Name: Mit Chronische Sozial Stress zu Modell postpartalen Depression in Lactating Nagetiere (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 30 s
Description: Erfahren Sie, wie chronischer sozialer Stress bei laktierenden Nagetieren als Modell für postpartale Depression eingesetzt wird. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung mütterlicher Verhaltensänderungen und ihrer Auswirkungen auf die Nachkommen.

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Wir möchten Chantal Lau für die Beratung über die Bewertung danken Milchaufnahme, Klaus Miczek für die Beratung über den Einsatz von Social Stress und Sheryl Goodman für Rückfragen über die klinische Relevanz der chronischen sozialen Stress. Die Entwicklung dieses Protokoll wurde von NICHD K99/R00 HDO59943 nach BCN unterstützt.

Erwachsene Sprague Dawley Frauen in unserem Tierhaus gezüchtet werden, sind Würfe zu 8-10 Welpen mit einem noch Geschlechterverhältnis gekeult und mütterlicher Fürsorge und Aggression Tests in der Ratten Heimkäfig getan. Die Versuchspersonen bleiben im gleichen Raum durch das Studium. Ein Zoll hohen Käfig Separatoren klare Plexiglas in den Käfig am Tag 20 oder 21 der Trächtigkeit platziert. Diese teilen den Käfig in 4 Quadranten zu Welpen aus kriecht zurück zur Mutter, wenn sie in den Käfig gelegt zu verhindern. Typische mütterliches Verhalten wird für alle Dämme am Tag der Geburt (Tag 1 der Laktation) durch direkte Beobachtung der Welpe Retrieval, Pflege, Krankenpflege und Pflege selbst bestätigt. Intruder Männchen sind kleiner oder ähnlich großen Sprague Dawley Männern und Frauen sind nie mit der gleichen männlichen präsentiert zweimal. Betreuung der Mutter und mütterliche Aggression Video am Morgen der Tage 2, 9 aufgezeichnet, und 16 der Stillzeit, wie nachstehend beschrieben: <ol><li> Entfernen Sie den Wurf von der Staumauer, wiegen Männchen und Weibchen separately und Ort gesamten Wurf in einem sauberen Haltekäfig für 60 min. </li><li> Am Ende der 60 min Trennung, wiegen Männchen und weiblichen Jungtieren getrennt vor dem Austausch Wurf im Käfig des Dammes, teilt die Welpen so gleichmäßig wie möglich zwischen den 3 nicht-Nest Quadranten des Käfigs. Videoaufnahme starten vor der Wiedereinführung zu versichern, dass alle Welpen Abruf aufgezeichnet wird. </li><li> Videoaufzeichnung mütterlichen Fürsorge für 30 min. Erlauben Dämme mit ihren Würfen noch 90 min zu interagieren. 120 min (30 min Aufnahme + weitere 90 min) nach dem Platzieren Welpen in der Mutterseite Käfig, wiegen sie wieder zu Milch-Aufnahme über den Zeitraum von zwei Stunden zu bestimmen. Ein Welpe aus jedem Wurf auf Verhaltenstests Tagen nach 120 min Stillzeit eine Milchprobe aus dem Magen extrahieren eingeschläfert. Der Zweck der Erhebung die Milch von den Welpen ist es, die Konzentrationen von Hormonen und anderen Faktoren, die die Verhaltens-und / oder Physiologie Auswirkungen von chronischem sozialem Stress auf die Nachkommen vermitteln können, beurteilt. </li&gt; <li> Zurück zu Welpen Damm nach dem Wiegen und die Einführung einer kleineren oder ähnlich großen Roman männlichen Eindringling in den Käfig für 30 min für mütterliche Aggression zu testen. Videoaufnahme starten bei der Einführung, um sicherzustellen, dass alle Aggression aufgezeichnet wird. Für Probanden, die Männchen nach der Aufnahme 30 min entfernt. Für chronische Sozial Stress Themen sind die Männchen in für weitere 30 min verlassen. Auf Nicht-Verhaltenstests Tagen tagsüber 2-16 Zeitraum werden neue Eindringling Männchen in den Käfigen der CSS Themen für eine Stunde ohne Videoaufzeichnung platziert. Die sozialen Stress Engagements werden gestoppt, wenn Verletzungen auftreten, und verletzte Tiere behandelt und aus der Studie. </li><li> Eine Flasche mit 0,02% Saccharin ist der Damm Heimkäfig am 03.00 an den Tagen 2, 9 und 16 abwechselnd zwischen