La transducción adenoviral de células T CD4 + naïve a estudiar la diferenciación Treg

Este protocolo proporciona un flujo de trabajo para la producción de partículas adenovirales infecciosas que se utilizan para transducir un gen de interés en células T vírgenes, que tras la expresión atópica del transgén se diferencian en células T reguladoras o tregs. En primer lugar, se clona el gen de interés en el vector de destino del adenovirus. A continuación, el vector se transfiere a la línea celular productora de adenovirus, HC 2 93 A y se generan partículas adenovirales infecciosas.

Los virus resultantes se utilizan para infectar células T vírgenes de ratones con un transgén de receptor de adenovirus después de la infección. A continuación, las células se descansan para asegurar la expresión del gen de interés. En las células T vírgenes, las células T se activan en condiciones de polarización para inducir la diferenciación treg.