Membrana-COLUMNA: una herramienta bioquímica para identificar las interacciones proteína-proteína de Proteínas de la Membrana En Vivo

El objetivo general de este procedimiento es identificar in vivo las interacciones proteicas de las proteínas de membrana a través de un experimento de interacción de proteínas estreptocócicas de membrana o columna vertebral de membrana. Esto se logra mediante reticulación in vivo utilizando el reticulante reversible para formaldehído. El segundo paso es purificar la proteína de cebo de membrana marcada con estreptococos junto con las proteínas de presa reticuladas.

A continuación, la reticulación se invierte mediante ebullición. El paso final es la separación de la proteína de cebo de membrana y las proteínas de presa copurificadas mediante sulfato de sodio do desalinización, electroforesis en gel de poliacrilamida o página SDS. En última instancia, se utiliza el análisis de inmunotransferencia y espectrometría de masas para identificar las proteínas de la presa, lo que permite analizar las interacciones de las proteínas de membrana.