Name: La determinación óptima de la actividad citotóxica de las células T específicas Her2Neu CD8 Humanos comparando el Ensayo de liberación de Cr51 al Sistema xCELLigence (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-08-08T12:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 31 s
Description: Aprende a medir la actividad citotóxica de células T CD8 específicas de antígeno mediante un ensayo basado en impedancia en tiempo real. Este método ofrece mayor sensibilidad y requiere menos células que el ensayo de liberación de cromo tradicional.

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Este trabajo fue apoyado por becas a Keith L. Knutson de la Susan G. Komen para la fundación de la curación y la NIH / NCI 9R01 CA152045 y P50-CA116201.

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Producción y acceso gratuito de este video-artículo es patrocinado por Roche Diagnostics.

Células T CD8 son importantes para la respuesta inmune adaptativa, siendo capaz de matar directamente las células infectadas o malignas 4. Mientras que hay varias maneras de medir el número de antígenos específicos de células T CD8 (por ejemplo, ELIspot, tetrámero, citometría de flujo), a menudo es útil saber si estas células son funcionalmente citotóxica 3. El ensayo más reconocible para evaluar la función citotóxica es la CRA, que se considera el ensayo estándar de oro 4. Las principales limitaciones de la CRA son (1) el requisito de radiactividad, (2) la falta de sensibilidad, (3) la falta de información sobre el mecanismo, (4) requisito de grandes cantidades de células, y (5) conjunto laborioso arriba. Así, en la última década, ha habido un interés en la adopción de nuevas estrategias para minimizar estas limitaciones. Fecha enfoques son los que miden la caspasa release 4, BLT esterasa activity5 y expresión en la superficie de CD107 6. La presente manuscrito sugiere queel ensayo basado en impedancia, realizado en el sistema xCELLigence Roche, también puede ser útil como una alternativa a la CRA. La capacidad de adaptar el enfoque basado en impedancia se basa en la observación de que las células T, que no se adhieren fuertemente a las superficies, no parece tener mucho impacto en la impedancia disminuyendo así cualquier preocupación de la interferencia directa de las células T con la medición. Se espera que la mano de obra necesaria para el uso del sistema de ensayo de impedancia a ser significativamente menos principalmente debido a la eliminación de las preocupaciones reguladoras para el uso de radiactividad. La única notable inconveniente del sistema basado en impedancia es que se requiere una inversión de $ 50,000 a $ 60,000 para la compra de la unidad xCELLigence. Sin embargo, la unidad de xCELLigence elimina la necesidad de un contador de radiación y es mucho más versátil, siendo útil para la evaluación de la respuesta celular a los medicamentos y la migración, además de la citotoxicidad de células T 8. Las observaciones que losla disminución en la impedancia célula tumoral es dependiente de la dosis, como se representa en la figura 2, con una pendiente bastante empinada después de una simple función cuadrática secundaria sugiere que el ensayo podría ser utilizado en ensayos de dilución limitante (LDA) para estimar la frecuencia de células citotóxicas 9 . Una de las ventajas con el enfoque basado en impedancia es que el número de células T y las células tumorales requeridos es menor que el CRA, haciendo LDA potencialmente más factible. Por ejemplo, en el CRA, en una proporción de 1:40, x 10 5 células tumorales 1 por pocillo son plateado, que requiere 4 x 10 6 Total de las células T por pocillo. Sin embargo, en el ensayo basado en impedancia, sólo se necesitan 1,5 10 4 células tumorales x por pocillo, que consume sólo 6 x 10 5 total de las células T por pocillo. Por lo tanto, el ensayo basado en impedancia usa 85% menos de células T y las células tumorales. Esta reducción sugiere que el sistema basado en impedancia podría ser adaptado a la vigilancia inmunológica en los ensayos clínicos humanos donde tél volúmenes de extracciones de sangre puede ser limitada. También, mientras que el CRA se limita a un solo punto de tiempo, el ensayo de impedancia basada recoge datos en tiempo real continuos, lo que permite al usuario comparar múltiples puntos de tiempo de lisis en el mismo experimento con un mínimo de mano de obra y las células adicional. Cálculos de frecuencia potencialmente podrían combinarse con otras estrategias que no miden la función, tales como análisis de tetrámero para establecer la relación de células T citotóxicas funcionales a antígenos específicos de las células T CD8 total de 10. Una de las características más atractivas del enfoque basado en impedancia es que, a diferencia de la mayoría de los otros ensayos, la citotoxicidad se puede controlar en tiempo real, por lo que es potencialmente más fáciles de estudiar las interacciones celulares con el uso de inhibidores o anticuerpos. Otra es que el método puede ser adecuado para las células tumorales que resisten etiquetado. Por último, puesto que las células tumorales no-muertos no están etiquetados y permanecen estériles, aún más la cosecha y el estudio de las células de células resistentes a T es posible. En resumen, si bien ambos sistemas proporcionan los datos de eliminación del tumor en respuesta a las células T específicas, el ensayo basado en impedancia es más sensible que la CRA y proporciona una plataforma más flexible.

