Name: Usando estrés social crónico de Modelo depresión posparto en vacas roedores (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 30 s
Description: Aprende a inducir estrés social crónico en roedores lactantes mediante la introducción de un intruso masculino para modelar depresión posparto. Este método permite evaluar conductas maternales, agresión y desarrollo de la cría.

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Nos gustaría dar las gracias a Chantal Lau para el asesoramiento sobre la evaluación de la ingesta de leche, Klaus Miczek para el asesoramiento sobre el uso de la tensión social, y Sheryl Goodman retroalimentación sobre la relevancia clínica de estrés social crónico. El desarrollo de este protocolo fue apoyado por el NICHD K99/R00 HDO59943 a BCN.

Adultos hembras Sprague Dawley son criados en nuestras instalaciones animal, camadas son extraídos de 8-10 crías con una proporción de sexos y la atención materna y las pruebas de la agresión que se hace en la jaula ratas. Los sujetos experimentales se mantienen en la misma habitación a través del estudio. Uno separadores pulgadas de alta jaula hecha de plexiglás claro se colocan en la jaula en el día 20 o 21 de la gestación. Estos se dividen de la jaula en 4 cuadrantes para prevenir las crías de gatear a su madre cuando se coloca en la jaula. Conducta materna típica se confirma para todas las presas en el día de nacimiento (día 1 de la lactancia) a través de la observación directa de la recuperación de las crías, el aseo, la enfermería y la auto preparación. Machos intrusos son más pequeños o de tamaño similar Sprague Dawley, machos y hembras no se presentan con el mismo hombre dos veces. Atención materna y la agresión materna es el vídeo grabado en la mañana del día 2, 9 y 16 de la lactancia como se describe a continuación: <ol><li> Retire la basura de la presa, pesar los machos y las hembras síparately, y el lugar toda la basura en una jaula holding limpia durante 60 minutos. </li><li> Al final de la separación de 60 min, pesar los machos y crías hembras por separado antes de la sustitución de la basura en la jaula de la presa, que divide a los cachorros lo más equitativamente posible entre los 3 cuadrantes sin nido de la jaula. Iniciar la grabación de vídeo antes de la reintroducción de garantizar la recuperación de todas las crías se registra. </li><li> Expediente del vídeo de la atención materna durante 30 minutos. Permitir presas para interactuar con sus camadas durante otros 90 min. 120 min (30 min de grabación adicional + 90 min) después de la colocación de los cachorros en la jaula de la presa, pesar de nuevo para determinar la ingesta de leche durante el período de dos horas. Un cachorro es la eutanasia de cada camada en días de exámenes de comportamiento después de la época de lactancia min 120 para extraer una muestra de leche en el estómago. La finalidad de la recogida de la leche de las crías es evaluar los niveles de hormonas y otros factores que pueden mediar en los efectos en el comportamiento y / o la fisiología del estrés social crónico en la descendencia. </li&gt; <li> Cachorros Volver a la presa después de pesar, e introducir un nuevo intruso macho más pequeña o de tamaño similar a la jaula durante 30 minutos para probar la agresión materna. Iniciar la grabación de vídeo durante la introducción a garantizar el registro de todas las agresiones. Para los sujetos de control, el macho se retira después de la grabación 30 min. Para los sujetos estrés social crónico, los machos se quedan en durante otros 30 min. En los días de ensayo no de comportamiento durante el período de 2-16 días, nuevos machos intrusos se colocan en las jaulas de los sujetos CSS durante una hora sin grabación de vídeo. Las exposiciones de estrés sociales se detienen si se produce una lesión, y los animales lesionados se tratan y retirados del estudio. </li><li> Una botella con 0,02% de sacarina se añade a la jaula de alojamiento presa en 15:00 en los días 2, 9, y 16 alterna entre el