der rechten und linken Seite hinzugefügt. Sowohl klarem Wasser und Saccharin Flaschen werden bei 3.00 gewogen, dann wieder um 8 Uhr am nächsten Morgen zu Saccharin Vorlieben bestimmen. </li><li> Pups entwöhnt sind am Tag 23, und Dämme einan dieser Stelle wieder eingeschläfert zu basalen Plasma-Proben zu erhalten und extrahieren das Gehirn für die Genexpressionsanalyse von physiologisch und verhaltensrelevanter Targetkerne. </li></ol> Mütterliches Verhalten Scoring Die mütterliche Fürsorge Aggression Verhaltensweisen in den Tabellen 1 und 2 beschrieben werden aus den Videos mit ODLog Verhaltensanalyse Software erzielt. Die Schlüssel werden an jedes Verhalten zugeordnet und die Taste gedrückt ist, während jedes Verhalten durchgeführt wird, um die Dauer dieses Verhalten aufzuzeichnen gehalten. Frequenzen sind die Summe der Tastenanschläge für jedes Verhalten. Dieses Programm erzeugt sowohl eine vollständige Daten-Datei mit einem Zeitstempel versehen 5 Sekunden Behälter und eine Übersichtstabelle mit den insgesamt Frequenzen und Dauern für die definierten Verhaltensweisen über die 30 min Aufnahme. Sowohl mütterlichen Aggression und mütterliche Fürsorge für die mütterliche Aggression Videos erzielt, als die Dämme mütterlich reagieren auf die Welpen während das Männchen Eindringling in den Käfig. </p&gt; Bald nachdem sie die Welpen in den Käfig, wird der Damm jeden Welpen einzeln abrufen zurück ins Nest. Volle Retrieval wird einmal, wenn alle Welpen im Nest sind gezählt. Während vollständige Abruf wird in der Regel nur einmal hat, kann es manchmal zweimal erzielt werden, wenn der Damm verlegt die gesamte Wurf an einen neuen Standort nach einer ersten vollständigen Abruf. Nistverhalten wird erzielt, wenn das Nistmaterial durch den Damm mit ihrem Mund oder Klauen manipuliert wird. Pup Pflege umfasst lecken oder Manipulation des Welpen das Fell durch den Damm mit ihren Pfoten. Nursing Scoring wird eingeleitet, nachdem der Damm wurde in einer stationären oder kauernden Haltung Pflege anfällig für 10 Sekunden gewesen. Dies ist die Zeit für Welpen zu starten Säugen zu ermöglichen. Insgesamt mütterlichen Fürsorge ist die kombinierte Dauer der Nist-, Welpe Pflege und Krankenpflege, sondern kann auch auf Pflege und Pflege auf Welpen-directed Verhalten konzentrieren eingeschränkt werden. Selbst Pflege wird als Manipulation der Mutterseite eigenen Pelz mit ihrem Mund oder Klauen definiert. Aktivität erzielt wird durING keine Bewegungsaktivität nicht mit den zuvor definierten Verhaltensweisen verbunden. Mütterliche Aggression besteht aus angreifen, beißen, treten, und Pinning. Offensives als Boxen oder Bekämpfung des Eindringlings männlich definiert. Beißen ist erzielt, wenn der Damm ihre Zähne verwendet auf den Eindringling und Pinning wird aufgezeichnet, wenn der Damm hält das Männchen sich mit ihr Gliedmaßen oder Körper. Insgesamt Aggression ist die Summe der angreifenden, Beißen, Treten und feststecken. Statistik Mütterliche Verhaltensweisen, Milchaufnahme und Saccharin Vorlieben der Steuer-und CSS Dämme wurden an jedem Tag der Laktation mit einseitigen t-Tests, um die Auswirkungen der CSS an einzelnen Tagen beurteilen verglichen. Growth Daten an den Tagen 2, 9 und 16 der Laktation wurden mit einseitigen t-Tests auf das Gewicht (in Gramm) am Tag 2 oder das prozentuale Wachstum in Bezug auf Tag 2 (Tag 9 oder 16 KG / Tag 2 x Gewicht im Vergleich 100). Expression Ebenen für OXT mRNA wurden gegen drei kombinierten housek normalisierteeping Gene, b-Actin, Hypoxanthinphosphoribosyltransferase (HPRT) und Glycerinaldehyd-3-Phosphat-Dehydrogenase (GAPDH). Relative OXT mRNA Expression wurden mit einzelnen t-Tests für jedes Peptid oder Rezeptor für jede Hirnregion verglichen. Alle grafischen Ergebnisse präsentiert als Gruppe + SEM bedeutet, und das Niveau der statistischen Signifikanz wurde p ≤ 0,05.

