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La capacidad para realizar con éxito soluciones es una habilidad básica de laboratorio realizada en prácticamente todos los experimentos biológicos y químicos. Una solución es una mezcla homogénea de soluto disuelto en líquido a granel conocida como el disolvente. Soluciones pueden ser descritas por su concentración de solutos, una medida de cuánto soluto está presente por unidad de solución. En este video, se presenta un procedimiento paso a paso de cómo hacer una solución con base de agua o acuosa, para aplicaciones biológicas. El video explica cómo calcular y medir la cantidad de soluto necesario para un volumen dado de solución. Se muestran métodos para disolver el soluto en agua purificada y ajustar el pH de la solución. Adecuada además de la cantidad suficiente (QS) para alcanzar el volumen deseado se demostraron en relación con el menisco antes de discutir los métodos para esterilizar la solución. Aplicaciones de hacer soluciones se presentan a través de la discusión de varias soluciones biológicas comúnmente usadas, tales como fosfato tampón salino (PBS) y sus usos en la investigación biológica. Estas soluciones son buffers que imitan a pH fisiológico y la osmolaridad de los líquidos celulares.
Soluciones es un procedimiento esencial en prácticamente todos biológicos y químicos experimentos llevados a cabo en todo el mundo.
Una solución se compone de una sustancia disuelta en líquido. La sustancia disuelta se conoce como soluto y el líquido a granel como el solvente. La mezcla homogénea resultante se conoce como la solución.
Soluciones pueden ser descritas por su concentración de solutos, una medida de cuánto soluto está presente por unidad de solución.
Fabricación de soluciones puede ser una habilidad básica de laboratorio, pero mala técnica puede significar la diferencia entre un experimento exitoso o fallido.
La primera consideración al hacer las soluciones es la seguridad. Es importante tomar las precauciones apropiadas, tales como usar guantes y una bata de laboratorio, dependiendo del tipo de productos químicos que está trabajando.
Hay muchas maneras diferentes de hacer lo que una solución. Este video demostrará la manera más común para hacer una solución de base de agua o acuosa.
En primer lugar determinar los moles de soluto que se necesita para lograr la concentración deseada en un volumen dado de solución. Entonces encubierto este valor a gramos utilizando el peso molecular o el número de gramos por mol, de la química.
Los productos químicos pueden ser pesados utilizando una balanza digital y un barco de pesaje.
Un cilindro graduado puede utilizarse entonces para medir un volumen de agua purificada que es aproximadamente tres cuartas partes del volumen final de solución.
Es imperativo que las soluciones acuosas estar preparados con agua purificada en lugar de agua del grifo. No hacerlo puede comprometer la calidad de la solución, no sólo el potencialmente múltiples experimentos abajo de la línea.
En este punto, el agua purificada debe ser transferido en un vaso de precipitados que contiene una barra de agitación en una placa de agitación magnética.
Los solutos medidos pueden añadirse al mezclar agua purificada. Revolviendo la mezcla, ayuda al soluto a disolver. Aplicación de calor también puede utilizarse para este propósito.
Una vez que todos los solutos se disuelve en solvente, el pH de la solución puede ajustarse mediante un medidor de pH. Para subir el pH, añadir hidróxido de sodio diluido a la agitación de la solución. Para bajar el pH, agregar ácido clorhídrico diluido. Asegúrese de añadir lentamente el ácido o la base, ya que el pH puede cambiar rápidamente.
papel pH puede utilizarse también para medir el pH de una solución, sin embargo el uso de resultados de un medidor de pH calibrado en una medición más precisa.
Luego se vierte la solución en un matraz aforado usando un embudo para que puede ser traído para arriba para su volumen final. Agregar la cantidad suficiente para alcanzar este volumen es conocido como Q.S.'ing la solución.
Asegúrese de que el menisco se alinee con la marca en el matraz aforado. En una solución acuosa, el menisco es cóncavo y debe leerse en el punto más bajo de la curva.
Al realizar la investigación biológica, específicamente aquellos que involucran las células vivas, soluciones deba ser esterilizados antes del uso. Esto puede hacerse en autoclave, que somete la solución a alta temperatura de vapor a alta presión.