<table><tbody><tr><td>Ficoll-Paque Plus </td><td>GE Healthcare</td><td>17-1440-03</td><td>Utilizado para aislar PBMCs de la sangre </td></tr><tr><td>RPMI 1640 </td><td>Cellgro</td><td>10-040-CV</td><td>Medio de cultivo celular </td></tr><tr><td>SFB </td><td>Denville Scientific</td><td>FB5001-H</td><td>Medio de cultivo celular </td></tr><tr><td>IL-2 humano </td><td>eBioscience</td><td>14-8029-81</td><td>Para estimular el crecimiento de linfocitos T </td></tr><tr><td>Interferón gamma humano </td><td>Ciencias Celulares</td><td>CR2026</td><td>Para estimular la expresión de MHC en células tumorales </td></tr><tr><td>Péptido HER-2/neu p369-377 </td><td>Núcleo de síntesis de péptidos de la Clínica Mayo</td><td>secuencia de aminoácidos KIFGSLAFL</td><td>Se une al HLA-A2 </td></tr><tr><td>Péptido p58-66 de la influenza </td><td>Núcleo de síntesis de péptidos de la Clínica Mayo</td><td>secuencia de aminoácidos GILGFVFTL</td><td>Se une al HLA-A2 </td></tr><tr><td>Human CD3/CD28 Dynabeads </td><td>Invitrogen</td><td>111-61D</td><td>Para la activación y expansión no específicas de linfocitos T </td></tr><tr><td>Cromo-51 </td><td>MP Biomedicals</td><td>62015</td><td>Reactivo de marcado CRA </td></tr><tr><td>E-placa </td><td><a href="http://www.aceabio.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Grupo Roche</a></td><td>05469830001</td><td>Para unidad de impedancia xCelligence </td></tr><tr><td>Placa Luma 96 </td><td>PerkinElmer, Inc.</td><td>6005630</td><td>Para medir la radiactividad en el Top Count NXT. </td></tr><tr><td>Estación xCelligence RTCA DP </td><td><a href="http://www.aceabio.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Roche Applied Science</a></td><td>RTCA DP</td><td>Unidad de impedancia </td></tr><tr><td>Top Count NXT </td><td>PerkinElmer, Inc.</td><td>C990601</td><td>Centelleo &amp;amp; Contador de luminiscencia </td></tr><tr><td>Ligando Fas anticuerpo</td><td>BD Biosciences</td><td>556372</td><td>Para bloquear las interacciones entre Fas y su ligando</td></tr><tr><td>anticuerpo HLA-A2 BB7.2</td><td>BD Biosciences</td><td>551230</td><td>Para bloquear HLA clase I</td></tr><tr><td>IgG2b de ratón, &amp;#954;</td><td>BD Biosciences</td><td>555740</td><td>Control de isotipo para HLA clase I</td></tr><tr><td>Línea tumoral SKBR3</td><td>ATCC</td><td>HTB-30</td><td>Adenocarcinoma</td></tr><tr><td>Línea tumoral MCF7</td><td>ATCC</td><td>HTB-22</td><td>Adenocarcinoma</td></tr><tr><td>línea tumoral HCC1419</td><td>ATCC</td><td>CRL-2326</td><td>Carcinoma ductal primario</td></tr><tr><td>línea tumoral BT20</td><td>ATCC</td><td>HTB-19</td><td>Carcinoma</td></tr></tbody></table>

la determinación óptima de la actividad citotóxica de las células t específicas her2neu cd8 humanos comparando el ensayo de liberación de cr51 al sistema xcelligence