lado derecho e izquierdo. Tanto el agua del grifo y botellas sacarina se pesan a 15:00, y de nuevo a las 8 am de la mañana siguiente para determinar la preferencia de la sacarina. </li><li> Los cachorros son destetados en el día 23, y las presas avolver sacrificados en este punto para obtener muestras de plasma basales y extraer el cerebro para el análisis de la expresión génica de fisiológicamente y conductualmente núcleos objetivo relevante. </li></ol> Scoring Comportamiento Maternal Las conductas de agresión de atención materna se describen en las tablas 1 y 2 se puntúan de los videos utilizando software de análisis de comportamiento Odlog. Las claves se asignan a cada comportamiento, y la clave se mantiene pulsada mientras cada conducta se realiza para registrar la duración de ese comportamiento. Las frecuencias son la suma de las pulsaciones de teclas para cada comportamiento. Este programa crea tanto un archivo de datos completa de una marca de tiempo cinco segundos contenedores y una tabla resumen con el total de frecuencias y duraciones de las conductas definidas sobre la grabación de 30 min. Tanto la agresión materna y los cuidados maternos son calificadas por los videos agresión materna, ya que las presas no responden a la madre a los cachorros, mientras que el intruso masculino está en la jaula. </p&gt; Poco después de la colocación de los cachorros en la jaula, la presa recuperará cada cachorro individualmente al nido. Recuperación completa se obtuvo una vez que todos los cachorros están en el nido. Mientras que la recuperación completa por lo general sólo se anotó una vez, a veces puede ser anotado dos veces si la presa se traslada toda la basura a un nuevo sitio después de una recuperación completa inicial. Comportamiento de anidación se puntúa cada vez que el material de nidificación es manipulado por la presa con la boca o patas. Aseo Pup incluye lamer o la manipulación de la piel del cachorro por la presa con sus garras. Puntuación Enfermería se inicia después de la presa ha estado en una posición en cuclillas inmóvil o ancianos propensos durante 10 segundos. Esto es para dar tiempo a que las crías comienzan a mamar. Atención materna total es la duración combinada de anidación, preparación crías, y la lactancia, pero puede ser restringido a la manipulación y la enfermería se centran en el comportamiento de las crías-dirigido. Asesor de imagen se define como la manipulación de la propia piel de la presa con la boca o patas. La actividad se obtuvo duranteción cualquier actividad locomotora no asociada con los comportamientos previamente definidos. Agresión materna consiste en atacar, morder, patear, y la fijación. De banda se define como el boxeo o la lucha contra el macho intruso. Morder es anotado cuando la presa usa sus dientes en el intruso, y la fijación se registra cuando la presa tiene el hombre abajo con sus piernas o el cuerpo. Agresión total es la suma de atacar, morder, patear, y la fijación. Estadística El comportamiento maternal, la ingesta de leche y sacarina preferencias del control y presas CSS se compararon en cada día de la lactancia con una cola t-test para evaluar los efectos de la CSS en días individuales. Se compararon los datos de crecimiento en los días 2, 9 y 16 de la lactancia, con pruebas t de una cola en el peso (en gramos) el día 2 o el porcentaje de crecimiento con respecto al día 2 (días 9 y 16 de peso / día x 2 peso 100). Los niveles de expresión de ARNm OXT se normalizaron contra tres housek combinadogenes eeping, b-actina, hipoxantina fosforribosiltransferasa (HPRT) y gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH). Niveles de mRNA expresión OXT relativos se compararon con pruebas t individuales de cada péptido o receptor para cada región del cerebro. Todos los resultados gráficos se presentan como grupo de medios + SEM, y el nivel de significación estadística fue de p ≤ 0,05.

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Los autores no tienen intereses financieros en competencia.

