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DOI: 10.3791/50259-v
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El pez cebra es un sistema emergente para modelar enfermedades humanas del músculo esquelético. Se describe un método rápido y eficaz para aislar las miofibrillas del músculo esquelético de pez cebra embrionario y larval. Este método proporciona una preparación de alta densidad miofibra adecuada para el estudio de la morfología sola fibra muscular esquelética, localización subcelular de proteínas, y la fisiología muscular.
El objetivo general de este procedimiento es aislar de manera eficiente las fibras del músculo esquelético de los peces cebra embrionarios y larvales. Esto se logra preparando primero los cubreobjetos recubiertos de poli L lisina uno a cuatro días después de la fertilización, los embriones de pez cebra se disocian. A continuación, las fibras miométricas aisladas de los embriones disociados se colocan en los cubreobjetos de polilisina.
Finalmente, las fibras miométricas se fijan, se tiñen y se obtienen imágenes para el análisis de las proteínas musculares. En última instancia, se pueden obtener resultados que muestran la localización subcelular de las proteínas musculares mediante microscopía de inmunofluorescencia. La principal ventaja de esta técnica sobre los métodos existentes, como el análisis de embriones completos, es que permite estudiar con mayor detalle la morfología y la fisiología de las fibras musculares individuales.
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