Determining Optimal Cytotoxic Activity of Human Her2neu Specific CD8 T cells by Comparing the Cr51 Release Assay to the xCELLigence System

Citotóxicos células T CD8 constituyen un subgrupo de células T que son capaces de inducir la muerte de las células huésped infectadas o malignas 1. Estas células expresan un receptor especializado, llamado el receptor de células T (TCR), que puede reconocer un péptido antigénico específico unido a moléculas del HLA de clase I 2. El acoplamiento de las células infectadas o las células tumorales a través de sus resultados molécula de clase I HLA en la producción de moléculas líticas tales como granzimas y perforina que resulta en la muerte de células diana. Si bien es útil para determinar las frecuencias de antígenos específicos de células T CD8 usando ensayos tales como el ELIspot o citometría de flujo, sino que también es útil para determinar la fuerza de CD8 respuestas de células T utilizando ensayos de citotoxicidad 3. El ensayo más reconocible para evaluar la función citotóxica es el ensayo de liberación de cromo (CRA), que se considera un ensayo estándar de 4. El CRA tiene varias limitaciones, incluyendo la exposición de las células a la radiación gamma, lacuse de recibo de la reproducibilidad, y un requisito para un gran número de células. Durante la última década, ha habido un interés en la adopción de nuevas estrategias para superar estas limitaciones. Fecha enfoques son los que miden la caspasa versión 4, la actividad esterasa BLT 5 y expresión en la superficie de CD107 6. El ensayo basado en impedancia, utilizando el sistema de xCELLigence Roche, fue examinado en el presente documento por su potencial como una alternativa a la CRA. Impedancia u oposición a una corriente eléctrica se produce cuando las células tumorales adherentes se unen a placas de electrodo. Las células tumorales se desprenden después de matanza y la impedancia eléctrica se reduce que se puede medir por el sistema xCELLigence. La posibilidad de adaptar el enfoque basado en impedancia para evaluar la muerte celular se basa en la observación de que las células T no se adhieren fuertemente a la mayoría de las superficies y no parece tener mucho impacto en la impedancia disminuyendo así cualquier preocupación de intervención directa de las células T conla medición. Los resultados muestran que el ensayo basado en impedancia puede detectar cambios en los niveles citotóxicos de las células T específicas de antígeno CD8 con el aumento de la sensibilidad relativa a la CRA estándar. Con base en estos resultados, los enfoques basados ​​en la impedancia pueden ser buenas alternativas a las ACC u otros enfoques que tienen como objetivo medir la funcionalidad de células T CD8 citotóxicas.

El ensayo de liberación de cromo, un ensayo común para la detección de la actividad de células T citotóxicas, tiene varias limitaciones. El uso de células T CD8 específicas de antígeno y la línea tumoral de cáncer de mama humano, SKBR3, en el presente artículo, un enfoque basado en impedancia se examinó por la capacidad de detección de muerte celular.

La determinación óptima de la actividad citotóxica de las células T específicas Her2Neu CD8 Humanos comparando el Ensayo de liberación de Cr51 al Sistema xCELLigence

Las células T CD8 citotóxicas constituyen un subgrupo de células T capaces de inducir la muerte de células huésped infectadas o malignas1. Estas células expresan...

