Name: Fabricación de aparatos e instrumentos para facilitar la rata Trasplante de Hígado (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-05-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: Aprende a fabricar el dispositivo quick-linker para trasplante hepático ortotópico en ratas utilizando materiales comunes de laboratorio. Esta técnica mejora la accesibilidad y eficiencia de los procedimientos quirúrgicos en modelos animales.

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El estudio fue apoyado por la Fundación Artères, la Fundación Astellas Europa y la Fundación Boninchi. CT fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencia de Suiza (subvención SCORE 3232230-126233).

1. Mango: Diseño y Definición <ol><li> Proteger una hoja de bisturí N º 10 de carbono en una tabla de madera con una cinta. </li><li> Marque el centro del ring en el microscopio. Debe estar ubicado 1,2 cm recta desde el bosque de la hoja de bisturí. </li><li> Taladre un agujero de 2 mm con una broca de diamante esférica, montado en un taladro de alta velocidad. </li><li> Ampliar el agujero con fusiforme o pedacitos de diamante cónica. El diámetro final varía de acuerdo con el peso de la rata como se muestra en la Tabla 1. </li><li> El diseño de la forma del mango con un marcador permanente. Figuras 1 y 2 se pueden utilizar como plantillas. </li><li> Convertir el taladro en una amoladora de banco pequeño y quitar la parte de la hoja fuera de la forma. </li><li> Para rematar la pieza con una baja velocidad de cepillo giratorio. </li></ol> 2. Approximator: Diseño y Definición <ol><li> El aproximador se obtiene mediante la modificación de Klemmer quirúrgica recta o pinza de Kochers. </li><li> Cortar la mitad de una rama en el microscopio utilizando el mini amoladora de banco de alta velocidad. </li><li> Hacer ranuras simétricas a ambos lados para permitir el asa para introducir por completo. </li><li> Haga un corte longitudinal en el brazo largo y compruebe que el centro del brazo largo y un mango bien posicionados se encuentran en un mismo eje. </li><li> Diseñar una muesca en el brazo largo mirando hacia el centro de la empuñadura. </li><li> Hacer la rama lo más fina posible y completan la pieza con la baja velocidad del cepillo giratorio. </li></ol> 3. Puños: Diseño y Definición <ol><li> Gemelos pinzas varían de acuerdo con el peso de la rata y la tensión. Por el contrario, su longitud debe mantenerse alrededor de 4 mm. </li><li> Tome un tubo de polietileno de calibre fino y redondo fuera de un borde con un bisturí N º 10. </li><li> Diseñar una arboleda 0,5 mm desde el borde y corte cuidadosamente una pendiente de bajar a la arboleda. </li><li> Cortar una o dos muescas de espesor total en la tubería. Estos seayudar a la manipulación de la banda durante la preparación del injerto y trasplante. </li><li> Cortar el brazalete a 4 mm a partir de su borde. </li></ol>

<ol><li>Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+Liver+Transplantation+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic Liver Transplantation in Rats.</a> J. Vis. Exp. (65), e4143(2012).</li>
<li>Hori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+and+innovative+techniques+for+liver+transplantation+in+rats%3A+A+surgical+guide%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology.%2C+WJG%22%5BJournal%5D)">Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide.</a> World Journal of Gastroenterology., WJG. 16, 3120(2010).</li>
<li>Kashfi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+various+techniques+of+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation Proceedings. 37 (1), 185-188 (2005).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47(1979).</li>
<li>Oldani, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+for+rat+liver+transplantation+using+Quick+Linker+system%3A+a+preliminary+result%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result.</a> Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