Los datos obtenidos del paradigma CSS es más probable que sea consistente y repetible en un entorno de investigación del comportamiento estable. Se argumenta que la vivienda y la cría de animales de laboratorio es un componente que tiene que ser considerado en cualquier tipo de estudio con más cuidado, especialmente los estudios de comportamiento. Vivienda y cría de las prácticas que puedan introducir factores de confusión incluyen: a partir de las presas embarazadas enviados desde el proveedor, pasando presas entre las habitaciones al día durante las pruebas de comportamiento, la variación en el tiempo del día de las pruebas de comportamiento, la exposición excesiva de presas a nuevas vistas, sonidos y olores , no usar jaulas para las pruebas de comportamiento, la falta de material de nidificación o inconsistente, y la mala rutina de cuidado de los animales (por ejemplo, la exposición a la ropa de cama sucia y mojada). Además, la inclusión de otras pruebas de comportamiento durante la lactancia (por ejemplo, prueba de nado forzado o laberinto en cruz elevado) puede introducir factores de confusión. Sin embargo, el uso de un entorno de jaula novela u otrafactor de estrés agudo puede ser útil para revelar las diferencias de comportamiento no aparentes con las pruebas de jaula de alojamiento debido a las interacciones potenciales entre el estrés crónico, estrés agudo, y el comportamiento. El protocolo descrito actualmente es eficaz con ratas Sprague Dawley, pero puede que sea necesario modificar el protocolo para otras cepas y especies. Por ejemplo, los cachorros deben ser protegidos con una barrera de altamente agresivos machos Long Evans para evitar lesiones. Prácticas críticos para la administración estrés social incluyen el uso de machos más pequeños o de tamaño similar y que tiene la primera interacción de un intruso macho con una presa de 2 días altamente agresivo para asegurar la derrota y el comportamiento sumiso consistentemente en los machos. Si los hombres no atacan una camada, deberían ser retirados del estudio, ya que es probable que apostarán en camadas posteriores. Una opción para reducir la probabilidad de que los varones excesivamente agresivas es tener los derrotaron por un macho más grande antes del inicio de la stJudy. Para la calificación del comportamiento, es necesario proporcionar una visión completa del comportamiento de la grabación y el análisis de la frecuencia y la duración de la mayoría de los comportamientos, y el uso de intervalos de registro cortos o controles sobre el terreno pueden dar lugar a la obtención de datos suficientes para probar a fondo la hipótesis. Formación exhaustiva y consistente de goleadores se puede lograr con el uso anteriormente anotado vídeos de comportamiento. La principal aplicación del modelo de CSS es la prueba de los tratamientos actuales y novedosos medicamentos para la depresión posparto y la ansiedad. Un uso adicional de este modelo para investigar los efectos de las prácticas y procedimientos en la atención materna, como la sección de partos por cesárea, mano de obra inducida, y varios programas de lactancia comunes. Más investigación de los posibles efectos del estrés sobre la lactancia será de gran valor debido a la falta de estudios sobre este tema. Mientras que las muestras de leche de las presas serían útiles, la necesidad de anestesia y OXT exógenoen la recogida de las muestras presenta varios factores de confusión fisiológicas y de comportamiento, así que los estudios sobre los efectos del estrés sobre la lactancia pueden no ser propicio para el análisis del comportamiento simultáneo. El potencial para los estudios transgeneracionales con el modelo de CSS es grande, y estas investigaciones también puede incluir diversos tratamientos de estrés de los hijos adultos para investigar las posibles interacciones entre el estrés primeros años de vida y más tarde la exposición al estrés. La importancia del modelo de CSS y centros de pruebas de comportamiento asociados en relevancia etológico y de la traducción. Se postula que la falta de eficacia de los tratamientos actuales para la depresión y la ansiedad es debido a la falta de solapamiento entre etológicos estudios animales y humanos. Los modelos animales de depresión y ansiedad a menudo se basan en factores de estrés físico robusto o cepas altamente seleccionados que pueden explicar el hallazgo de que los tratamientos antidepresivos actuales son más eficaces contra la depresión severa. Ph<html> factores de estrés ysical tales como la restricción y la exposición a una amplia variedad de factores de estrés aleatorios no simulan experiencias humanas comunes. La razón de la exposición al azar utilizado en paradigmas de estrés leves crónicas es para evitar la aclimatación. Esta es una preocupación significativa, pero la situación ideal puede ser el uso de un protocolo que los animales no se adapte a la que se asemeja más a la etiología de la depresión y la ansiedad en los seres humanos, tales como el estrés social. Además de promover el uso de factores de estrés más etológicos, otra de las ventajas del modelo de CSS es el uso de una medida relevante de la anhedonia, el comportamiento maternal. Este es un comportamiento mediada recompensa robusta que media directamente los efectos adversos de la depresión en las madres sobre la descendencia. La incorporación combinada de factores de estrés y medidas de anhedonia en la depresión y la ansiedad investigaciones etológicas será especialmente beneficiosa en la identificación de medidas preventivas y tratamientos seguros y eficaces. &quot;&gt; El estrés social se ha utilizado con éxito en los machos y hembras nulíparas durante varios años, y la ampliación de este trabajo en las hembras materna es probable que produzca una gran cantidad de nuevos datos para la depresión post-parto, así como estrés en la infancia trastornos asociados, tanto en hombres y hembras. Se postula que el aumento del uso de modelos animales etológicos en la depresión y la ansiedad investigación dará lugar a tratamientos más eficaces debido a la recogida de los datos de comportamiento que es etológico y en traslación relevante, menos variable, y más repetible.