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Die Autoren haben keine finanziellen Interessen konkurrieren.

Die Daten aus dem CSS Paradigma erhalten am wahrscheinlichsten in einem konsistenten, wiederholbaren in einer stabilen Verhaltensforschung Umgebung. Es wird argumentiert, dass das Gehäuse und Haltung von Labortieren eine Komponente, die zu mehr als sorgfältig in jeder Art von Studie, insbesondere Verhaltensstudien braucht. Wohnungs-und Haltungsbedingungen, die verwechselt vorstellen kann: beginnend mit schwangeren Muttertiere von den Lieferanten versendet, bewegen Dämme zwischen den Zimmern täglich Verhaltenstests, Variation in der Tageszeit von Verhaltenstests, übermäßige Exposition von Dämmen, neue Sehenswürdigkeiten, Geräusche, Gerüche oder , nicht mit nach Hause Käfig für Verhaltenstests, fehlende oder inkonsistente Nistmaterial und schlechte Routine Tierpflege (zB Exposition gegenüber nass und verschmutzt Betten). Darüber hinaus kann die Aufnahme von anderen Verhaltenstests während der Laktation (zB gezwungen schwimmen Test oder erhöhten Plus-Labyrinth) einzuführen verwechselt. Jedoch ist die Verwendung eines neuartigen Käfig Umwelt oder sonstigerakuten Stressor kann nützlich sein, um Unterschiede im Verhalten nicht ersichtlich, mit nach Hause Käfigversuch wegen möglicher Wechselwirkungen zwischen chronischem Stress, akute Stress und Verhalten zu offenbaren. Die aktuell beschriebenen Protokoll ist wirksam mit Sprague Dawley Ratten, aber Änderungen des Protokolls kann für andere Stämme und Arten erforderlich. Zum Beispiel muss Welpen mit einer Barriere von sehr aggressiven Long Evans Männchen um Verletzungen zu vermeiden geschützt werden. Critical Praktiken für die soziale Stress Verwaltung umfassen die Verwendung von kleineren oder ähnlich großen Männern und mit der ersten Interaktion eines männlichen Eindringling mit einem sehr aggressiven Tag 2 Damm Niederlage und konsequent unterwürfige Verhalten der Männchen zu gewährleisten. Wenn Männer einen Wurf nicht angreifen, sollten sie aus der Studie entfernt werden, da es wahrscheinlich, dass sie nachfolgende Würfe anzugreifen. Eine Möglichkeit zur Verringerung der Wahrscheinlichkeit von übermäßig aggressive Männchen ist, haben sie besiegt von einer größeren männlichen vor Beginn des study. Für die Verhaltens-Scoring ist die Aufzeichnung und Analyse von Frequenz und Dauer der meisten Verhaltensweisen notwendig, um ein vollständiges Bild von dem Verhalten zu schaffen, und die Verwendung von kürzeren Aufzeichnungsintervalle oder Ort-Kontrollen können in der Sammlung der unzureichenden Daten führen gründlich zu testen die Hypothesen. Gründliche und konsequente Ausbildung der Torschützen kann mit dem Einsatz zuvor erzielte Verhaltensänderungen Videos erreicht werden. Die Hauptanwendung des CSS-Modell ist die Prüfung von aktuellen und neuartige medikamentöse Behandlungen für postpartale Depressionen und Angstzuständen. Eine weitere Verwendung dieses Modells ist es, die Auswirkungen von gemeinsamen Praktiken und Verfahren auf mütterliche Fürsorge, wie Kaiserschnitt Geburten, induzierte Arbeit und verschiedene Zeitpläne Stillzeit zu untersuchen. Weitere Untersuchung möglicher Auswirkungen von Stress auf der Stillzeit wird wertvoll angesichts des Fehlens von Studien zu diesem Thema. Während Milchproben von den Dämmen nützlich wäre, die Notwendigkeit für die Anästhesie und exogene OXTin der Sammlung dieser Proben stellt einige Verhaltens-und physiologischen verwechselt, so Studien zu den Auswirkungen von Stress auf die Stillzeit kann nicht förderlich für gleichzeitige Verhaltensanalyse. Das Potenzial für generationsübergreifende Studien mit dem CSS Modell ist groß, und diese Untersuchungen kann auch verschiedene Stress-Behandlungen der erwachsenen Nachkommen, um mögliche Wechselwirkungen zwischen frühen Leben Stress und später Stressbelastung zu untersuchen. Die Bedeutung der CSS-Modell und die damit verbundenen Verhaltens-Testzentren auf ethologischen und translationale Bedeutung. Es wird postuliert, dass die mangelnde Wirksamkeit der derzeitigen Behandlungen für Depression und Angst wegen eines Mangels an ethologischen Überlappung zwischen Tier-und Humanstudien ist. Tiermodelle der Depression und Angst oft auf robusten physischen Stressoren oder hoch ausgewählten Stämme, die die Feststellung, dass die aktuellen Antidepressiva am effektivsten mit schweren Depressionen sind erklären vertrauen darf. Ph<html> ysical Stressoren wie Zurückhaltung und der Exposition gegenüber einer Vielzahl von randomisierten Stressoren nicht simulieren gemeinsamen menschlichen Erfahrungen. Die Gründe für die randomisierte Exposition auf chronischen Stress mild Paradigmen verwendet wird, um zu verhindern Akklimatisierung. Dies ist ein wesentliches Anliegen, aber die ideale Situation sein kann, um ein Protokoll, dass Tiere nicht mehr ähnelt die Ätiologie der Depression und Angst in den Menschen, wie soziale Stress nicht akklimatisieren zu verwenden. Neben der Förderung der Verwendung von mehr ethologischen Stressoren, ist ein weiterer Vorteil der CSS-Modell die Verwendung einer entsprechenden Maßnahme der Freudlosigkeit, mütterliches Verhalten. Dies ist eine robuste Belohnung vermittelte Verhaltensweisen, die direkt vermittelt die negativen Auswirkungen der Depression bei Müttern auf die Nachkommen. Der kombinierte Einbau von ethologischen Stressoren und Maßnahmen anhedonia in Depressionen und Angstzuständen Forschung ist besonders nützlich bei der Identifizierung von sicheren und wirksamen präventiven Maßnahmen und Behandlungen. &quot;&gt; Sozialer Stress wurde erfolgreich in Männchen und Weibchen nulliparous für mehrere Jahre verwendet wird, und die Erweiterung dieser Arbeit in mütterlichen Frauen dürfte eine Fülle von neuen Daten für postpartale Depression sowie frühe Leben Stress verbunden Erkrankungen bei Männern produzieren und Frauen. Es wird postuliert, dass der vermehrte Einsatz von ethologischen Tiermodellen in Depressionen und Angstzuständen Forschung wird zu einer effektiveren Behandlungen wegen der Sammlung von Verhaltensdaten das ist artgerechte und translatorisch relevant, weniger variabel und mehr wiederholbare führen.