En el presente informe se describe el diseño y construcción del sistema de quick-enlazador para el trasplante de hígado de rata más fácil. Trasplante de hígado de rata es un modelo popular entre 125-180 documentos relacionados que se publican anualmente desde la década de 1990 ( <a href="http://www.pubmed.com" target="_blank">www.pubmed.com</a> ). Además, permite una amplia gama de experimentos, incluyendo la exploración de aspectos de la preservación inmunológicos y de injerto. El uso del kit &quot;rápida-enlazador&quot; permite la anastomosis más fácil y más rápido con garantía de contacto de la íntima-a-íntima. Una descripción detallada y la discusión de los pasos técnicos de un trasplante de hígado de rata se han descrito anteriormente 1. El kit de rápido enlazador se puede construir a bajo precio de material común de laboratorio. El principal desafío encontrado se ha relacionado la ruptura de un mango durante el cepillado final, y ese problema se ha resuelto mediante el establecimiento de la nominal más estrechat del anillo de mango en 0,5 mm (Figuras 1 y 2 muestran tamaños apropiados). En cuanto a la calidad de la hoja, sólo debe considerarse de acero inoxidable. Aunque ligeramente menos flexible en comparación con la hoja de acero de carbono medio, cuchillas de acero inoxidable no se desarrollan óxido, lo que permite un uso en la vida de las asas. De nota, el diseño de las asas y puños actuales es el resultado de un proceso, que ha llevado a los tamaños de propuestas, lo que permite para las anastomosis más eficientes. Gemelos diámetros varían de acuerdo con los pesos de rata (Tabla 1). Mínimas variaciones se pueden tolerar en términos de longitud, con una longitud habitual de alrededor de 4 mm (Figuras 3 y 4). En cuanto a la aproximador, la pinza de Kocher seleccionado debería haber mangos al menos 4 cm del punto de apoyo. Esto permite un cierre seguro de la rejilla fuera del abdomen del animal. En general,el dispositivo propuesto puede permitir la anastomosis de vena más fácil para el trasplante de hígado y otros tipos de injertos en ratas.

Una técnica de trasplante ortotópico de hígado de rata se ha demostrado en un reciente Diario de experimentos visualizados papel 1. Vena porta y de infra-hepáticos vena cava anastomosis se realizaron con la técnica de puño asistida rápido enlazador. Esta técnica fue elegida entre otras revisiones de la técnica del Kamada original de 2-4, ya que permite la anastomosis más fácil y más rápido, resulta en una mejor hemodinámica, y puede ser implementado con una curva de aprendizaje más corta 1,5. La técnica rápida-enlazador requiere el uso de un mango, un aproximador y puños, todos los cuales pueden ser diseñados a partir de material común de laboratorio de acuerdo con la técnica descrita en el presente informe.

<table><tbody><tr><td>Brazalete Porta</td><td>altecweb o smiths-medical</td><td>Bobina 01-96-1729 800/100/420</td><td>Diámetro : variable Pared : 0,30 mm Longitud: 3,8-4,2 mm <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> o <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">smiths-medical.com</a></td></tr><tr><td>Vrazalete IVC</td><td>altecweb o smiths-medical</td><td>Bobina 01-96-1733 800/100/540</td><td>Diámetro : variable Pared : 0,30 mm Longitud: 3,8-4,2 mm <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> o <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">smiths-medical.com</a></td></tr><tr><td>Mini-taladro </td><td>Dremel</td><td>serie</td> <td>10035.000 rpm <a href="http://dremel.com" target="_blank">dremel.com</a></td></tr><tr><td>Punta de diamante</td><td>Dremel</td><td>7103</td><td>2 mm <a href="http://dremel.com" target="_blank">dremel.com</a></td></tr><tr><td>Punta de diamante</td><td>Dremel</td><td>7105</td><td>4,4 mm <a href="http:// dremel.com" target="_blank">dremel.com</a></td></tr><tr><td>Punta de rueda de diamante</td><td>Dremel</td><td>7144</td><td>2.4 mm <a href="http://dremel.com" target="_blank">dremel.com</a></td></tr><tr><td>Discos de corte</td><td>Dremel</td><td>420</td><td>diámetro: 23,8 mm espesor: 0,5 mm <a href="http:// dremel.com" target="_blank">dremel.com</a></td></tr><tr><td>El enlazador rápido maneja</td><td>dltchiropody (DLT)</td><td>PAR 10</td><td>hojas de bisturí modificadas <a href="http://dltchiropody.co.uk" target="_blank">dltchriopdy</a></td></tr><tr><td>Aproximador de enlace rápido</td><td>pharmap</td><td>UD-04-275</td><td>pinzas de Kocher modificadas <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a></td></tr></tbody></table>

fabricación de aparatos e instrumentos para facilitar la rata trasplante de hígado