La etiología de los trastornos del estado de ánimo, como la depresión posparto, a menudo implica la exposición al 1,2 estrés crónico. Aunque la depresión en las madres tiene efectos negativos en ambos padres 3 y el desarrollo psicológico de la descendencia 4, la gran mayoría de los estudios sobre la depresión y la ansiedad se centran en los animales y los seres humanos masculinos. Aunque hay algunos modelos animales de conducta materna alterada con el estrés crónico, la mayoría tienen componentes fisiológicos sustanciales que no pueden relacionarse con factores de estrés psicosocial crónico comúnmente experimentados por los seres humanos o se centran sobre todo en el período preparto. La moderación de estrés crónico durante el embarazo en ratas aumenta la atención materna y disminuye la ansiedad y la agresión materna en algunos estudios 5, pero disminuye la atención materna en otros 6. La moderación de estrés es un factor de estrés físico potente 7, y algunos informes son incompatibles con la atención materna atenuada observado en mot humanaella con la depresión posparto 4. Estrés ultramild Prenatal no afecta a la atención cachorro, pero sí reduce la agresión maternal 8. Paradigmas de estrés ultramild utilizan una variedad de factores de estrés aleatorios (por ejemplo, 30 grados de inclinación de la jaula, ciclo de luz invertido, el confinamiento, la iluminación durante la noche, y la jaula sucia) durante varios días, y el efecto de los componentes individuales es a menudo poco clara. Es probable que algunos factores de estrés utilizados en los paradigmas de estrés ultramild, tales como ciclo de luz invertida y la iluminación durante la noche afectar directamente a la atención materna independiente de los efectos del estrés, como la atención materna en ratas tiene un ritmo circadiano. La exposición a la ropa de cama húmeda es un estrés térmico significativo para los cachorros, y puede resultar en la mortalidad de las crías en menos de 24 horas en las camadas jóvenes (observaciones personales). Estudios recientes de roedores se han centrado en el uso de factores de estrés etológico pertinentes, tales como el estrés crónico social (CSS), en el estudio de los efectos del estrés sobre offspring conducta y los trastornos del humor 9-13. En un esfuerzo para desarrollar un modelo etológico para la depresión posparto, reducir el componente fisiológico del factor estresante utilizado, y generar resultados fisiológicos y de comportamiento coherentes, nuestro laboratorio se ha centrado en el uso de estrés social. Mientras derrota social, crónica se utiliza eficazmente como un modelo para la depresión inducida por el estrés social en roedores machos 14, esto no es un modelo de comportamiento ecológicamente relevante para muchos roedores maternas si se utilizan machos intrusos, como una sola derrota social de un roedor materna por lo general resultados el canibalismo de la basura por el intruso masculino. Sin embargo, la exposición aguda a una nueva intrusión masculina, sin conocer la derrota social de la presa, el estrés provoca respuestas conductuales y endocrinos robustos en hembras lactantes 15-18. También hay pruebas de que el estrés crónico durante la lactancia, incluyendo la exposición a un intruso macho, perjudica directamente la producción de leche 19,20, lo que puede afectar el crecimiento de las crías.Estos resultados en ratas maternas son apoyados por estudios en hembras vírgenes, donde la inestabilidad social crónica (que varía aislamiento y hacinamiento) aumenta la actividad del eje hipotalámico-pituitario-adrenal 11,21, regulación de la temperatura corporal se altera, reduce la sacarosa y la ingesta de alimentos, y se ha propuesto como un modelo animal para la depresión hembra 11. Asesor de imagen, una medida de la ansiedad 22,23 también es sensible a las manipulaciones