El Paradigma Residente intruso: una prueba estandarizada para la agresión, la violencia y el estrés social

El objetivo general de este procedimiento es provocar de manera confiable un comportamiento agresivo ofensivo en ratas macho. En un entorno de laboratorio, el primer paso consiste en alojar a una rata macho adulta junto con una hembra esterilizada durante un período de al menos una semana. El día de la prueba, se prepara el equipo de grabación de video para registrar la interacción social.

A continuación, cuando está lista, se retira a la hembra compañera de la jaula, se introduce una rata macho desconocida en la jaula del macho residente y se les permite interactuar durante 10 minutos. En última instancia, el procedimiento tiene como objetivo el establecimiento y mantenimiento de un territorio por parte del macho residente, el cual está dispuesto a defender frente a intrusos. La ventaja del método es que permite el análisis del comportamiento social natural en un entorno de laboratorio, no solo en el macho residente, sino también en el intruso.

Este método puede ayudar a responder preguntas clave sobre la neurobiología y la neurofarmacología o la agresión funcional biológica, así como la violencia como patología de la agresión. La técnica puede utilizarse para estudiar las consecuencias del estrés social agudo o crónico en el intruso. Tenga en cuenta que el paradigma residente-intruso no está exento de preocupaciones éticas.

Puede producirse un sufrimiento grave en el macho intruso potencial. El sufrimiento animal siempre debe estar equilibrado con los objetivos científicos principales del experimento. La agresión ofensiva es un comportamiento altamente activo y, por lo tanto, se requiere suficiente espacio para su expresión completa.

Para obtener resultados óptimos, utilice jaulas de residentes que tengan al menos medio metro cuadrado de espacio en el suelo para facilitar el desarrollo de territorialidad y reducir el aislamiento social. Mantenga a cada residente con una hembra durante al menos una semana antes del inicio del experimento. Utilice hembras compañeras estériles pero con hormonas intactas.

Esto garantizará que la hembra sea receptiva sin quedar embarazada ni desarrollar agresión materna. Dado que la territorialidad se basa fuertemente en la presencia de señales olfativas, no cambie el lecho del terrario antes ni durante las pruebas. El animal intruso utilizado en los siguientes estudios debe provenir de una cepa no agresiva y tener un peso corporal ligeramente inferior al del macho residente.

Aunque la agresión puede ocurrir en cualquier momento del día, lo mejor es realizar la prueba durante la fase oscura, cuando la rata está más activa. Una hora antes de la prueba, retire a la hembra compañera de la jaula del animal residente. Configure una cámara de video sensible a la luz para grabar el comportamiento del residente y realizar un análisis posterior.

Para comenzar la prueba, introduzca un intruso macho desconocido en la jaula domicilio del residente. Observe su interacción conductual durante 10 minutos. Se registran comportamientos ofensivos así como comportamientos sociales.

Se muestra aquí el comportamiento de erguirse y el comportamiento de desplazamiento hacia. Esta es la amenaza lateral. Este es el ataque en estrechamiento, y esta es una persecución mostrada.

Aquí hay un período de exploración social seguido por un ataque de agresión. Hay algo de olfateo anogenital. Ahora una rata se mueve hacia la otra.

Este es el comportamiento de mantenerse agachado. Aquí hay una postura erguida. Este comportamiento es la amenaza lateral.

Observe los pelos erizados o la erección pilomotriz en el macho residente, seguida de la postura erguida y algo de exploración no social. Al finalizar la prueba, retire al macho intruso de la jaula y reintegre al macho residente con su hembra compañera. Los datos se analizan reproduciendo el video y puntuando los comportamientos con software especializado para medir los comportamientos violentos.

Introduzca un intruso como se mostró anteriormente y determine la latencia del ataque del macho residente. Una latencia muy corta es un primer indicador de violencia. Los ataques de mordedura dirigidos a partes vulnerables del cuerpo, como la garganta, el vientre y las patas, también son signos de mordeduras violentas.

Apuntar hacia el hocico del oponente indica un comportamiento defensivo del individuo que actúa. En caso de una herida grave en partes corporales vulnerables, el experimento debe interrumpirse. Dependiendo de la gravedad.

Esto puede considerarse un punto final humanitario o bien el intruso debe recibir la atención médica adecuada. Además, se demuestra un comportamiento violento cuando un macho residente ataca a un macho intruso anestesiado. La prueba con un macho anestesiado puede detenerse tan pronto como el residente realice el ataque.

El comportamiento agresivo del residente también puede evaluarse en un entorno novedoso. La ausencia de un cambio en la agresión en comparación con la jaula de alojamiento es un indicio de violencia. Para comenzar, seleccione un macho residente bien entrenado, altamente agresivo y no violento, y siga el protocolo demostrado anteriormente.

Observe al intruso en busca de diversos comportamientos. Después de un período de exploración no social, un individuo se aleja del otro, muestra un comportamiento sumiso y huye. Aquí se muestra una postura erguida defensiva.

Después de la prueba, devuelva al intruso a su jaula de origen y calcule la puntuación total de defensa, que es la suma del tiempo empleado en huir, postura defensiva erguida, sumisión e inmovilización. El estrés social se induce siguiendo el mismo protocolo para estrés social crónico.

Mantenga al intruso en la jaula del residente, pero separado del residente por una pantalla perforada. Esta figura muestra la distribución de frecuencia del puntaje de agresión ofensiva en una cepa silvestre originalmente feral de laboratorio, pero también en una cepa más común de ratas de laboratorio en la cepa tipo silvestre, aproximadamente un tercio de los animales son extremadamente agresivos, mientras que el fenotipo altamente agresivo está ausente en las ratas wistar. Este ejemplo muestra la distribución de diferentes categorías de comportamiento en el paradigma residente-intruso utilizando la cepa WTG como residentes y las ratas wistar como intrusos.

Aquí, el paradigma del residente intruso se utiliza en conjunto con la farmacología conductual. El agonista selectivo del receptor de serotonina 1A, alnesprona, induce una reducción dependiente de la dosis en la agresión ofensiva, que va acompañada de un aumento dependiente de la dosis en la exploración social. En algunos individuos, la agresión ofensiva puede escalonarse hasta convertirse en una forma violenta de agresión.

La forma violenta de agresión se caracteriza por ataques muy breves, latencia del ataque hacia un macho anestesiado o una hembra con heridas graves, y una relación muy baja de amenazas a ataques. Al utilizar este procedimiento para estrés social, es importante emplear una cepa de ratas agresivas como residentes.

Debe seleccionar individuos que muestren agresión ofensiva durante al menos el 30 % del tiempo de prueba. Después de ver este video, debería ser capaz de identificar correctamente todos los comportamientos realizados tanto por el residente como por el intruso. Además, debería ser capaz de reconocer la violencia.

No olvide que trabajar con el paradigma del intruso residente no está exento de preocupaciones éticas. El sufrimiento del macho intruso siempre debe tener una relación clara con los objetivos principales del experimento.