Die Ätiologie von affektiven Störungen, einschließlich postpartale Depression, oft mit der Exposition gegenüber chronischem Stress 1,2. Obwohl Depression bei Müttern negative Auswirkungen sowohl auf Elternschaft 3 und psychische Entwicklung der Nachkommen 4 hat, die überwiegende Mehrheit der Studien zu Depressionen und Angstzuständen Fokus auf männliche Tiere und Menschen. Zwar gibt es ein paar Tiermodellen verändertes mütterliches Verhalten mit chronischem Stress sind, haben die meisten wesentlichen physiologischen Komponenten, die nicht zu chronischen psychosozialen Stressoren häufig von Menschen erlebt betreffen oder fokussieren meist auf dem Zeitraum vor der Entbindung. Chronische Zurückhaltung Stress während der Schwangerschaft bei Ratten erhöht mütterlichen Sorge und Angst und verringert mütterliche Aggression in einigen Studien 5, verringert aber mütterlicher Fürsorge in anderen 6. Restraint Stress ist ein potenter physischen Stressoren 7 und einige Berichte sind inkonsistent mit dem abgeschwächten mütterlichen Fürsorge in der menschlichen mot beobachtetihr mit postpartalen Depression 4. Pränatale ultramild Stress wirkt sich nicht auf Welpen kümmern, aber das mütterliche Aggression 8. Ultramild Stress Paradigmen verwenden eine Vielzahl von randomisierten Stressoren (z. B. 30-Grad-Neigung Käfig, umgekehrt Licht-Zyklus, Wochenbett, über Nacht Beleuchtung und verschmutzte Käfig) über mehrere Tage, und die Wirkung der einzelnen Komponenten ist oft unklar. Es ist wahrscheinlich, dass einige Stressoren in ultramild Stress Paradigmen verwendet, wie z. B. umgekehrte Licht-Zyklus und Übernachtung Beleuchtung direkt auf mütterliche Fürsorge unabhängig von irgendwelchen Stress-Wirkung, als mütterliche Fürsorge bei Ratten hat einem zirkadianen Rhythmus. Die Exposition gegenüber nassen Bettwäsche ist ein bedeutender thermische Belastung der Jungtiere, und kann in Sterblichkeit der Jungtiere in weniger als 24 Stunden in jungen Würfe (persönliche Beobachtungen) führen. Jüngste Studien an Nagetieren haben über die Verwendung von ethologisch relevanten Stressoren, wie chronische sozialem Stress (CSS) konzentriert, die in der Studie über die Auswirkungen von Stress auf offspring Verhalten und affektive Störungen 9-13. In dem Bemühen um eine ethologischen Modell für postpartale Depression zu entwickeln, die die physiologische Komponente der Stressfaktor verwendet, und generieren konsequente Verhaltens-und physiologischen Ergebnissen hat unser Labor über die Verwendung von sozialem Stress fokussiert. Während chronische soziale Niederlage effektiv als ein Modell für soziale Stress-induzierten Depressionen bei männlichen Nagetieren 14 verwendet wird, ist dies nicht eine ökologisch relevanten Verhaltens-Modell für viele Mütter, wenn Nagetiere männlichen Eindringlingen verwendet werden, als eine einzige soziale Niederlage einer mütterlichen Nagetier Regel Ergebnisse Kannibalismus in der Sänfte durch den männlichen Eindringling. Allerdings löst akute Exposition auf ein neues Männchen Eindringling, ohne soziale Niederlage der Damm, robust Verhaltens-und endokrine Stressantwort bei stillenden Frauen 15-18. Es gibt auch Hinweise, dass chronischer Stress während der Stillzeit, einschließlich der Exposition gegenüber einem männlichen Eindringling, direkt beeinträchtigt Milchproduktion 19,20, das Wachstum der Jungtiere auswirken können.Diese Ergebnisse im mütterlichen Ratten werden durch Untersuchungen in jungfräulichen Weibchen, wo chronische soziale Instabilität (unterschiedliche Isolation und Verdrängung) erhöht Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren-Achse Aktivität 11,21, verändert Regulierung der Körpertemperatur unterstützt reduziert Saccharose und Nahrungsaufnahme, und vorgeschlagen worden als Tiermodell für weibliche Vertiefung 11. Selbst pflegen, ein Maß der Angst 22,23 ist auch empfindlich auf sozialen Stress Manipulationen 24,25. Chronische sozialem Stress (CSS) während der Stillzeit kann stören mütterliche Verhalten und dämpfen das Wachstum des Dammes und Nachkommen. Die tägliche Präsentation eines neuartigen männlichen Eindringling während der Stillzeit sinkt mütterliche Fürsorge erhöht mütterliche Aggression gegenüber einem neuartigen männlichen Eindringling und selbst pflegen, und hemmt das Wachstum sowohl in den Damm und ihre Nachkommen 10. Diese Effekte zeigen, dass CSS eine artgerechte relevant und effektives Modell für affektive Störungen, die beinhalten istBeeinträchtigungen in der mütterlichen Fürsorge, Freudlosigkeit, erhöhte Angst und abgeschwächten Wachstum des Nachwuchses, wie postpartale Depression. Sowohl die mütterliche Fürsorge und Nachkommen Daten zeigen, dass CSS können dauerhafte Auswirkungen auf die künftigen Generationen haben, und Forschung über die Auswirkungen von chronischem Stress auf mütterliches Verhalten unterstützen die Hypothese, dass die Auswirkungen von chronischem Stress auf mütterliches Verhalten hormonell vermittelt werden (Murgatroyd and Nephew 2012 ). Darüber hinaus unterstützt die jüngsten Daten aus der erwachsenen weiblichen Nachwuchs von gestressten Muttertieren die Hypothese, dass CSS als eine Form der frühen Leben Stress Veränderungen im zentralen Oxytocin (OXT) und Prolaktin (PRL), die mit ineffizienten Pflege Verhalten 12 verbunden sind, verursacht. Die CSS-Modell ergänzt andere wirksame Modelle von Stress induzierte Störungen im mütterlichen Verhalten, wie zum Beispiel Begrenzung Nistmaterial 26,27 und 28,29 mütterlichen Trennung. Einzelne Aspekte der CSS-Modells sind, dass sie ethologisch ist in Nagern und Menschen relevant,hat eine relativ geringe physiologische Komponente, und kann mit ähnlichen Stressoren in anderen Lebensphasen (soziale Niederlage, chronische soziale Instabilität) kombiniert werden. Die primären Ziele bei der Entwicklung der CSS Paradigma waren, um eine artgerechte und klinisch relevante Stressoren verwenden, induzieren anhedonia (wie von mütterlicher Fürsorge und Saccharin Vorlieben gemessen), Anstieg Verhaltensmaßnahmen von Angst und beeinträchtigen Welpe physiologischen, Verhaltens-und endokrine oder Entwicklung. Der Zweck des Modells ist es, aktuelle und neuartige Behandlungsmethoden und Verfahren für die postpartale Depression und Angst zu testen.