Alternativamente, se puede esterilizar la solución mediante la ejecución sobre un filtro de 0,22 micras, que excluirá cualquier células bacterianas.
Ahora que tienes un conocimiento fundamental de cómo hacer soluciones, es hora de echar un vistazo a algunas soluciones utilizadas en el laboratorio y sus aplicaciones.
En la investigación biológica, numerosas soluciones están diseñadas para imitar los fluidos fisiológicos. Estas soluciones se conservan, que significa que resisten el cambio en el pH en un rango específico; generalmente, se mantiene pH alrededor de 7.4 para simular fluidos intracelulares y extracelulares.
Tamponada fosfato salino, o PBS, es un búfer utilizado en la investigación biológica que imita la osmolaridad y pH fisiológico. Osmolaridad se refiere a las total moles de soluto en una solución. Por ejemplo, una solución que contiene 1 mol de NaCl tiene 2 osmoles de soluto, ya que disocian los iones sodio y cloruro en la solución. PBS tiene concentraciones de iones que coinciden estrechamente con los de las células, lo que es una solución isotónica, lo que significa que la cantidad de soluto fuera de la célula es equivalente a lo que se encuentra dentro de la célula. PBS se compone de varias diversas sales en agua, como sales con grupos fosfato que mantienen un pH constante en el rango de 7.2 a 7.6.
Usos comunes de PBS en el laboratorio incluyen células de lavado y dilución de biomoléculas como proteínas.
Líquido cefalorraquídeo artificial o ACSF imita las concentraciones de electrolitos del líquido cerebroespinal. Esta solución debe estar recién preparada, y el pH, la osmolaridad y composición iónica deben ser supervisados cuidadosamente para que coincida con las condiciones in vivo.
ACSF se utiliza generalmente en los estudios electrofisiológicos para preparar rebanadas de cerebro y a inundar durante los experimentos. También puede servir como la solución extracelular durante la medición de patch clamp.
Solución de Ringer es una solución salina isotónica con un pH balanceado que se utiliza en la investigación biológica. Comúnmente se utiliza en experimentos in vitro con órganos y tejidos.
Sólo ha visto introducción de Zeus a hacer soluciones. En este video repasamos cómo hacer una solución de principio a fin... incluyendo cómo determinar la cantidad necesaria de soluto (A), cómo bien QS una solución (B) y los métodos de esterilización (C). También se revisaron algunas soluciones comunes, así como sus aplicaciones en la investigación biológica (D).
Gracias por ver y recuerda siempre utilizar la técnica adecuada al hacer soluciones.
La fabricación de soluciones es un procedimiento esencial involucrado en prácticamente todos los experimentos biológicos y químicos realizados en todo el mundo.
Una solución se compone de una sustancia disuelta en líquido. La sustancia disuelta se conoce como soluto y el fluido a granel como solvente. La mezcla homogénea resultante se denomina solución.
Las soluciones se pueden describir por su concentración de soluto, una medida de la cantidad de soluto presente por unidad de solución.
Hacer soluciones puede ser una habilidad básica de laboratorio, pero una técnica deficiente puede significar la diferencia entre un experimento exitoso o fallido.
La primera consideración a la hora de crear soluciones es la seguridad. Es importante tomar las precauciones adecuadas, como usar guantes y una bata de laboratorio, según el tipo de productos químicos con los que esté trabajando.
Hay muchas maneras diferentes de llegar a una solución. Este video demostrará la forma más común de hacer una solución a base de agua o acuosa.
Primero determine los moles de soluto que necesitará para lograr la concentración deseada en un volumen dado de solución. A continuación, convierta este valor en gramos utilizando el peso molecular, o el número de gramos por mol, del producto químico.
Los productos químicos se pueden pesar utilizando una balanza digital y un bote de pesaje.
A continuación, se puede utilizar un cilindro graduado para medir un volumen de agua purificada que es aproximadamente tres cuartas partes del volumen final de la solución.
Es imperativo que las soluciones acuosas se preparen con agua purificada en lugar de agua del grifo. De lo contrario, se puede comprometer la calidad no solo de la solución, sino también de varios experimentos en el futuro.