El objetivo general del siguiente experimento consiste en determinar la actividad de los linfocitos T citotóxicos comparando un enfoque basado en la impedancia mediante el sistema EXOGEN con el ensayo de liberación de cromo. El primer paso se logra separando células mononucleares de la sangre periférica de sangre completa utilizando fial. A continuación, se añaden las CMPSP a pozos junto con antígeno peptídico, IL dos recombinante humana y CMPSP irradiadas para generar linfocitos T CD ocho específicos del antígeno.Las células T CD8 específicas para el antígeno se cultivan luego en cocultivo con células tumorales en ambos ensayos para inducir la muerte celular tumoral. Se obtienen resultados que muestran el porcentaje de lisis de las células tumorales utilizando tanto el método de impedancia como el ensayo de liberación de cromo. La principal ventaja de esta técnica frente a métodos existentes como el ensayo de liberación de cromo es que el sistema basado en impedancia recopila datos en tiempo real y requiere menos células, las cuales no necesitan etiquetado alguno. Para este protocolo, la sangre de donantes sanos normales positivos para HLA A2 proporciona una fuente de pbmc o células mononucleares de sangre periférica siguiendo el protocolo del fabricante.Utilice F call PA plus para separar los P BMCs de la sangre. A continuación, cargue aproximadamente 4 millones de P BMCs en placas de seis pocillos con dos mililitros de medio por pocillo. A cada pocillo, añada el péptido de unión HLAA dos para obtener una concentración final de 10 microgramos por mililitro en cultivo.Las células en días alternos para ayudar a estimular y expandir los linfocitos T. Añada medio fresco suplementado con IL recombinante humana dos a una concentración final de 50 unidades por mililitro. Después de una semana, prepare un cultivo de pbmc autólogos, irradie las células y expóngalas durante dos horas al mismo hla.Un péptido con dos sitios de unión a 10 microgramos por mililitro restimula la cultura al agregar un mililitro de las PBM C autólogas irradiadas a cada una. Continúe agregando medio fresco suplementado con IL-2 cada dos días; tras otra semana, restimule las culturas de la misma manera por segunda vez. Después de seis días más en cultivo, las células estarán listas para su uso.Prepare la estación de medición de impedancia de inteligencia equilibrándola a 37 grados Celsius bajo un 5 % de dióxido de carbono durante al menos una hora. Recolecte células tumorales humanas al 75 % de confluencia utilizando tripsina al 0,25 % y centrifugación. Cuente las células tumorales utilizando un hemocitómetro y reconstitúyalas en RPMI.Medio tumoral a una concentración de 7.500 células por microlitro. A continuación, el software del agente Excel configuró la página de diseño con el esquema de pocillos. Configure la página de programación para tomar lecturas de impedancia cada cinco minutos durante un período de 40 horas; durante las primeras 18 horas, el sistema Xceligent solo tomará lecturas de impedancia de las células tumorales.Luego, agregue 100 microlitros de medio tumoral RPMI por pocillo. Tome una lectura de fondo en los EPL midiendo la impedancia en ausencia de células. Después de añadir las células tumorales, coloque las placas en la estación y comience a tomar lecturas.Las células tumorales comenzarán inmediatamente a adherirse a los EPL. Tras aproximadamente 18 horas de incubación, las células tumorales se habrán unido a los EPL y se habrán duplicado hasta alcanzar 15.000 células tumorales por pocillo. En este momento, recoger las células T preparadas mediante raspado suave y centrifugación con agitación.Los linfocitos T, reconstitúyalos en medio RPMI con 10% de FBS y cuéntelos utilizando un hemocitómetro. Una vez conocida la densidad celular, prepare una serie de diluciones al doble de los linfocitos T de tal manera que, cuando se añadan 200 microlitros de linfocitos T a las células tumorales, la concentración más alta sea de 40 linfocitos T por célula tumoral. La última dilución de la serie debe proporcionar 1,25 linfocitos T por célula tumoral.Pausar la estación EXOGEN y retirar el EPL utilizando una pipeta. Eliminar el medio de los pozos, luego cargar 200 microlitros de linfocitos T utilizando todas las concentraciones de la serie de diluciones como control negativo. Usar medio puro, devolver el EPL a la estación y continuar el programa al final del ensayo.Normalice los resultados. Siga siempre los procedimientos institucionales de seguridad radiológica al trabajar con cromo 51 y células diana marcadas con cromo 51, y utilice