Manufacturing Devices and Instruments for Easier Rat Liver Transplantation

Trasplante ortotópico de hígado de rata es un modelo popular, que se ha demostrado en un papel JoVe reciente con el uso del dispositivo &quot;rápida-enlazador&quot;. Esta técnica permite la fácil venosa del manguito-anatomoses después de una curva de aprendizaje razonable. El dispositivo se compone de dos asas, que se talla fuera de hojas de bisturí, una aproximador, que se obtiene mediante la modificación de unas pinzas de Kocher, y los puños diseñados a partir de tubo de polietileno de calibre fino. Todo el proceso se puede realizar en un laboratorio común el uso de material de bajo costo. El presente informe proporciona un protocolo paso a paso para el diseño de las piezas necesarias e incluye plantillas.

Cinco equipos, entre ellos cinco aproximadores y 11 tiradores han sido fabricados. Un asa se rompió durante la final cepillado. Este problema era debido al hecho de que el anillo de la manija era demasiado estrecha, y se ha resuelto mediante el establecimiento de la parte más estrecha del anillo de mango a 0,5 mm. No hay problemas ocurrieron durante la formación de los aproximadores. <table border="1"><tbody><tr><td> Peso Rat (g) </td><td> Porta mango (diámetro interno) (mm) </td><td> Porta manguito (diámetro exterior) (mm) </td><td> IVC mango (diámetro interno) (mm) </td><td> IVC manguito (diámetro exterior) (mm) </td></tr><tr><td> 120-180 </td><td> 2.2 </td><td> 1.7 </td><td> 2.6 </td><td> 2.08 </td></tr><tr><td> 180-270 </td><td> 2.6 </td><td> 2.08 </td><td> 03.04 a 03.07 </td><td> 3,0-3,25 </td></tr><tr><td> &gt; 270 </td><td> 2.9<html></td><td> 2.42 </td><td> 4.2 </td><td> 3.7 </td></tr></tbody></table> La Tabla 1. <img src="/files/ftp_upload/50380/50380fig1.jpg" alt="Figura 1" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50380/50380fig1highres.jpg"/> Figura 1. Porta plantilla mango. Si impresa con una escala de 1:01 se puede utilizar para guiar el mango de la conformación. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50380/50380fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver la figura más grande</a> . <img src="/files/ftp_upload/50380/50380fig2.jpg" alt="La figura 2" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50380/50380fig2highres.jpg"/> Figura 2. IVC plantilla mango. Si impresa con una escala de 1:01 se puede utilizar para guiar el mango de la conformación. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50380/50380fig2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver la figura más grande</a> . contenido &quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/50380/50380fig3.jpg" alt="Figura 3" fo:content-width="4.6in" fo:src="/files/ftp_upload/50380/50380fig3highres.jpg" /> Figura 3. V.Porta Porta y IVC puños vista lateral. Del injerto debe ser asegurado a la ranura central, mientras recipiente del destinatario al lateral. Este recurso permite el contacto óptimo de la íntima-a-íntima. <img src="/files/ftp_upload/50380/50380fig4.jpg" alt="Figura 4" fo:content-width="4.1in" fo:src="/files/ftp_upload/50380/50380fig4highres.jpg"/> La Figura 4. Están representados Porta y IVC puños vista frontal. Calibradores adecuados para ratas que pesaban 180-270 g.

Se describe el diseño del dispositivo &quot;quick-linker&quot; para el trasplante ortotópico de hígado de rata más fácil.

Fabricación de aparatos e instrumentos para facilitar la rata Trasplante de Hígado

Orthotopic rat liver transplantation is a popular model, which has been shown in a recent JoVE paper with the use of the "quick-linker" device. This ...

