Cerebro Slice Biotinilación: Una Ex Vivo Enfoque medir tráfico de proteínas específicas Región membrana plasmática en adultos las neuronas

El objetivo general de este procedimiento es cuantificar los cambios agudos en las proteínas de la superficie neuronal. En las preparaciones ex vivo de rebanadas de cerebro, esto se logra preparando primero rodajas de cerebro agudas viables. A continuación, las rodajas se tratan con fármacos de interés.

A continuación, las proteínas de la superficie celular se marcan mediante reactivos de tonación imperiana de membrana. Por último, las proteínas biotiniladas de superficie se aíslan mediante cromatografía ávida de estreptococos y de afinidad. En última instancia, el trazado inmunológico se utiliza para cuantificar los cambios en la expresión de la superficie de las proteínas después de los tratamientos farmacológicos.