blindaje para reducir la exposición a la radiación. Comience pulsando las células tumorales durante dos horas a 1 millón de células por mililitro con 10 microlitros por mililitro de cromo 51 fresco.A continuación, lave las células tumorales con 10 mililitros de medio RPMI con 10 % de FBS, centrifugue las células y reconstitúyalas en el mismo medio a una concentración de un millón de células por mililitro. Luego, en una placa de 96 pocillos con fondo redondo, agregue 100.000 células tumorales por pocillo para calcular la liberación espontánea.No agregue nada a seis de estos pozos. Añada 100 microlitros de Triton X-100 a otros seis pozos restantes para lisar las células y así calcular la liberación máxima. Añada linfocitos T a la placa utilizando la serie de diluciones preparada previamente.Ahora incube las placas durante cinco horas y recolecte muestras de 50 microlitros de sobrenadante de cada una. Cargue las muestras en una placa luma tras secar las placas en la campana durante la noche a temperatura ambiente. Mida sus CPM utilizando un contador gamma T-cell y SKBR tres. Las células cancerosas se cultivaron en placas X intelligence y se midió el índice de células, que es un reflejo de la impedancia de la placa, ya que las células T no requieren adherencia para proliferar.Su efecto sobre la impedancia fue despreciable durante un cultivo de 40 horas. Las células cancerosas cultivadas solas mostraron una medición de impedancia creciente. Sin embargo, la adición de células T a las 18 horas interrumpe esta tendencia.Este evento requiere una normalización del software tras la adición de linfocitos T y se investiga más a fondo en el siguiente experimento. Cuando las células SK BR 3 se cultivaron en co-cultivo con concentraciones variables de linfocitos T, las reducciones en la impedancia fueron muy claramente dependientes de la dosis de linfocitos T; los datos se recopilaron cada cinco minutos durante tres ensayos en la marca de 10 horas. Los índices celulares siguieron un polinomio de segundo orden en el rango de concentraciones de linfocitos T, lo que indica que la estación Exogen monitorea en tiempo real la muerte mediada por linfocitos T CD8+ de los tumores SK B 3 como una caída en el índice celular, para determinar si las reducciones en la impedancia de las células SK BR 3 inducidas por los linfocitos T eran específicas del antígeno.Las células SK KBR tres fueron co-cultivadas con linfocitos T específicos para FLU positivos para HLA A dos que no reconocen HER dos nuevo. Estas células presentaron una actividad lítica significativamente menor. Para determinar más a fondo si los linfocitos T específicos para HER dos nuevo estaban induciendo muerte de manera específica al antígeno, se incorporó un anticuerpo contra el ligando rápido en las co-cultivos. El anticuerpo no redujo la actividad lítica de los linfocitos T específicos para HER dos nuevo P 360 9.Sin embargo, con linfocitos T que fueron activados de manera no específica con microesferas anti-CD3, CD28, el anticuerpo sí inhibió la lisis para determinar si la muerte ocurría de manera dependiente de la clase I del HLA. Se añadieron al cultivo conjunto ya sea un anticuerpo anti-clase I del HLA o un anticuerpo de control isotípico. Los resultados respaldaron fuertemente esta hipótesis.Las células T se cultivaron posteriormente en cocultivo con otras células cancerosas en una proporción de uno a cinco. La línea celular tumoral negativa para HLA A2, BT 20, se utilizó como control negativo. Los resultados muestran que el método es útil para múltiples células tumorales adherentes diana.Se añadieron cultivos mixtos de las nuevas células T específicas HER dos P 360 9 a células diana marcadas con cromo 51, seguido de análisis CRA. El ensayo de inteligencia parece más sensible para analizar la consistencia. La variación intramuestral se calculó como el porcentaje del coeficiente de variación en cada relación celular entre uno a 40 y uno a cinco.Esto fue inferior al 15 % en las proporciones celulares más bajas. Sin embargo, el porcentaje de CV fue alto o impredecible. Además, se examinó la variabilidad de la lisis de células T SK BR tres por co-cultivo con diferentes líneas de células T específicas para P 360 9.Los datos se generaron con 30 días de diferencia. Los ensayos se realizaron por triplicado y los resultados fueron muy similares. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo determinar la actividad de los linfocitos T citotóxicos utilizando linfocitos T CD8 específicos para antígenos y células tumorales, mediante un enfoque basado en impedancia.