En un artículo de video reciente en Jo, describimos el uso del dispositivo conector rápido para facilitar el trasplante de hígado en ratas. El dispositivo no está disponible en el mercado, sin embargo puede fabricarse sin necesidad de habilidades profesionales. En este video, describimos cómo diseñar y elaborar un kit completo a partir de materiales de laboratorio comunes.Disfrute del video. El kit rápido de enlace para trasplante ortotópico de hígado en ratas se compone de un aproximador, un anillo para la vena cava VNA y otro más pequeño para la vena porta; sujete una hoja de bisturí número 10 sobre una tabla de madera con cinta adhesiva y coloque el centro del anillo bajo el microscopio. Debe ubicarse a 1,2 centímetros en línea recta desde la ranura del bisturí.Monte una broca de diamante en un taladro rotatorio de alta velocidad y perfore un orificio de dos milímetros. Amplíe el orificio con brocas de diamante cónicas. El diámetro del orificio debe ser de 2,6 milímetros para el mango del portal en ratas cuyo peso esté entre 180 y 240 gramos.Diseñe la forma externa del mango según se muestra en la plantilla. Incluido en la figura uno, convierta el taladro en una mini amoladora de banco y retire la parte de la hoja que queda fuera de la forma. Finalmente, redondee la pieza con un cepillo giratorio a baja velocidad.El aproximador se obtiene modificando pinzas quirúrgicas rectas o pinzas de Kocher, recortando aproximadamente la mitad de una rama bajo el microscopio. Utilizando una minilijadora de alta velocidad, realice ranuras simétricas en ambos lados para permitir que el mango se deslice completamente. Corte una hendidura longitudinal en el brazo largo y verifique que el centro del brazo largo y el mango correctamente posicionado estén en el mismo eje.Diseñe una muesca en el brazo largo orientado hacia el centro del extremo. Haga que la rama sea lo más delgada posible. Finalmente, redondee la pieza con un cepillo giratorio de baja velocidad; los calibradores para becerros varían según el peso y las cepas de las ratas.Sin embargo, la tierra siempre debe mantenerse alrededor de cuatro milímetros. Consulte la tabla uno para conocer los rangos de calibre. Tome un tubo de polilínea delgado y redondee un extremo con un bisturí número 10.Diseñe una ranura a 0,5 milímetros del borde. Ahora corte cuidadosamente hasta llegar a la ranura. Realice uno o dos cortes de espesor completo en el tubo.Estos ayudarán a manipular el conducto durante la preparación y trasplante del injerto. Finalmente, corte el conducto a cuatro milímetros del borde. Mostramos cómo construir un kit compuesto por un anillo para la vena porta y su conducto, un anillo para la vena cava hepática y su conducto, y un aproximador.Estas herramientas facilitan la reimplantación hepática al ayudar en la inserción de los colgajos. Todas las piezas metálicas se retiran inmediatamente después de la fusión, por lo que el kit puede reutilizarse ilimitadamente independientemente de la variación en tamaño o forma del anillo. La alineación con el aproximador es el factor más crítico.Otro factor importante es el grosor de las ranuras, que no debería ser inferior a 0,5 milímetros; en la parte inferior de la imagen, por ejemplo, se ha moldeado correctamente por contraste. En la superior, el puente metálico entre dos segmentos es demasiado delgado y podría provocar una ruptura durante la fase de cepillado final, como en este caso según las medidas.Dado que no debería ocurrir ningún problema y los instrumentos podrían durar potencialmente para siempre.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Bioengineering

Bioingeniería

Se presenta una revisión fácil de establecer de la clásica banda de dos técnicas para el trasplante ortotópico de hígado en ratas.

Trasplante ortotópico de hígado en ratas

Trasplante ortotópico de hígado en ratas es un modelo experimental indispensable para la investigación biomédica. A continuación les presentamos nuestros procedimientos quirúrgicos de trasplante ortotópico de hígado de rata con la reconstrucción arterial hepática mediante un injerto parcial del 50%.

