma de microscopía fluorescente sin lente.Retire el chip microfluídico que contiene la muestra de microesferas fluorescentes y desacople el prisma de este chip. Inyecte la muestra de glóbulos blancos previamente preparada en otro chip microfluídico sin usar, desde el lado de las paredes de PDMS. Vuelva a ensamblar los componentes nuevamente con las mismas condiciones experimentales, especialmente en lo que respecta a las distancias y la potencia de excitación.Adquiera las imágenes en bruto de los glóbulos blancos utilizando la vista personalizada del laboratorio con los mismos parámetros de software empleados para las microesferas fluorescentes. Los datos de calibración y las imágenes en bruto de los glóbulos blancos se utilizan luego para crear imágenes de mayor resolución en MATLAB mediante procesamiento digital. Aquí se muestran resultados representativos de imágenes fluorescentes en chip con lente de campo amplio de una mezcla que contiene partículas verdes fluorescentes de cuatro micrones y 10 micrones, con fines comparativos, microscopio 10 x.Se proporcionan también imágenes objetivas que concuerdan bien con las imágenes fluorescentes sin lentes mostradas. A continuación, se presentan los resultados de imágenes fluorescentes sin lentes de campo amplio de una mezcla que contiene partículas fluorescentes verdes de 10 micrones y partículas fluorescentes rojas de 10 micrones. Las imágenes fluorescentes sin lentes muestran una buena coincidencia con las imágenes obtenidas con objetivo microscópico de 10x de las mismas muestras.Esta figura proporciona una comparación de rendimiento entre la desconvolución de Lucy-Richardson y el muestreo compresivo basado en algoritmos de decodificación para la obtención de imágenes de diversos pares de microesferas de 10 micrones. La fila superior ilustra las imágenes fluorescentes brutas sin lente, en las que las imágenes insertadas muestran las comparaciones microscópicas de las mismas partículas, obtenidas mediante un objetivo de 10x. La fila intermedia muestra los resultados de la decodificación compresiva, mientras que la fila inferior ilustra los resultados de la desconvolución de Lucy-Richardson. DDCS y DLR se refieren respectivamente a las distancias entre centros, imágenes microscópicas, imágenes sin lente decodificadas por muestreo compresivo (CS) e imágenes sin lente desconvolutas por Lucy-Richardson (LR).A continuación, se ilustra el procesamiento digital de imágenes en bruto con lente y menor fluorescencia. Se utiliza un algoritmo basado en muestreo compresivo para lograr una resolución espacial inferior a cuatro micrones, resolviendo pares de microesferas estrechamente empaquetadas con un diámetro de dos micrones. Los recuadros muestran comparaciones con objetivos microscópicos de 40 x, que coinciden muy bien con las imágenes fluorescentes decodificadas.Aquí, D se refiere a las distancias centro a centro en las imágenes de microscopio. Mientras que DCS se refiere a las distancias centro a centro en la lente CS decodificada, imágenes menos fluorescentes. Esta figura muestra los resultados de la imagen sin lente de células blancas de la sangre marcadas fluorescentemente.Las imágenes brutas sin lente se descodifican rápidamente mediante un descodificador basado en CS, lo cual concuerda muy bien con una imagen de microscopio convencional de la misma muestra adquirida con un objetivo de 10 x. Además de la obtención de imágenes si es necesario, los objetos fluorescentes descodificados también pueden contarse automáticamente utilizando una interfaz desarrollada personalizada para aplicaciones de citometría en chip. Aquí se ilustra una interfaz personalizada, automatizada para el conteo de objetos fluorescentes en matlab. Acabamos de demostrar el procedimiento para la microscopía fluorescente sin lente de células marcadas y microesferas a través de un campo de visión de ocho centímetros cuadrados.Una plataforma de imagen comparada de este tipo con el decodificador compresivo rápido en segundo plano. Será bastante variable para aplicaciones de citometría de alto rendimiento, análisis de microelementos raros e investigación de células reales.

lensless-fluorescent-microscopy-on-a-chip

Research

Investigación

JoVE Journal

Bioengineering

Bioingeniería

Lensfree en el chip de imagen y caracterización de las células se ilustra. Este enfoque de células en el chip de imagen proporciona una herramienta compacta y rentable para el diagnóstico médico y de alto rendimiento de aplicaciones de la biología celular, por lo que es especialmente adecuado para entornos de escasos recursos.

