Potencial de Membrana Tinte Imaging de ventromedial del hipotálamo neuronas de ratones adultos para el Estudio de la glucosa Sensing

El objetivo general de este procedimiento es evaluar la detección de glucosa en neuronas hipotalámicas mediales ventrales o VMH de ratones mayores, utilizando un colorante sensible al potencial de membrana como índice de actividad neuronal. Esto se logra realizando primero la perfusión cardíaca para expulsar la sangre del cerebro de un ratón anestesiado antes de la extracción del cerebro. El segundo paso es crear cortes coronales de cerebro y diseccionar el VMH.

A continuación, las neuronas VMH se disocian y se cultivan en cubreobjetos. El paso final es medir la fluorescencia de las neuronas a medida que la glucosa disminuye en presencia de colorante de potencial de membrana. En última instancia, cada cambio de neurona en fluorescencia se utiliza para cuantificar la respuesta de esa neurona inhibida por la glucosa a los cambios en la glucosa.