de estrés sociales 24,25. Estrés social crónico (CSS) durante la lactancia puede alterar el comportamiento maternal y atenuar el crecimiento de la madre y sus crías. La presentación diaria de una novela intruso masculino durante la lactancia disminuye la atención materna, aumenta la agresión maternal hacia una nueva intrusión masculina y la auto preparación, e inhibe el crecimiento tanto de la presa y su descendencia 10. Estos efectos indican que la CSS es un modelo etológico pertinentes y eficaces para los trastornos del estado de ánimo que involucrandeficiencias en la atención materna, anhedonia, ansiedad elevada y el crecimiento de crías atenuada, como la depresión posparto. Tanto la atención materna y datos de descendencia indicar que CSS puede tener efectos duraderos sobre las futuras generaciones, y la investigación sobre los efectos del estrés crónico sobre el comportamiento maternal apoyar la hipótesis de que los efectos del estrés crónico en la conducta materna son hormonalmente mediada (Murgatroyd y sobrino 2012 ). Además, datos recientes de la descendencia femenina adulta de presas estresados ​​apoya la hipótesis de que la CSS como una forma de estrés en la infancia provoca cambios en el centro de la oxitocina (OXT) y prolactina (PRL) que están asociados con el comportamiento de enfermería ineficaz 12. El modelo CSS complementa otros modelos eficaces de las perturbaciones inducidas por estrés en el comportamiento de la madre, como la limitación material de nidificación 26,27 y 28,29 separación materna. Aspectos únicos del modelo CSS son que es etológico relevante tanto en roedores como en humanos,tiene un componente fisiológico relativamente menor, y puede ser combinada con factores de estrés similares en otras etapas de la vida (derrota, inestabilidad social crónica social). Los objetivos principales en el desarrollo del paradigma CSS debían utilizar un factor de estrés etológico y clínicamente relevante, provocar anhedonia (medida por la atención materna y preferencia sacarina), aumentar las medidas conductuales de la ansiedad, y afectar el desarrollo fisiológico, conductual y endocrino o cachorro. El propósito del modelo es para probar tratamientos y prácticas para la depresión posparto y la ansiedad actuales y novedoso.

<table><tbody><tr><td>Software de análisis de vídeo ODlog </td><td></td><td>Macropod Versión 2.7.2</td><td>Disponible para PC o Mac </td></tr><tr><td>Grabadora de vídeo </td><td>Sony</td><td>HDR-CX130</td><td></td></tr></tbody></table>

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Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

La exposición al estrés crónico es un predictor fiable de los trastornos depresivos, y el estrés social es un factor de estrés etológicamente relevante común en animales y seres humanos. Sin embargo, muchos modelos animales de depresión se han desarrollado en los machos y no son aplicables o eficaz en los estudios de las hembras después del parto. Estudios recientes han reportado efectos significativos de estrés social crónico durante la lactancia, un estresante etológico pertinente y eficaz, en la conducta materna, crecimiento y comportamiento neuroendocrinología. Este manuscrito se describe este paradigma de estrés social crónico mediante la exposición repetida de una presa en período de lactancia a una nueva intrusión masculina, y la evaluación de los efectos conductuales, fisiológicas y neuroendocrinas de este modelo. Estrés social crónico (CSS) es un valioso modelo para el estudio de los efectos del estrés en el comportamiento y la fisiología de la presa, así como sus descendientes y generaciones futuras. La exposición de las crías a CSS también se puede utilizar como una de las primerasestrés de la vida que tiene efectos a largo plazo sobre el comportamiento, la fisiología y la neuroendocrinología.