En este punto, el agua purificada debe transferirse a un vaso de precipitados que contenga una barra de agitación en una placa de agitación magnética.
A continuación, los solutos medidos se pueden añadir al agua purificada de agitación. Remover la mezcla ayuda a que el soluto se disuelva. La aplicación de calor también se puede utilizar para este propósito.
Una vez que todos los solutos se han disuelto en el solvente, el pH de la solución se puede ajustar con un medidor de pH. Para aumentar el pH, agregue hidróxido de sodio diluido a la solución de agitación. Para bajar el pH, agregue ácido clorhídrico diluido. Asegúrese de agregar lentamente el ácido o la base, ya que el pH puede cambiar rápidamente.
El papel de pH también se puede usar para medir el pH de una solución, sin embargo, el uso de un medidor de pH calibrado da como resultado una medición más precisa.
A continuación, la solución se vierte en un matraz aforado mediante un embudo para que pueda alcanzar su volumen final. La suma de la cantidad suficiente para alcanzar este volumen se conoce como Q.S.? de la solución.
Asegúrese de que el menisco esté alineado con la marca en el matraz aforado. En una solución acuosa, el menisco es cóncavo y debe leerse en el punto más bajo de la curva.
Al realizar investigaciones biológicas, específicamente aquellas que involucran células vivas, es posible que las soluciones deban esterilizarse antes de su uso. Esto se puede hacer mediante autoclave, que somete la solución a vapor a alta temperatura a alta presión.
Alternativamente, la solución se puede esterilizar pasando por un filtro de 0,22 micras, que excluirá cualquier célula bacteriana.
Ahora que tiene una comprensión fundamental de cómo hacer soluciones, es hora de echar un vistazo a algunas soluciones comúnmente utilizadas en el laboratorio y sus aplicaciones.
En la investigación biológica, se diseñan numerosas soluciones para imitar los fluidos fisiológicos. Estas soluciones están tamponadas, lo que significa que resisten el cambio de pH en un rango específico; Por lo general, el pH se mantiene en alrededor de 7,4 para simular fluidos intracelulares y extracelulares.
La solución salina tamponada con fosfato, o PBS, es un tampón comúnmente utilizado en la investigación biológica que imita el pH y la osmolaridad fisiológicos. La osmolaridad se refiere a los moles totales de soluto en una solución. Por ejemplo, una solución que contiene 1 mol de NaCl tiene 2 osmoles de soluto, porque los iones de sodio y cloruro se disocian en la solución. El PBS tiene concentraciones de iones que coinciden estrechamente con las de las células, lo que lo convierte en una solución isotónica, lo que significa que la cantidad de soluto fuera de la célula es equivalente a la que se encuentra dentro de la célula. El PBS se compone de varias sales diferentes en el agua, incluidas las sales con grupos fosfato que mantienen un pH constante en el rango de 7,2 a 7,6.
Los usos comunes de PBS en el laboratorio incluyen el lavado de células y la dilución de biomoléculas como las proteínas.
El líquido cefalorraquídeo artificial, o ACSF, imita las concentraciones de electrolitos del líquido cefalorraquídeo. Esta solución debe estar recién preparada, y el pH, la osmolaridad y la composición iónica deben controlarse cuidadosamente para que coincidan con las condiciones in vivo.
El ACSF se utiliza generalmente en estudios electrofisiológicos para preparar cortes de cerebro y perfundirlos durante los experimentos. También puede servir como solución extracelular durante la medición de la pinza del parche.
La solución de Ringer es una solución salina isotónica con un pH equilibrado utilizada en investigación biológica. Se usa comúnmente en experimentos in vitro con órganos y tejidos.
Acabas de ver la introducción de JoVE a la creación de soluciones. En este video repasamos ¿cómo hacer una solución de principio a fin? incluyendo cómo determinar la cantidad requerida de soluto (A), cómo QS correctamente una solución (B) y métodos de esterilización (C). También revisamos algunas soluciones comunes, así como sus aplicaciones en la investigación biológica (D).
Gracias por mirar, y recuerde siempre usar la técnica adecuada al hacer soluciones.
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