Sin cristalino en el chip de imagen de las células proporciona una nueva herramienta de alto rendimiento Biología celular y el diagnóstico médico

Gota de plataformas basadas en microfluidos son candidatos prometedores para la experimentación de alto rendimiento, ya que son capaces de generar picolitros, la auto-compartimentado barcos bajo costo en las tasas de kHz. Mediante la integración con rápido, sensible y de alta resolución espectroscópica métodos de fluorescencia, la gran cantidad de información generada dentro de estos sistemas se puede extraer de manera eficiente, aprovechar y utilizar.

Métodos de detección de fluorescencia para las plataformas de las gotas de microfluidos

Lensfree tomografía óptica es una técnica de microscopía tridimensional que ofrece una resolución espacial de &lt;1 m × m &lt;1 × menos de 3 micras x, y y z dimensiones, respectivamente, más una gran imagen-volumen de 15-100...

Lensfree en el chip tomográfica Microscopía empleo de multi-ángulo de iluminación y píxeles de super-resolución

Este video muestra la tinción de inmunofluorescencia de neuronas de hipocampo de rata cultivadas dentro de un chip microfluídico para analizar la maduración neuronal y la conectividad.

Inmunotinción de fluorescencia de neuronas del hipocampo de rata dentro de un chip microfluídico

Nosotros revisamos nuestros resultados recientes sobre la integración de la microscopía fluorescente y herramientas de imágenes de citometría de flujo en un teléfono celular usando compactas y económicas-opto-fluídicos archivos adjuntos. Estos teléfono móvil basado micro-análisis de dispositivos podría ser útil para el análisis de citometría, tal como realizar diversas tareas de recuento de células, así como para el cribado de alto rendimiento de muestras de agua, por ejemplo, en entornos con...

Wide-field microscopía de fluorescencia y citometría de flujo fluorescente de imágenes en un teléfono móvil

La comunicación entre celulares es fundamental para el control de diversas actividades fisiológicas dentro y fuera de la célula. En este trabajo se describe un protocolo para la medición de la naturaleza espacio-temporal de las secreciones de células individuales. Para ello, se utiliza un enfoque multidisciplinario que integra nanoplasmonic etiqueta libre de detección con imágenes de células vivas.

Una técnica-Label libre para el Imaging espacio-temporal de las secreciones sola célula

Aquí se muestra la preparación de bicapas lipídicas planas funcionalizadas con proteínas, la determinación de la movilidad de las proteínas en su interior y la medición de las densidades de las proteínas. Se esboza una hoja de ruta para la construcción de un microscopio de reflexión interna total con reducción de ruido, que permite visualizar fluorocromos residentes de una sola capa con alta resolución espacio-temporal.

Bilayers Individual Molécula microscopía de fluorescencia en planar compatibles

La detección de fluorescencia multicolor en microfluídica de gotas suele implicar sistemas de detección basados en microscopio de epifluorescencia voluminosos y complejos. Aquí describimos un esquema de detección multicolor compacto y modular que utiliza una matriz de fibras ópticas para codificar temporalmente los datos multicolor recopilados por un solo fotodetector.

Multicolor detección por fluorescencia de la gotita de microfluídica el uso de fibras ópticas

Microscopía lente libre de vídeo nos permite supervisar cultivos celulares directamente dentro de la incubadora. Aquí describimos el protocolo completo utilizado para adquirir y analizar una adquisición largo 2,7 días de cultivos de células HeLa, conduce a un conjunto de datos de 2.2 x 106 mediciones de morfología de la célula individual y ciclo celular 10584 pistas.

Lente libre Video microscopia para la dinámica y el análisis cuantitativo del cultivo de células adherentes

Las imágenes espectrales se han convertido en una solución fiable para la identificación y separación de múltiples señales de fluorescencia en una sola muestra y pueden distinguir fácilmente las señales de interés del fondo o la autofluorescencia. Las imágenes hiperespectrales de análisis de excitación mejoran esta técnica al reducir el tiempo de adquisición de imagen necesario y, al mismo tiempo, aumentar la relación señal-ruido.

Microscopía de imágenes hiperespectrales de análisis de excitación para discriminar eficientemente las señales de fluorescencia

La microscopía óptica de superresolución basada en chips es un enfoque novedoso para la microscopía de fluorescencia y ofrece ventajas en la rentabilidad y el rendimiento. Aquí, los protocolos para la preparación de chips y la toma de imágenes se muestran para la microscopía TIRF y la microscopía de superresolución basada en localización.

Fluorescencia de reflexión interna total de alto rendimiento y microscopía de reconstrucción óptica estocástica directa utilizando un chip fotónico

Aprende microscopía fluorescente sin lentes sobre chip utilizando algoritmos de decodificación digital y muestreo compresivo. Esta plataforma compacta permite imágenes de alto rendimiento con resolución menor a 4μm.

Microscopía fluorescente sin lentes en un chip

Explorar más videos