determining-optimal-cytotoxic-activity-human-her2neu-specific-cd8-t

Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

Se describe una sola célula de alto rendimiento de ensayo para medir la citotoxicidad de las células T cuando se incuba con las células diana tumorales. Este método emplea una matriz densa, elastómero de sub-nanolitros pozos (~ 100.000 pozos / matriz) para confinar espacialmente las células T y las células diana en proporciones definidas, y está acoplado a la microscopía de fluorescencia para monitorizar efector-diana conjugación y posterior apoptosis.

Cuantitativo de alto rendimiento de una sola célula de ensayo de citotoxicidad de las células T

Este protocolo describe un ensayo de citotoxicidad sensible basado en células. Al enumerar la disminución de la frecuencia de linfocitos T CD4+ diana vivos en presencia de un número cada vez mayor de linfocitos T CD8+ efectores, este ensayo permite la evaluación directa de la actividad citolítica de los linfocitos T CD8+ específicos del antígeno.

Ensayo de citometría de flujo basado en células para medir la actividad citotóxica

Describimos un sistema de ensayo cuantitativo de citolisis in vitro en tiempo real para evaluar la potencia de las células T del receptor de antígeno quimérico dirigidas a células tumorales líquidas y sólidas. Este protocolo se puede ampliar para evaluar otras células efector inmune, así como tratamientos combinados.

Un ensayo de potencia en tiempo real para células T receptores de antígeno quimérico dirigido a células cancerosas sólidas y hematológicas

Aquí, describimos un método de cultivo in vitro de co para recurrentemente desafío orientada a tumor las células T, que permite el análisis fenotípico y funcional de la actividad de las células T antitumorales.

En Vitro Tumor celular Rechallenge de evaluación predictiva de antígeno quimérico del Receptor de la célula T función antitumoral

Describimos aquí un ensayo de matanza in vivo basado en citometría de flujo que permite el examen de inmunodominancia en las respuestas de linfocitos T citotóxicos (CTL) a un antígeno tumoral modelo. Proporcionamos ejemplos de cómo este ensayo elegante se puede emplear para estudios mecaniísticos y para pruebas de eficacia de fármacos.

Confección de ensayos de citotoxicidad in vivo para estudiar inmunodominancia en respuestas de células T CD8+ específicas de tumores

Se desarrolló un sistema de ensayo de alto rendimiento in vitro de alta precisión para evaluar medicamentos contra el cáncer utilizando organoides tumorales (PDO) derivados del paciente, similares a los tejidos cancerosos, pero que no son adecuados para sistemas de ensayo de alto rendimiento in vitro con placas de 96 pocillos y 384 pocillos.

Ensayo in vitro de alto rendimiento utilizando organoides tumorales derivados del paciente

Este protocolo presenta una técnica automatizada de alto rendimiento basada en imágenes para identificar compuestos que modulan la destrucción de células de cáncer de mama mediada por células asesinas naturales en presencia de un anticuerpo terapéutico anti-HER-2.

Ensayo de cribado de alto contenido para la identificación de compuestos modificadores de citotoxicidad celular dependientes de anticuerpos

Aquí, presentamos un método para identificar compuestos que modulan el mecanismo ADCC, un importante mecanismo de destrucción de células cancerosas de anticuerpos antitumorales. El efecto citotóxico de las células NK se mide en esferoides de células de cáncer de mama en presencia de trastuzumab. El análisis de imágenes identifica células asesinas y diana vivas y muertas en esferoides.

Cuantificación de la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos en un modelo de esferoide tumoral: aplicación para el descubrimiento de fármacos

Aquí, presentamos un protocolo para un ensayo de citotoxicidad mediada por células (ADCC) dependiente de anticuerpos utilizando un kit de bioensayo ADCC. Este método ofrece una valiosa herramienta para dilucidar el mecanismo ADCC y evaluar el potencial terapéutico de los anticuerpos en la inmunoterapia contra el cáncer.

Evaluación de la citotoxicidad mediada por células dependientes de anticuerpos en células cancerosas mediante el bioensayo reportero de citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos

El presente protocolo describe un flujo de trabajo experimental que permite el análisis ex vivo de la estimulación de células T humanas en un sistema de cocultivo alogénico con células tumorales pretratadas.

Análisis de la actividad de las células T humanas en un entorno de cocultivo alogénico de células tumorales pretratadas

Este protocolo proporciona un flujo de trabajo estandarizado in vitro. para la medición consistente de la citotoxicidad natural, mediada por receptores de antígenos quiméricos y dependiente de anticuerpos en células humanas natural killer mediante imagen de células vivas y citometría de flujo.

Cuantificación de la citotoxicidad de células NK potenciada por receptores de antígenos quiméricos y anticuerpos terapéuticos mediante imagen de células vivas y citometría de flujo

Aprende a medir la actividad citotóxica de células T CD8 específicas de antígeno mediante un ensayo basado en impedancia en tiempo real. Este método ofrece mayor sensibilidad y requiere menos células que el ensayo de liberación de cromo tradicional.

La determinación óptima de la actividad citotóxica de las células T específicas Her2Neu CD8 Humanos comparando el Ensayo de liberación de Cr51 al Sistema xCELLigence (Video) | JoVE Journal

La determinación óptima de la actividad citotóxica de las células T específicas Her2Neu CD8 Humanos comparando el Ensayo de liberación de Cr51 al Sistema xCELLigence

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