La exposición de una presa lactantes a CSS deprime la duración de aseo y cuidado de las crías materna total durante una grabación de vídeo 30 min en el día 9 de la lactancia (Nephew y Puentes 2011, Figura 2). El día 16 de la lactancia, la agresión y la auto preparación, una medida de la ansiedad, se incrementan (sobrino y Puentes 2011, Figura 3). El consumo de leche por las crías de CSS presas es 40% menos que las presas de control en los días 9 y 16 de lactación (Figura 4), ​​y el crecimiento de las crías se atenúa en estos dos días (el sobrino y Puentes 2011, Figura 5). Sacarina preferencia es menor en el día 16 en CSS madres tratadas (Figura 6). En el adulto descendencia femenina F1 de CSS madres tratadas, la ingesta de leche (Figura 7) y la preferencia de la sacarina (Figura 8) están deprimidos en los días 2 y 16. Expresión génica oxitocina en el núcleo supraópticos es menor en estas presas (Figura 9 </strong&gt;), y resultados similares fueron reportados en el núcleo paraventricular, centro de la amígdala, y la amígdala medial (Murgatroyd y Sobrino, 2012). <table border="1"><tbody><tr><td> COMPORTAMIENTO </td><td> DESCRIPCIÓN </td></tr><tr><td> Recuperación </td><td> Realización de las crías al nido </td></tr><tr><td> Recuperación completa </td><td> El tiempo requerido para recuperar los 8 cachorros </td></tr><tr><td> Nesting </td><td> La manipulación de las camas en el área de nido con la boca o patas </td></tr><tr><td> Grooming Pup </td><td> Licking o la manipulación de la piel del perrito con las patas </td></tr><tr><td> Enfermería </td><td> Cuando la presa está en cuclillas o la postura de ancianos propensos </td></tr><tr><td> Atención Materno total </td><td> Total duración de anidación, Grooming Pup y Enfermería </td></tr><tr><td> Auto Grooming </td><td> La manipulación de las presas propia piel con la boca o patas </td></tr><tr><td> Actividad </td><td> Cualquier actividad locomotora no asociada a comportamientos anteriores </td></tr></tbody></table> Tabla 1. Cuidado Maternal. <table border="1"><tbody><tr><td> COMPORTAMIENTO </td><td> DESCRIPCIÓN </td></tr><tr><td> Atacar </td><td> Boxeo o lucha del hombre intruso </td></tr><tr><td> Mordaz </td><td> El uso de los dientes para atacar macho intruso </td></tr><tr><td> Kicking </td><td> El uso de pies de huelga intruso masculina, similar a un conejo patadas </td></tr><tr><td> Fijación </td><td> Maternal hembra holding hombre abajo con extremidades o el cuerpo </td></tr><tr><td> AAgresión tal </td><td> Suma de las duraciones de atacar, morder, patear, y fijar </td></tr></tbody></table> Tabla 2. Agresión maternal. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1. Calendario del protocolo de estrés crónico social. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig2.jpg" alt="La figura 2" /> Figura 2. Estrés social crónico disminuye la atención materna en el día 9 de lactancia. Exponer una presa lactantes a una nueva intrusión masculina durante una hora al día durante 7 días disminuyó el tiempo empleado en el aseo y el cuidado de las crías materna total, que incluye el aseo cachorro, de enfermería, y los comportamientos de anidación más de un 30 minutos de grabación de vídeo conducta maternal (sobrino y Bridges, 2011). * Indica una diferencia significativa entre el control y el estrés grupos, p &lt;0,05, de n = 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig3.jpg" alt="Figura 3" /> Figura 3. Estrés social crónico aumenta la agresividad y la ansiedad materna en el día 16 de la lactancia. Exponer una presa lactantes a una nueva intrusión masculina durante una hora por día durante 14 días aumentó la duración (A) y la frecuencia (B) de la agresión y la auto preparación y la disminución del aparato locomotor actividad durante un mínimo de grabación de vídeo agresión materna 30 (sobrino y Bridges, 2011). * Indica una diferencia significativa entre los grupos de control y el estrés, p &lt;0,05, n = de 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig4.jpg" alt="Figura 4" /> La Figura 4. Estrés social crónico disminuye el consumo de leche por la descendencia. Ingesta de leche total por camadas de 8-10 crías durante un intervalo de dos horas de enfermería se redujoen las madres estresadas en los días 9 y 16 de la lactancia. * Indica una diferencia significativa entre los grupos de control y el estrés, p &lt;0,05, n = de 12-14. