Recolección e identificación de helmintos de la vida silvestre

El objetivo general de este procedimiento es recolectar, preservar e identificar cascos procedentes de vida silvestre. Esto se logra primero mediante la necropsia de un animal silvestre. A continuación, se recolectan cascos de diferentes órganos, y luego se preservan los cascos utilizando diversas técnicas para su posterior identificación.

Finalmente, los cascos se aclaran, tiñen y montan, y se identifican las especies. En última instancia, se pueden obtener resultados que muestran estructuras específicas de los cascos mediante técnicas de aclarado y/o tinción que pueden facilitar enormemente la identificación de especies. Aunque este método puede aplicarse para la identificación de cascos de mamíferos, aves, reptiles y anfibios.

También puede aplicarse a otros organismos como los peces. Para comenzar, coloque el animal sobre una superficie plana y utilice una lupa para examinar todas las aberturas externas, incluyendo orejas, cavidad oral y ojos, en busca de la presencia de nematodos, ECEs, dedos y trematodos. Utilice una hoja afilada o un cuchillo y un par de pinzas de disección.

Realice una incisión sobre la cavidad abdominal teniendo cuidado de no romper ningún órgano. Luego, con cortadores de hueso o una sierra manual pequeña si es necesario, abra la cavidad torácica. Examine ambas cavidades en busca de gusanos redondos, nematodos y trematodos grandes.

Luego ate un hilo cerca del comienzo del esófago y otro al final del intestino grueso para su examen. Bajo un microscopio estereoscópico, separe el corazón y los principales vasos sanguíneos, la tráquea y los pulmones en placas de Petri individuales. Retire el hígado, la vesícula biliar y el conducto pancreático, el bazo, los riñones y la vejiga urinaria, y examínelos bajo el microscopio estereoscópico.

Luego, retire todo el sistema digestivo y coloque cada sección en un recipiente de vidrio. Después de extraer los órganos, use una manguera o una botella de lavado llenas con solución salina al 0,9 % para limpiar la cavidad corporal, dejando que el líquido pase a través de un tamiz de malla de 106 micrómetros. Lave a contracorriente el contenido del tamiz hacia una placa de Petri y examine el contenido bajo un microscopio estereoscópico. Para detectar gusanos Fal o trematodos sanguíneos, abra con tijeras cada sección del tracto digestivo.

Raspe la mucosa y examínela cuidadosamente en busca de la presencia de parásitos grandes. Los psci de encanto cephas suelen estar profundamente incrustados en la pared del intestino. Por lo tanto, si es necesario, use pinzas y/o tijeras pequeñas para extraerlos cuidadosamente del tejido.

Coloque cada sección abierta bajo agua corriente y lave el contenido en un tamiz de 106 micrómetros. Luego abra el corazón y los principales vasos sanguíneos, la tráquea y las vesículas urinaria y biliar, y examine el contenido de la misma manera. Utilice una hoja afilada y pinzas para cortar y separar los órganos sólidos, como el hígado, los pulmones, los riñones, el bazo y el páncreas, y lave y examine su contenido. Registre los tipos de parásitos.

Se determinó el número de cada tipo y los órganos en los que se encuentran. Etiquete los frascos o recipientes colocando dentro un pequeño trozo de una ficha sin imprimir etiquetada a lápiz para preservar los capullos para estudios genéticos posteriores. Primero, colóquelos directamente en etanol.

Después de fijar la muestra durante uno o varios días, transfiérala a un vial de vidrio de cinco mililitros lleno con etanol al 70 % para su almacenamiento a largo plazo. Para conservar los tremátodos, coloque los especímenes vivos sobre un portaobjetos de microscopio de vidrio en una gota de solución salina, coloque un cubreobjetos de vidrio y pase el portaobjetos sobre una llama sin hervir la solución salina. Luego, coloque el portaobjetos en una placa de Petri que contenga alcohol, ácido fórmico acético o FA, y deje que el cubreobjetos flote y se desprenda.