Procedimientos Quirúrgicos para un modelo de rata de trasplante hepático ortotópico parcial con reconstrucción arterial hepática

Trasplante hepático auxiliar proporciona un soporte temporal en la insuficiencia hepática aguda, hasta que la regeneración del hígado no. El trasplante heterotópico auxiliar hígado (HALT) con arterialización vena porta (PVA) hace una función hepática suficiente. Hemos desarrollado una técnica análoga en la rata, para examinar la influencia de la arterialización de la vena porta en la morfología y la función del injerto.

Heterotópico Rata auxiliar Trasplante de Hígado Con Flujo regulado Portal Vein Arterialización en aguda Insuficiencia Hepática

Las técnicas presentadas para la recolección de hígado, la canulación y la perfusión utilizando nuestro dispositivo patentado permiten sofisticadas configuraciones de perfusión para mejorar los experimentos de descelularización y recelularización en hígados de rata.

Procedimiento para Descelularización de rata hígados en un dispositivo de perfusión oscilante presión

Un modelo de abrazadera hiliar hígado de rata única fue desarrollado para estudiar el impacto de moléculas farmacológicas en la mejora de la lesión por isquemia-reperfusión. Este modelo incluye la canulación directa del suministro de portal al segmento de hígado isquémico a través de una rama de la vena porta, lo que permite la entrega hepática directa.

Método de la entrega directa segmentaria intra-hepática utilizando un modelo de hígado de rata hiliar abrazadera

Aquí, se presenta un protocolo de trasplante hepático parcial rata vuelva a arterializada. Específicamente, hígado 70% fue resecado en vivo mediante el uso de una técnica actualizada de hepatectomía orientada al buque. La arteria hepática fue reconstruida de manera final a otro. La técnica del manguito fue modificada para acortar el tiempo de anastomosis de la cava de infrahepatic.

Volver a arterializada rata parcial trasplante del hígado con una en vivo orientada al barco 70% hepatectomía

La reconstrucción de la cava suprahepática (SHVC) sigue siendo un paso difícil en el trasplante orthotopic del hígado de rata. En este artículo, se muestra un protocolo paso a paso para la reconstrucción de SHVC en ratas usando una técnica de anastomosis magnética novela.

Un modelo de rata de Orthotopic trasplante del hígado usando una técnica de Anastomosis magnética novela para la reconstrucción de la Vena Cava suprahepática

El objetivo de este estudio es modificar el modelo de trasplante de hígado ortotópico de rata para representar mejor el trasplante de hígado humano y mejorar la supervivencia del receptor. El método presentado restablece la entrada arterial hepática conectando la arteria hepática común del hígado del donante con la arteria hepática adecuada del hígado receptor.

Reducción de las complicaciones después de la reconexión arterial en un modelo de rata de trasplante hepático ortotópico

Este protocolo detalla el uso de un catéter intravenoso especial, tubos desechables estériles estandarizados, control de temperatura complementado con monitoreo en tiempo real y un sistema de alarma para el procedimiento de perfusión de colagenasa de dos pasos para mejorar la consistencia en la viabilidad, el rendimiento y la funcionalidad de los hepatocitos primarios aislados de ratas.

Aislamiento de hepatocitos primarios de rata con control de perfusión multiparamétrico

El protocolo de trasplante hepático auxiliar heterotópico en ratas descrito aquí ofrece una herramienta práctica de investigación para explorar los mecanismos de rechazo del aloinjerto hepático. Este modelo ayuda a aliviar los obstáculos quirúrgicos y el estrés animal del trasplante ortotópico de hígado en ratas.

Modelo de trasplante heterotópico auxiliar de hígado entero en rata que utiliza una hepaticoureterostomía para estudios de rechazo de aloinjertos

Aprende a fabricar el dispositivo quick-linker para trasplante hepático ortotópico en ratas utilizando materiales comunes de laboratorio. Esta técnica mejora la accesibilidad y eficiencia de los procedimientos quirúrgicos en modelos animales.

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