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig5.jpg" alt="La figura 5" /> Figura 5. Estrés social crónico atenúa el crecimiento de las crías durante los días 9 y 16 de la lactancia. Exponer las presas con el estrés social crónico durante 15 días en los resultados de la lactancia en el crecimiento de las crías atenuada (sobrino y Puentes 2011). * Indica una diferencia significativa entre los grupos de control y el estrés, p &lt;0,05, n = de 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig6.jpg" alt="La figura 6" /> La Figura 6. Estrés social crónico induce la disminución de la ingesta de sacarina en la lactancia día 16. Quince días de estrés social disminuye el porcentaje de la ingesta de sacarina relativa al agua durante un período de 17 horas. * Indica una dife significativarencia entre los grupos de control y el estrés, p &lt;0,05, n = de 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig7.jpg" alt="La figura 7" /> Figura 7. Principios de estrés social crónico vida disminuye el consumo de leche por los hijos de las presas de F1. Consumo total de leche por los hijos de las presas F1 (camadas de 8-10 crías) en un intervalo de dos horas de enfermería se ha reducido en los días 2 y 16 de la lactancia. * Indica una diferencia significativa entre los grupos de control y el estrés, p &lt;0,05, n = de 12-14. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig8.jpg" alt="Figura 8" /> Figura 8. Principios de estrés social vida crónica induce disminución de la ingesta de sacarina en días de lactancia 2 y 16. Quince días de estrés social disminuye el porcentaje de la ingesta de sacarina relativa al agua durante un período de 17 horas. * Indica una diferencia significativa entre el control y el estrésgrupos, p &lt;0,05, n = de 12-14. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig9.jpg" alt="Figura 9" /> La Figura 9. Crónica primeros años de vida el estrés social disminuye la expresión de mRNA de oxitocina en el núcleo supraópticos. Adulto crías hembras de ratas expuestas a estrés social crónico tienen actividad atenuada centro de la oxitocina, que se asocia con una disminución de la eficiencia de enfermería (Murgatroyd y Sobrino, 2012). Los niveles de expresión de ARNm OXT se normalizaron contra tres genes de limpieza combinados, b-actina, hipoxantina fosforribosiltransferasa (HPRT) y gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH). * Indica una diferencia significativa entre los grupos de tensión de control y, p &lt;0,05, de n = 16-18.

En este artículo se describe el uso de residente intruso estrés social crónico como paradigma etológico relevante para la depresión posparto modelo y la ansiedad en roedores lactantes.

Usando estrés social crónico de Modelo depresión posparto en vacas roedores

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

El objetivo general del siguiente experimento consiste en crear un modelo de roedor ecológicamente relevante para estudiar los trastornos del estado de ánimo posparto. Primero, las crías pasan por un período de separación materna. Luego, las crías se devuelven a la jaula de origen y se registra el comportamiento de cuidado materno para inducir estrés social.Se introduce un nuevo intruso macho. La agresión materna se registra durante 30 minutos o más para la inducción de estrés social crónico. Nuestros resultados indican que el estrés social crónico es un paradigma eficaz y confiable para disminuir el cuidado maternal.Otra ventaja de esta técnica frente a los modelos existentes de depresión inducida por estrés, como el restricción repetida, la derrota social o los paradigmas de estrés leve crónico, que utilizan una variedad aleatorizada de factores estresantes, es que el estrés social no introduce importantes confusiones logísticas ni fisiológicas. El uso de paradigmas de estrés social crónico podría conducir al descubrimiento de medidas preventivas y tratamientos mejorados para trastornos del estado de ánimo en madres y en su descendencia. Las hembras adultas Dolly se crían en el propio laboratorio y las pruebas se realizan en la jaula de alojamiento, ubicada en la misma habitación durante todo el estudio.Al día 20 o 21 de gestación, se colocan separadores de plexiglás transparente de una pulgada de altura en la jaula principal. Estos dividen la jaula en cuatro cuadrantes para impedir que las crías regresen a la hembra durante las pruebas. Se confirma el comportamiento maternal típico en todas las hembras el día del parto.Mediante la observación directa de la recuperación de crías, aseo, amamantamiento y aseo personal. Los machos intrusos utilizados en este estudio son más pequeños o de tamaño similar. Sprague Dolly, machos y hembras nunca se presentan con el mismo macho en dos ocasiones.Utilizar machos de tamaño similar al de las hembras ayuda a prevenir el infanticidio. Una cámara de video se monta cerca de la jaula para que los comportamientos puedan registrarse durante la prueba. Para comenzar, retire la camada de la hembra, pese por separado las crías macho y hembra, y luego colóquelas en una jaula limpia de contención durante 60 minutos.Al finalizar esta separación de 60 minutos, pese nuevamente a las crías. Antes de reintroducir a las crías en su jaula de origen, comience la grabación de video para