Fije los tremátodos muertos en FA o formaldehído tamponado al 10 % durante 48 horas antes de transferirlos a un frasco lleno con etanol al 70 % para su almacenamiento a largo plazo. Para fijar estos, relaje los animales vivos en una placa de Petri vertiendo agua cercana al punto de ebullición sobre ellos, y luego transfiéralos a un frasco lleno con etanol al 70 % para su almacenamiento a largo plazo. Relaje los encéfalos vivos colocándolos en una placa de Petri con agua del grifo en el refrigerador durante una a varias horas hasta que el probóscide esté completamente retraído.

Trasférilos a un frasco lleno de etanol al 70 % o a un FA para almacenamiento a largo plazo. Mate los nematodos pequeños o frágiles con etanol caliente al 70 % y consérvelos en un frasco lleno de etanol al 70 % con 5 % de glicerina para matarlos. Nematodos de tamaño mediano a grande.

Colóquelos en ácido acético glaciar frío y, después de 15 minutos, transfiéralos a un frasco lleno con etanol al 70% y glicerina al 5%. Prepare la hematina de Harris disolviendo hematina y alcohol, y disolviendo sulfato de aluminio amónico en agua con calor. Mezcle ambas soluciones y lleve a ebullición.

Luego agregue yodato de sodio y hiérvalo durante dos o tres minutos. Cuando la solución se enfríe, use papel de filtro 5 41 para filtrar la solución y eliminar el tinte Trematodes estos, y vierta en Cephas Place en hematina de Harris o carmín semicon durante la noche para fijar las muestras. Coloque en etanol al 70 % ácido hasta que los órganos sean visibles.

Para detener la coloración con DES, transfiera los especímenes a etanol básico al 70 % durante al menos 30 minutos. Deshidrate las muestras en una serie de etanol y utilice xileno o salicilato de metilo para aclararlas. Para montar los especímenes en un portaobjetos microscópico, agregue una gota de bálsamo de Canadá y una laminilla. Deje secar durante la noche. Para aclarar nematodos pequeños y medianos y encistos cefalados, colóquelos en monturas de fenol láctico sobre un portaobjetos y cúbralos con una laminilla durante 15 a 30 minutos. Haga lo mismo para nematodos grandes y encistos cefalados.

Coloque en fenol al 80 % durante un máximo de 60 minutos. Examine al microscopio óptico para verificar la clarificación de las estructuras más pequeñas para el estudio de los atos de Culex. Córtele y colóquelo en una cantidad de fenol láctico.

En un portaobjetos de microscopio. Utilice un cubreobjetos para aplanar el Culex y permitir la medición y el conteo de los ganchos estelares rosados. Corte el extremo anterior y monte sobre Foss en un microscopio.

Deslice bajo unas gotas de fenol láctico o en una gelatina de glicerina para un montaje permanente. Observe las piezas bucales bajo un microscopio de luz. Después de cortar las colas de los nematodos grandes y montarlos en fenol láctico, observe el paoli ventral y la morfología de las espículas de los machos bajo un microscopio de luz utilizando los métodos descritos en este video.

Se realizó un estudio de los cascos de los escenarios de la musaraña enmascarada Sox en el condado de Missoula, Montana. Entre 2007 y 2011. Se recolectaron un total de 56 musarañas a partir de trampas de caída y se examinaron dentro de las dos horas posteriores a la muerte.

La prevalencia general de la infección fue del 96 %. Solo dos musarañas estaban libres de parásitos. Se identificaron 15 especies de helmintos, incluyendo nueve especies de estos y seis especies de nematodos. Una especie del género Esto, Staphylo authorities, no había sido descrita previamente.

Los órganos encontrados infectados incluyeron el intestino delgado, el estómago, los pulmones y la vejiga urinaria. Las intensidades totales de infección oscilaron entre siete y 234 parásitos por huésped infectado, y la riqueza de especies de garrapatas por huésped infectado varió entre una y ocho, con una media de 4,1. Una vez dominada, esta técnica puede realizarse en uno a dos Rs en un pequeño mamífero como una ardilla, y en cuatro a cinco Rs en un mamífero más grande como un mapache.

Después de ver este video, debería tener una comprensión muy clara de cómo recolectar, preservar e identificar cascos de vida silvestre.