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Recolección e identificación de helmintos de la vida silvestre
Recolección e identificación de helmintos de la vida silvestre
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Helminth Collection and Identification from Wildlife

Recolección e identificación de helmintos de la vida silvestre

Full Text
16,423 Views
09:37 min
December 14, 2013

DOI: 10.3791/51000-v

Maria S Sepulveda1, John M Kinsella2

1Department of Forestry and Natural Resources,Purdue University, 2Helm West Laboratory

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Los animales salvajes suelen ser parasitados por una amplia gama de helmintos. Los cuatro tipos principales de helmintos son los "gusanos redondos" (nematodos), los "gusanos de cabeza espinosa" (acantocéfalos), los "trematodos" y las "tenias" (cestodos). Aquí describimos cómo se recolectan los helmintos de un animal vertebrado y cómo se conservan e identifican taxonómicamente.

El objetivo general de este procedimiento es recolectar, preservar e identificar cascos de la vida silvestre. Esto se logra mediante la primera necropsia, un animal salvaje. A continuación, se recogen cascos de diferentes órganos, luego los cascos se conservan utilizando una variedad de técnicas para su posterior identificación.

Finalmente, se limpian, se tiñen y se montan los cascos, y se identifican las especies. En última instancia, se pueden obtener resultados que muestran estructuras específicas del casco a través de técnicas de limpieza o tinción que pueden ayudar en gran medida en la identificación de especies. Aunque este método se puede aplicar para la identificación de cascos de mamíferos, aves, reptiles y anfibios.

También se puede aplicar para otros organismos como los peces. Para comenzar, coloque al animal sobre una superficie plana y use una lupa para examinar todas las aberturas externas, incluidos los oídos, la cavidad bucal y los ojos, para detectar la presencia de nematodos, CSE, dedos de los pies y trematodos. Usar una cuchilla afilada o un cuchillo y un par de pinzas de disección.

Haga una incisión sobre la cavidad abdominal teniendo cuidado de no romper ningún órgano. Luego, con cortadores de hueso o una pequeña sierra de mano si es necesario, abra la cavidad torácica. Examine ambas cavidades en busca de fal, gusano redondo y trematodos grandes.

Luego, ate un hilo cerca del comienzo del esófago y otro al final del intestino grueso para examinarlo. Bajo un microscopio estereoscópico, separe el corazón y los vasos sanguíneos principales, la tráquea y los pulmones en placas de Petri individuales. Extirpar el hígado, la vesícula biliar y el páncreas conductal, el bazo, los riñones y la vejiga urinaria, y examinarlos bajo el microscopio estereoscópico.

Luego retire el sistema digestivo completo y coloque cada sección en un plato de vidrio. Una vez que se hayan extraído los órganos, use una manguera o una botella rociadora llena de solución salina al 0,9% para lavar la cavidad corporal, permitiendo que se filtre a través de un tamiz de malla de 106 micrómetros. Lave a contracorriente el contenido del tamiz en una placa de Petri y examine el contenido bajo un microscopio estereoscópico Para gusanos Fal o trematodos de la sangre con tijeras, abra cada sección del tracto digestivo.

Raspe la mucosa y examínela cuidadosamente para detectar la presencia de parásitos grandes. Los psci de las cefas de encanto a menudo están profundamente incrustados en la pared del intestino. Por lo tanto, si es necesario, use fórceps o tijeras pequeñas para separarlos cuidadosamente del tejido.

Coloque cada sección abierta bajo agua corriente y lave el contenido en un colador de 106 micrómetros. A continuación, abra el corazón y los vasos sanguíneos principales, la tráquea y la vesícula urinaria y biliar, y examine el contenido. De la misma manera, utilice una cuchilla afilada y unas pinzas para cortar y separar órganos sólidos como el hígado, los pulmones, el riñón, el bazo y el páncreas, y lave y examine el contenido. Registre los tipos de parásitos.

Encontró el número de cada tipo y los órganos en los que se encuentran. Etiquete los frascos o frascos colocándolos dentro de un pequeño pedazo de una tarjeta de índice simple etiquetada con lápiz para preservar los cascos para estudios genéticos posteriores. Primero colóquelos directamente en etanol.

Después de fijar la muestra durante uno o varios días, transfiérala a un vial de vidrio de cinco mililitros lleno de etanol al 70% para su almacenamiento a largo plazo. Para preservar los trematodos, coloque especímenes vivos en un microscopio de vidrio, deslice una gota de solución salina, aplique un cubreobjetos de vidrio y pase el portaobjetos sobre una llama sin hervir la solución salina. A continuación, coloque el portaobjetos en una placa de Petri que contenga alcohol, formina, ácido acético o un FA y deje que la tapa salga flotando.

