Name: La extracción de RNA a partir de células Neuroprecursor utilizando el kit de Bio-Rad ARN total (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-31T23:51:30.000+00:00
Duration: 17 min 25 s
Description: Aprenda a extraer ARN de células neuroprecursoras utilizando el kit Bio-Rad para obtener rendimientos consistentes y de alta calidad. Este método demuestra un protocolo fiable para estudios de expresión génica en neurociencia.

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Los autores no tienen nada que revelar.

la extracción de rna a partir de células neuroprecursor utilizando el kit de bio-rad arn total

RNA Extraction from Neuroprecursor Cells Using the Bio-Rad Total RNA Kit

La extracción de RNA a partir de células Neuroprecursor utilizando el kit de Bio-Rad ARN total

Hola, soy Josh Sh, quien soy estudiante de posgrado en el laboratorio del Dr. Ed Maki en la Universidad de California en Irvine. Les mostraré cómo extraer ARN de células precursoras neuronales utilizando este kit BioRad para ARN mini. Ya he estado utilizando este kit durante varios años en este laboratorio y siempre me ha dado resultados consistentes con altos rendimientos.Entonces, las células que utilizamos son células precursoras neurales Eton y media que se han disociado agudamente a partir de cortezas embrionarias, y generalmente las sembramos en una placa de cultivo de tejidos de 24 pocillos tratada con PD L y recubierta con laminina, a una densidad de cien mil células por pocillo. Antes de comenzar, debo indicarle que debe trabajar en un banco designado específicamente para sus procedimientos con ARN. Lo primero que debe hacer es asegurarse de que el banco de ARN esté limpio.La forma adecuada de limpiar la bancada es usar este RNA zap. Básicamente, elimina cualquier ARN porque el RA destruye fundamentalmente sus ARN. Otra cosa es usar guantes siempre que manipule la extracción, ya que su piel está llena de estos ARN.Así que está totalmente prohibido. Bien, lo que tengo aquí

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Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Se presenta un método para la generación de cDNA a partir del ARNm del medio ambiente. En general, el ARN total se recogen la primera del medio ambiente, se elimina selectivamente rRNA, mRNA se amplifica de forma selectiva, y cDNA sintetizado a partir de la piscina es la secuencia de ARNm enriquecido. Secuencias recuperadas se pueden anotar utilizando las técnicas de bioinformática para identificar los genes que se expresan.

El análisis de la expresión génica de las comunidades microbianas marinas con Transcriptómica Ambiental

Se describe un procedimiento que utiliza láser microdisección de captura para aislar y extraer el ARN de una población celular homogénea, las neuronas piramidales en la capa III de la circunvolución temporal superior en los cerebros humanos postmortem. Estamos posteriormente amplifican linealmente (T7-based) mRNA, y se hibridan la muestra a la Affymetrix humanos X3P microarrays.

La obtención de ARN de alta calidad a partir de poblaciones de células individuales en tejido cerebral humano post-mortem

Debido a la naturaleza transitoria de la pre-ARNm, que pueden ser difíciles de aislar y...

Un rápido de alto rendimiento para el método de asignación de Ribonucleoproteínas (RNP) de Derechos Humanos pre-mRNA

En este artículo se describe un método simple para la recolección de las células individuales de rata cultivos primarios de neuronas y posterior análisis de transcriptoma utilizando la amplificación ARNA. Este enfoque es generalizable a cualquier tipo de célula.

El análisis del transcriptoma de células individuales

Un paso a paso el protocolo para aislar e identificar los complejos de ARN asociados a través de RIP-Chip.

Método para el aislamiento e identificación de mRNAs, microRNAs y componentes proteicos de ribonucleoprotein complejos de extractos celulares usando RIP-Chip

Las interacciones ARN-proteína se encuentran en el corazón de muchos procesos celulares. Aquí, describimos un método in vivo para aislar ARN específico e identificar nuevas proteínas que están asociadas con él. Esto podría arrojar nueva luz sobre cómo se regulan los ARN en la célula.

Nuevas proteínas de unión a ARN aislamiento por la Metodología RaPID

La dos diferentes 3' amplificación rápida del cDNA extremos (3' RACE) protocolos descrito aquí hacen uso de dos diferentes polimerasas de la DNA para asignar las secuencias que incluyen un segmento del marco de lectura abierto (ORF), el codón de parada y el entero 3' UTR de una transcripción utilizando RNA obtenidos de líneas celulares de cáncer diferentes.

Adaptación de 3' amplificación rápida del CDNA termina para asignar las transcripciones en el cáncer

Este método de pull-down del RNA permite identificar los objetivos de RNA de un ARN largo no codificante (lncRNA). Basado en la hibridación de caseros, diseñadas anti-sentido oligonucleótidos sondas de ADN específicas para este lncRNA en un tejido adecuadamente fijo o línea celular, permite la captura de todos los objetivos de la lncRNA RNA eficientemente.

Procedimiento de ARN Pull-down para identificar dianas de ARN de un ARN largo no codificante

Los ARN circulares (arnar) son ARN no codificantes que pueden tener funciones en la regulación transcripcional y en las interacciones mediantantes entre proteínas. Tras la evaluación de los diferentes parámetros para la construcción de bibliotecas de secuenciación de circRNA, se compiló un protocolo utilizando la preparación total de la biblioteca de ARN varada con el pretratamiento RNase R y se presenta aquí.

Identificación de ARN circulares mediante secuenciación de ARN

La secuenciación de ARN de cuantificación absoluta (AQRNA-seq) es una tecnología desarrollada para cuantificar el panorama de todos los ARN pequeños en mezclas biológicas. Aquí, se demuestran los pasos de preparación de la biblioteca y procesamiento de datos de AQRNA-seq, cuantificando los cambios en el grupo de ARN de transferencia (ARNt) en Mycobacterium bovis BCG durante la latencia inducida por inanición.

AQRNA-seq para cuantificar ARNs pequeños

Aprenda a extraer ARN de células neuroprecursoras utilizando el kit Bio-Rad para obtener rendimientos consistentes y de alta calidad. Este método demuestra un protocolo fiable para estudios de expresión génica en neurociencia.

La extracción de RNA a partir de células Neuroprecursor utilizando el kit de Bio-Rad ARN total

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