<table><tbody><tr><td>ODlog Videoanalyse </td><td>Macropod Software</td><td>Version 2.7.2</td><td>Verfügbar für PC oder Mac </td></tr><tr><td>Videorecorder </td><td>Sony</td><td>HDR-CX130</td><td></td></tr></tbody></table>

mit chronische sozial stress zu modell postpartalen depression in lactating nagetiere

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Die Exposition gegenüber chronischem Stress ist ein zuverlässiger Prädiktor für depressive Störungen und sozialer Stress ist eine häufige ethologisch relevant Stressfaktor in Tieren und Menschen. Allerdings wurden viele Tiermodellen der Depression bei Männern entwickelt und sind nicht anwendbar oder wirksam in Studien der postpartalen Frauen. Jüngste Studien haben signifikante Auswirkungen von chronischem sozialem Stress während der Stillzeit, eine artgerechte relevant und effektiv Stressfaktor berichtet, auf dem mütterlichen Verhalten, Wachstum und Verhaltensstörungen neuroendocrinology. Dieses Manuskript beschreibt dieser chronischen sozialen Stress Paradigma mit wiederholter Exposition einer stillenden Damm ein neues männlichen Eindringling, und die Beurteilung der Verhaltens-, physiologische und neuroendokrine Effekte von diesem Modell. Chronische sozialem Stress (CSS) ist ein wertvolles Modell für die Untersuchung der Auswirkungen von Stress auf das Verhalten und die Physiologie des Dammes sowie ihre Nachkommen und zukünftige Generationen. Die Exposition der Jungtiere zu CSS kann auch als ein frühes verwendet werdenLeben Stress, die langfristige Auswirkungen auf Verhalten, Physiologie und neuroendocrinology hat.