Fije los trematodos muertos en una FA o en una formina tamponada al 10% durante 48 horas antes de transferirlos a un frasco lleno de etanol al 70% para su almacenamiento a largo plazo. Para arreglar estos, relaje los animales vivos en una placa de Petri vertiendo agua casi hirviendo sobre ellos, y luego transfiéralos a un frasco lleno de etanol al 70% para su almacenamiento a largo plazo. Relájese con los encanto cefas vivos colocándolos en una placa de Petri con agua del grifo en el refrigerador durante una a varias horas hasta que la probóscide se haya evitado por completo.

Transfiéralos a un frasco lleno de etanol al 70% o un FA para su almacenamiento a largo plazo. Mata los nematodos pequeños o frágiles y calienta el etanol al 70% y conserva en un frasco lleno de etanol al 70% con glicerina al 5% para matar. Nematodos medianos a grandes.

Colóquelos en ácido acético glacial frío y, después de 15 minutos, transfiéralos a un frasco lleno de 70% de etanol y 5% de glicerina. Prepare Harris Hematin disolviendo hematina y alcohol y disolviendo sulfato de amonio y aluminio en agua sobrecalentada. Mezcle ambas soluciones y deje hervir.

Luego agregue el yodato de sodio y hierva durante dos o tres minutos. Cuando la solución se enfríe, use papel de filtro 5 41 para filtrar la solución para manchar abiertamente los trematodos y decantar Cephas Place en Harris Hematin o semicon Carmine durante la noche para retener las muestras. Coloque en etanol ácido al 70% hasta que los órganos sean visibles.

Para detener la desmanchación, transfiera las muestras a etanol básico al 70% durante al menos 30 minutos. Deshidrate las muestras en una serie de etanol y use xileno o salicilato de metilo para limpiarlas para montar las muestras en un portaobjetos de microscopio, agregue una gota de Canada Bossum y un cubreobjetos. Deje secar durante la noche los nematodos pequeños a medianos claros y las cefas de encanto colocándolos en montajes de fenol lactoso en un portaobjetos de microscopio y cubriéndolos con un cubreobjetos durante 15 a 30 minutos para nematodos grandes y cefas encanto.

Coloque en 80% de fenol durante un máximo de 60 minutos. Examinar bajo un microscopio óptico para verificar la limpieza de estructuras más pequeñas para examinar el culex atos. Córtalo y colócalo sobre la cantidad de lactofenol.

En un portaobjetos de microscopio. Use un cubreobjetos para aplastar el culex para poder medir y contar los anzuelos estelares de rosas. Corta el extremo anterior y móntalo en Foss con un microscopio.

Deslícelo bajo unas gotas de fenol de lact o en una gelatina de glicerina para una fijación permanente. Observe las partes de la boca bajo un microscopio óptico. Después de cortar las colas de los nematodos grandes y montarlos en lactofenol, observe el paoli ventral y la morfología picante de los machos bajo un microscopio óptico utilizando los métodos descritos en este video.

Se llevó a cabo una encuesta de los cascos de los Sox en el condado de Missoula, Montana. Entre 2007 y 2011. Un total de 56 musarañas fueron recolectadas de trampas de caída y examinadas dentro de las dos horas posteriores a la muerte.

La prevalencia general de la infección fue del 96%Solo dos musarañas estaban libres de parásitos. Se identificaron 15 especies de cascos, incluidas nueve especies de estos y seis especies de nematodos. Una especie del género Esto staphylo authorities no había sido descrita previamente.

Los órganos infectados incluyeron el intestino delgado, el estómago, los pulmones y la vejiga urinaria. Las intensidades totales de infección oscilaron entre siete y 234 gusanos por especie huésped infectada, la riqueza o el número de especies de casco por huésped infectado osciló entre uno y ocho, con una media de 4,1 una vez dominado. Esta técnica se puede hacer en una o dos R en un mamífero pequeño como una ardilla, y de cuatro a cinco R en un mamífero más grande como un mapache.

Después de ver este video, debería tener una muy buena comprensión de cómo recolectar, preservar e identificar cascos de la vida silvestre.

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Palabras clave: helminto nematodo acantocéfalo trematodo cestodo necropsia tamiz microscopio fijación aclarado tinción identificación de especies animal vertebrado

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