Análisis de defectos del músculo esquelético en larvas de pez cebra mediante ensayos de birrefringencia y respuesta de escape de evocación táctil

El objetivo general de este procedimiento es evaluar el grado de organización miofibrilar en larvas de pez cebra translúcidas y cuantificar su distancia de nado en respuesta a la estimulación táctil de ambos métodos. Esto se logra primero apareando al pez cebra y luego recolectando huevos viables en el segundo paso del ensayo para evaluar la estructura muscular. Un embrión de pez cebra anestesiado recubierto se coloca directamente entre dos lentes polarizadas en una platina de microscopio estereoscópico para que el pez esté orientado a lo largo del eje lateral de su cuerpo y tenga una orientación lo más plana posible.

A continuación, se visualiza la birrefringencia y se cuantifica la integridad muscular. En el segundo paso del ensayo de escape evocado por el tacto, se coloca una sola larva recubierta en una placa de Petri profunda y luego se centra en el campo de visión del microscopio estereoscópico. Un estímulo meno sensorial se administra a las larvas tocando la cola con un alfiler de insecto, y se obtiene una imagen de la reacción del animal hasta que el embrión deja de nadar o nada fuera del campo de visión.