Aussetzen einer stillenden Damm CSS drückt die Dauer der Welpe Pflege und insgesamt mütterliche Fürsorge während eines 30 min Videoaufzeichnung am 9. Tag der Laktation (Nephew und Bridges 2011 Abbildung 2). Am Tag 16 der Laktation, Aggression und selbst pflegen, ein Maß von Angst, erhöht werden (Nephew und Bridges 2011 Abbildung 3). Milk Aufnahme durch den Jungtieren der CSS Dämme ist 40% weniger als die Kontrolle Dämme an den Tagen 9 und 16 der Laktation (Abbildung 4), und Welpe Wachstum gedämpft wird auf diese beiden Tage (Nephew und Bridges 2011 Abbildung 5). Saccharin Präferenz niedriger ist am Tag 16 in CSS behandelten Muttertieren (Abbildung 6). In der erwachsenen weiblichen Nachkommen der F1 CSS behandelten Muttertieren, Milchaufnahme (Abbildung 7) und Saccharin Vorlieben (Abbildung 8) werden an den Tagen 2 und 16 gedrückt. Oxytocin Genexpression im Zellkern supraopticus niedriger ist in dieser Dämme (Abbildung 9 </strong&gt;), und ähnliche Ergebnisse wurden in der PVN, zentralen Amygdala und medialen Amygdala (Murgatroyd and Nephew, 2012) berichtet. <table border="1"><tbody><tr><td> VERHALTEN </td><td> Beschreibung </td></tr><tr><td> Retrieval </td><td> Tragen der Jungtiere zurück ins Nest </td></tr><tr><td> Volle Retrieval </td><td> Zeit benötigt, um alle 8 Welpen abrufen </td></tr><tr><td> Nesting </td><td> Manipulation von Einstreu im Nest mit Mund oder Klauen </td></tr><tr><td> Pup Grooming </td><td> Lecken oder Manipulation des Welpen das Fell mit Pfoten </td></tr><tr><td> Krankenpflege </td><td> Als Mutter ist in einer kauernden oder anfällig Pflege Haltung </td></tr><tr><td> Insgesamt Mütterliche Sorgfalt </td><td> Insgesamt duration von Schachteln, Pup Grooming und Krankenpflege </td></tr><tr><td> Selbst Grooming </td><td> Manipulation von Dämmen eigenen Fell mit Mund oder Klauen </td></tr><tr><td> Aktivität </td><td> Jede Bewegungsaktivität nicht mit den oben genannten Verhaltensweisen verbunden </td></tr></tbody></table> Tabelle 1. Mütterliche Sorgfalt. <table border="1"><tbody><tr><td> VERHALTEN </td><td> Beschreibung </td></tr><tr><td> Offensives </td><td> Boxen oder Bewältigung der Eindringling männlich </td></tr><tr><td> Beißen </td><td> Verwendung Zähne Eindringling angreifen männlich </td></tr><tr><td> Treten </td><td> Verwenden der Füße zu schlagen Eindringling männlich, ähnlich wie bei einem Kaninchen treten </td></tr><tr><td> Pinning </td><td> Mütterliche Frauen mit männlichen unten mit Gliedmaßen oder Körper </td></tr><tr><td> Umtal Aggression </td><td> Summe der Dauer der Offensiv, Beißen, Treten, und Fixieren </td></tr></tbody></table> Tabelle 2. Mütterliche Aggression. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig1.jpg" alt="Abbildung 1" /> Abbildung 1. Planen der chronischen sozialen Stress Protokoll. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig2.jpg" alt="Abbildung 2" /> Abbildung 2. Chronische sozialem Stress abnimmt mütterlichen Fürsorge am 9. Tag der Laktation. Offenlegen eine stillende Damm ein neues männlichen Eindringling für eine Stunde pro Tag für 7 Tage verringert den Zeitaufwand für Welpen Pflege und insgesamt mütterlichen Fürsorge, die Welpen Pflege, Krankenpflege und Verschachtelung Verhaltensweisen beinhaltet über eine 30 min mütterliches Verhalten Videoaufzeichnung (Nephew und Bridges, 2011). * Zeigt einen signifikanten Unterschied zwischen Kontroll-und Stress-gruppen, p &lt;0.05, n = 9-10 ist. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig3.jpg" alt="Abbildung 3" /> Abbildung 3. Chronische soziale Stress erhöht mütterliche Aggression und Angst am Tag 16 der Laktation. Offenlegen eine stillende Damm ein neues männlichen Eindringling für eine Stunde pro Tag für 14 Tage erhöht die Dauer (A) und Frequenz (B) von Aggression und selbst pflegen und verringerte Bewegungsapparates Aktivität über einen 30 min mütterliche Aggression Videoaufzeichnung (Nephew und Bridges, 2011). * Zeigt einen signifikanten Unterschied zwischen Kontroll-und Stress-Gruppen, p &lt;0,05, n = 9-10 ist. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig4.jpg" alt="Fig. 4" /> Abbildung 4. Chronische sozialem Stress abnimmt Milch Aufnahme durch die Nachkommen. Insgesamt Milchaufnahme durch Würfe von 8-10 Welpen über zwei Stunden-Pflege-Intervall wurde reduziertin belasteten Dämme an den Tagen 9 und 16 der Stillzeit. * Zeigt einen signifikanten Unterschied zwischen Kontroll-und Stress-Gruppen, p &lt;0,05, n = 12-14 ist. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig5.jpg" alt="Abbildung 5" /> Abbildung 5. Chronische sozialem Stress schwächt Wachstum der Jungtiere an den Tagen 9 und 16 der Stillzeit. Offenlegen Dämme zu chronischen sozialen Stress für 15 Tage während der Stillzeit Ergebnisse in abgeschwächten Wachstum der Jungtiere (Nephew und Bridges 2011). * Zeigt einen signifikanten Unterschied zwischen Kontroll-und Stress-Gruppen, p &lt;0,05, n = 9-10 ist. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig6.jpg" alt="Abbildung 6" /> Abbildung 6. Chronische sozialem Stress induziert verringert Saccharin Ansaugrohr am Tag 16 der Laktation. Fünfzehn Tage von sozialem Stress verringert die prozentuale Aufnahme von Saccharin in Bezug auf Wasser über einen 17 Stunden-Zeitraum. * Zeigt eine signifikante Unterschiederenz zwischen Kontrolle und Stress Gruppen, p &lt;0,05, n = 9-10 ist. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig7.jpg" alt="Abbildung 7" /> Abbildung 7. Chronische frühen Leben sozialem Stress abnimmt Milch Aufnahme durch die Nachkommen der F1 Dämme. Insgesamt Milch Aufnahme durch die Nachkommen der F1 Dämme (Würfe von 8-10 Jungtiere) über zwei Stunden-Pflege Intervall wurde an den Tagen 2 und 16 der Stillzeit reduziert. * Zeigt einen signifikanten Unterschied zwischen Kontroll-und Stress-Gruppen, p &lt;0,05, n = 12-14 ist. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig8.jpg" alt="Fig. 8" /> Abbildung 8. Chronische frühen Leben sozialem Stress induziert verringerte Zufuhr über Saccharin Laktationstagen 2 und 16. Fünfzehn Tage von sozialem Stress verringert die prozentuale Aufnahme von Saccharin in Bezug auf Wasser über einen 17 Stunden-Zeitraum. * Zeigt einen signifikanten Unterschied zwischen Kontroll-und StressGruppen, p &lt;0.05, n = 12-14 ist. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig9.jpg" alt="Abbildung 9" /> Abbildung 9. Chronische frühen Leben sozialem Stress abnimmt Oxytocin-mRNA-Expression in der supraopticus Kern. Erwachsene weibliche Nachkommen von Muttertieren ausgesetzt chronischen sozialen Stress gedämpft zentralen Oxytocin-Aktivität, die mit einer verminderten Leistungsfähigkeit Krankenpflege (Murgatroyd and Nephew, 2012) verbunden ist. Die Expressionsniveaus für OXT mRNA wurden mit drei kombinierten Housekeeping-Genen normalisiert, b-Actin, Hypoxanthinphosphoribosyltransferase (HPRT) und Glycerinaldehyd-3-Phosphat-Dehydrogenase (GAPDH). * Zeigt ein signifikanter Unterschied zwischen Kontrolle und Stress steht, p &lt;0,05, n ist = 16-18.