asegurarse de que se registre todo el comportamiento de recuperación de las crías. Distribuya las crías lo más uniformemente posible entre los tres cuadrantes no experimentales de la jaula.Después de este reintegro, registre el comportamiento de cuidado maternal durante 30 minutos. Los comportamientos de cuidado maternal incluyen típicamente la recuperación de las crías hacia el nido, comportamientos relacionados con el nido, aseo de las crías o aseo propio, o lactancia. Cuando la hembra haya interactuado con la camada durante un total de 120 minutos, pese las crías una vez más para determinar la ingesta de leche.Durante el período de dos horas, se sacrifica un cachorro de cada camada en los días de pruebas conductuales posteriores a este período de lactancia. Para extraer una muestra de leche del estómago, colocamos a los cachorros frente a la hembra. Después de pesarlos y haber iniciado la grabación de video, introduzca un macho intruso novedoso de tamaño menor o similar a la jaula durante 30 minutos para evaluar la agresión materna.Los comportamientos de agresión materna incluyen típicamente atacar, morder, patear o inmovilizar al macho intruso por parte de la hembra materna. Para los sujetos de control, el macho se retira tras la grabación de video de agresión materna de 30 minutos en los días dos, nueve y 16 de la lactancia; para los sujetos con estrés social crónico, los machos permanecen con las madres durante 60 minutos cada día. Durante el período de 15 días comprendido entre los días dos y 16 de la lactancia, en los días dos, nueve y 16, se graban los primeros 30 minutos de forma similar a los sujetos de control. En los días dos, nueve y 16 del ensayo, se añade una botella con sacarina al 0,02 % a la jaula domicilio de la madre a las 3:00 PM, alternando entre el lado derecho e izquierdo.Posteriormente, se pesan las botellas para determinar la preferencia por sacarina. Las crías son destetadas al día 23 y las madres son sacrificadas para obtener muestras destinadas a análisis posteriores. Las hembras adultas descendientes de madres sometidas a estrés social crónico producen posteriormente sus propias crías.Para estudios posteriores, se utiliza un software de análisis del comportamiento en troncos impares para calificar el comportamiento materno registrado durante el estudio. Tanto la agresión materna como el cuidado materno se puntúan en todos los videos de agresión materna. Este programa genera un archivo de datos completo con intervalos de cinco segundos con marca de tiempo, así como una tabla resumen con las frecuencias totales y duraciones de los comportamientos seleccionados durante la grabación de 30 minutos.El estrés social crónico provocado por la exposición de una hembra lactante a un intruso macho durante una hora al día durante 15 días provocó una disminución en la duración del aseo de las crías y en el cuidado materno total. Entre el día nueve de lactancia y el día 16 de lactancia, la hembra mostró un aumento en el aseo propio, un indicador de ansiedad y comportamientos agresivos. En correspondencia, la ingesta de leche por parte de las crías disminuyó en comparación con los controles en los días nueve y 16 de lactancia, y el crecimiento de las crías se vio significativamente reducido en ambos días.El estrés social también redujo la preferencia por la sacarina, un indicador de anhedonia, y se evaluó la ingesta de leche por las crías de hembras adultas. La descendencia de las madres expuestas al estrés social mostró una disminución en la preferencia por la sacarina en los días dos y 16 de lactancia; asimismo, la preferencia por la sacarina en las hembras F1 expuestas a estrés social crónico en la primera etapa de la vida fue menor. En los días dos y 16 de lactancia, la expresión de ARNm de oxitocina se redujo en el núcleo supraóptico de las hembras F1 estresadas en la primera etapa de la vida, y se observaron efectos similares en el núcleo paraventricular.Al establecer un protocolo de estrés social crónico, es importante minimizar la exposición a factores estresantes adicionales, como el transporte de hembras con sus camadas, disturbios humanos excesivos, jaulas sucias y otros estímulos acústicos o ambientales aversivos. Una instalación de alojamiento estable y un manejo animal consistente producirán datos más reproducibles. Tras seguir este procedimiento, se puede obtener una amplia variedad de tejidos en múltiples puntos temporales para investigar los efectos del estrés social crónico sobre otros sistemas orgánicos.Además, se pueden aplicar factores de estrés sociales en múltiples etapas de la historia vital para investigar tanto la susceptibilidad como la resiliencia ante trastornos inducidos por el estrés.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

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