Dieser Artikel beschreibt die Verwendung von chronischen resident Eindringling sozialem Stress als ethologisch relevant Paradigma Modell postpartale Depression und Angst bei stillenden Nagetiere.

Mit Chronische Sozial Stress zu Modell postpartalen Depression in Lactating Nagetiere

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Das übergeordnete Ziel des folgenden Experiments besteht darin, ein ökologisch relevanteres Nagetiermodell zur Untersuchung postpartaler Stimmungsstörungen zu entwickeln. Zunächst werden die Welpen einer Phase der mütterlichen Trennung unterzogen. Anschließend werden die Welpen in den Heimkäfig zurückgebracht, und das mütterliche Pflegeverhalten wird aufgezeichnet, um sozialen Stress auszulösen.Ein neuartiger männlicher Eindringling wird vorgestellt. Die mütterliche Aggression wird über einen Zeitraum von 30 Minuten oder länger aufgezeichnet, um chronischen sozialen Stress auszulösen. Unsere Ergebnisse zeigen, dass chronischer sozialer Stress ein wirksames und zuverlässiges Paradigma zur Absenkung der mütterlichen Fürsorge darstellt.Ein weiterer Vorteil dieser Technik im Vergleich zu bestehenden, durch Stress induzierten Depressionsmodellen wie wiederholter Immobilisierung, sozialem Misserfolg oder chronischen milden Stress-Paradigmen, die eine randomisierte Vielzahl von Stressoren verwenden, besteht darin, dass sozialer Stress keine erheblichen logistischen oder physiologischen Störfaktoren einführt. Die Anwendung chronischer sozialer Stress-Paradigmen könnte zur Identifizierung verbesserter präventiver Maßnahmen und Therapien für Stimmungsstörungen bei Müttern und ihren Nachkommen führen. Adulte, gezüchtete weibliche Dolly-Mäuse werden intern gezüchtet, und die Tests erfolgen im Heimkäfig, der während der gesamten Studie im selben Raum verbleibt.Am Tag 20 oder 21 der Schwangerschaft werden im Heimkäfig durchsichtige Trennwände aus Plexiglas mit einer Höhe von einem Zoll angebracht. Diese unterteilen den Käfig in vier Viertel, um zu verhindern, dass die Welpen während der Tests zur Mutter zurückkriechen. Am Tag der Geburt wird das typische mütterliche Verhalten bei allen Müttern bestätigt.Über die direkte Beobachtung der Welpenrückholung, der Pflege, der Säugepflege und der Selbstpflege. Die in dieser Studie verwendeten eindringenden Männchen sind kleiner oder von ähnlicher Größe. Sprague-Dawley-Männchen und -Weibchen werden niemals ein- und denselben Männchen erneut präsentiert.Die Verwendung von Männchen, die in der Größe den Weibchen ähnlich sind, hilft, Kannibalismus zu verhindern. Eine Videokamera wird in der Nähe des Käfigs angebracht, um das Verhalten während der Tests aufzuzeichnen. Zunächst wird der Wurf von dem Weibchen entfernt, das männliche und weibliche Jungtier einzeln gewogen und anschließend für 60 Minuten in einen sauberen Aufbewahrungs­käfig gelegt.Am Ende dieser 60-minütigen Trennung wiegen Sie die Welpen erneut. Bevor Sie die Welpen in ihren Heimkäfig zurückbringen, starten Sie die Videoaufzeichnung, um sicherzustellen, dass das gesamte Welpenrückholverhalten erfasst wird. Verteilen Sie die Welpen so gleichmäßig wie möglich auf die drei Nicht-Test-Viertel des Käfigs.Nach dieser Wiedereinführung dokumentieren Sie das mütterliche Verhalten 30 Minuten lang. Zum mütterlichen Verhalten zählen typischerweise das Zurücktragen der Welpen ins Nest, Nestbauverhalten, Pflege des Nachwuchses oder der eigenen Körperpflege sowie das Säugen. Sobald die Mutter mit dem Wurf insgesamt 120 Minuten interagiert hat, wiegen Sie die Welpen erneut, um die Milchaufnahme zu bestimmen.Über einen Zeitraum von zwei Stunden wird an den Tagen mit Verhaltensprüfungen nach dieser Säugeperiode ein Jungtier aus jedem Wurf euthanasiert. Um eine Milchprobe aus dem Magen zu gewinnen, bringen wir die Jungtiere zur Muttertierin. Nach dem Wiegen und nachdem die Videoaufzeichnung gestartet wurde, wird ein neuer, kleinerer oder ähnlich großer männlicher Eindringling für 30 Minuten in den Käfig eingeführt, um die mütterliche Aggression zu testen.Verhaltensweisen mütterlicher Aggression beinhalten typischerweise Angriffe, Beißen, Treten oder Niederdrücken des eingedrungenen Männchens durch das Muttertier. Bei Kontrolltieren wird das Männchen nach der 30-minütigen Videoaufnahme mütterlicher Aggression am zweiten, neunten und 16. Tag der Laktation entfernt; bei Tieren mit chronischem sozialem Stress verbleiben die Männchen täglich 60 Minuten bei den Muttertieren. Im Zeitraum von 15 Tagen zwischen dem zweiten und 16. Tag der Laktation werden am zweiten, neunten und 16. Tag die ersten 30 Minuten aufgezeichnet, ähnlich wie bei den Kontrolltieren. Am zweiten, neunten und 16. Tag der Testung wird eine Flasche mit 0,02 % Saccharin um 15:00 Uhr abwechselnd auf der rechten und linken Seite in den Heimkäfig der Muttertiers gebracht.Die Flaschen werden später gewogen, um die Saccharin-Präferenz zu bestimmen. Die Welpen werden am Tag 23 entwöhnt, und die Mütter werden euthanasiert, um Proben für weitere Analysen zu gewinnen. Die erwachsenen weiblichen Nachkommen von Dämmen mit chronischem sozialem Stress bringen später selbst eigene Welpen zur Welt.Zur weiteren Auswertung wird die Verhaltensanalyse-Software „odd log“ verwendet, um das während der Studie aufgezeichnete mütterliche Verhalten zu bewerten. Sowohl mütterliche Aggression als auch mütterliche Fürsorge werden für alle Videos zur mütterlichen Aggression bewertet. Dieses Programm erstellt sowohl eine vollständige Datendatei mit zeitstempelbasierten Fünf-Sekunden-Intervallen als auch eine Zusammenfassungstabelle mit den Gesamthäufigkeiten und -dauern der ausgewählten Verhaltensweisen über die 30-minütige Aufzeichnung hinweg.Chronischer sozialer Stress, verursacht durch die tägliche Exposition einer laktierenden Versuchstiermutter gegenüber einem männlichen Eindringling für eine Stunde pro Tag über 15 Tage, führte zu einer Verringerung der Dauer der Pflegeverhalten gegenüber den Welpen sowie der gesamten mütterlichen Fürsorge. Von Tag neun der Laktation bis Tag 16 der Laktation zeigte die Mutter eine Zunahme des Selbstpflegeverhaltens, ein Maß für Angstzustände und aggressives Verhalten. Entsprechend verringerte sich die Milchaufnahme der Welpen im Vergleich zu Kontrolltieren an den Tagen neun und 16 der Laktation, und das Wachstum der Welpen war an beiden Tagen signifikant reduziert.Sozialer Stress verringerte zudem die Saccharinpräferenz und einen Indikator für Hedonie mittels Geschmackstest sowie die Milchaufnahme der Welpen erwachsener Weibchen. Die Nachkommen von Weibchen unter sozialem Stress wiesen am zweiten und 16. Laktationstag eine verminderte Saccharinpräferenz auf; diese war bei den F1-Weibchen, die in der Frühphase ihres Lebens chronischem sozialem Stress ausgesetzt waren, ebenfalls niedriger. An den Laktationstagen zwei und 16 war die Oxytocin-mRNA-Expression im supraoptischen Kern der F1-Weibchen mit früher Lebenszeit-Stress reduziert, und ähnliche Effekte wurden im paraventrikulären Kern beobachtet.Bei der Einrichtung eines Protokolls für chronischen sozialen Stress ist es wichtig, die Exposition gegenüber zusätzlichen Stressfaktoren wie dem Transport von Muttertieren mit ihrem Wurf, übermäßigen menschlichen Störungen, verschmutzten Käfigen und anderen aversiven akustischen oder olfaktorischen Reizen zu minimieren. Eine stabile Haltungsumgebung und konsistente Tierversorgung liefern die reproduzierbarsten Daten. Nach diesem Verfahren können zu verschiedenen Zeitpunkten eine Vielzahl von Geweben entnommen werden, um die Auswirkungen von chronischem sozialem Stress auf andere Organsysteme zu untersuchen.Außerdem können soziale Stressfaktoren in mehreren Phasen der Lebensgeschichte angewendet werden, um sowohl die Anfälligkeit als auch die Widerstandsfähigkeit gegenüber stressinduzierten Störungen zu untersuchen.

using-chronic-social-stress-to-model-postpartum-depression-lactating

Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

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Die Y-Maze Barriere-Aufgabe ist ein Verhaltenstest, der die Motivation untersucht, Anstrengungen zur Belohnung zu verschwenden. Hier diskutieren wir das Testen mehrerer gut validierter chronischer Stressoren, einschließlich chronischer Corticosteron- und sozialer Niederlagenstress, sowie den neuartigen chronischen nichtdiskriminierenden sozialen Niederlagenstress (CNSDS), der bei Frauen wirksam ist.

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Dieses Protokoll beschreibt, wie man 10-tägigen chronischen sozialen Niederlagenstress bei männlichen Mäusen im frühen Jugendalter durchführt, um bei mehr als 60% der Mäuse eine lang anhaltende soziale Vermeidung im Erwachsenenalter zu erzeugen.

Chronischer sozialer Niederlagenstress bei männlichen Mäusen im frühen Jugendalter

Durch die Integration von vier täglichen sozialen Stressoren beschreibt die vorliegende Studie ein mehrfach integriertes soziales Stressmodell (MISS) für psychiatrische Störungen bei weiblichen C57BL/6J-Mäusen. Nach zehn Tagen wiederholter MISS-Exposition entwickelten die Mäuse depressive und angstähnliche Phänotypen, was ein natürliches, ätilogisch basiertes Tiermodell für die Untersuchung psychiatrischer Störungen bei weiblichen Probanden darstellt.

Ein multiples integriertes soziales Stressmodell für psychiatrische Störungen bei weiblichen C57BL/6J-Mäusen

Erfahren Sie, wie chronischer sozialer Stress bei laktierenden Nagetieren als Modell für postpartale Depression eingesetzt wird. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung mütterlicher Verhaltensänderungen und ihrer Auswirkungen auf die Nachkommen.

Mit Chronische Sozial Stress zu Modell postpartalen Depression in Lactating Nagetiere

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