Name: Preferencia grasa: Un Modelo de Novela de la conducta alimentaria en ratas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-27T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Aprende a evaluar la preferencia por grasa en ratas mediante manipulaciones genéticas y farmacológicas. Este modelo permite estudiar los mecanismos del consumo excesivo de alimentos y la obesidad en neurociencia.

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Los autores desean agradecer la financiación de UL1TR000071 (NCATS), P30DK079638 (NIDDK), P30DA028821 (NIDA) y T32DA07287 (NIDA).

Todos los procedimientos experimentales están de acuerdo con la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio (Instituto de Recursos Animales de Laboratorio (EE.UU.), 1996) y con la aprobación del Comité de Cuidado de Animales institucional y Uso de la Universidad de Texas Medical Branch. 1. Los sujetos <ol><li> Soltero casa ratas macho Sprague-Dawley con un peso de 225-250 g a 21 º C y una humedad relativa del 30-50%, con un ciclo de luz-oscuridad de 12 horas (luces encendidas 6:00 am-6: 00 pm). </li><li> Mantener ratas en un alimento bajo en grasa (10% de grasa en energía). Habituar ratas a la alimentación y la colonia ambiente durante al menos 7 días antes de la experimentación. Los animales se habituaron a la manipulación y la dosificación de vehículo durante tres días antes de comenzar los estudios. El primer día después de la habituación es el Día experimental 1. </li></ol> 2. Preferencia de línea de base <ol><li> Día 1, llenar dos tolvas de alimentos limpias, uno marcado con una A y la otra con B, con 10% de grasa de alimentos para cada jaula. WEigh las tolvas de alimentos (con la comida) y colocarlos en la jaula, lo que garantiza que la rata tiene acceso a ambos. </li><li> Día 2, aproximadamente a las mismas tolvas de alimentos de tiempo fueron colocados en la jaula el día anterior, registrar el peso de la tolva de alimentación y cambiar las posiciones de A y tolva tolva B. Esto mitiga el sesgo de posición. Siempre examine la jaula de alojamiento para cualquier alimento retirado de la tolva, se pesa, y dar cuenta de ello. La ingesta de alimentos se mide por el cambio en el peso de la tolva entre los días. </li><li> Día 3, registrar los pesos de la tolva de alimentos como antes. Examinar la cantidad de comida consumida en cada posición de la tolva de alimentos y la identificación de la tolva de alimentos (A y B). Estos datos dan una comprensión básica de sesgo posición y preferencia tolva específica, y debe tener una puntuación de preferencia de aproximadamente el 50% indica que no hay preferencia. Tire a la basura los alimentos que quedan. </li></ol> 3. Preferencia Fat <ol><li> Día 3, obtenga dos tolvas de alimentos limpios para cada jaula. Es importante la utilización de tolvas de alimentos limpioscuando se cambia entre las diferentes comidas para evitar los olores de confusión de los experimentos anteriores. Llene la tolva con un 12,5% de alimentos de grasa y la tolva B con 15% de los alimentos en grasa (Tabla 1). Registrar los pesos de partida de cada tolva y colocar tanto en la jaula. </li><li> Día 4, registrar los pesos de cada tolva, cambiando la posición de la tolva A y B de la tolva al colocar de nuevo en la jaula. </li><li> Día 5, registrar los pesos de cada tolva. Después de determinar los gramos de cada alimento consumido en los dos días, la preferencia de alimentos de la rata puede ser determinada. </li><li> Repita los pasos 3.1 a 3.3 en múltiples ocasiones con los mismos animales que utilizan la comida grasa 12,5% en comparación con los alimentos con el aumento del contenido de grasa (por ejemplo, primero el 15%, al lado 17.5%, luego 20% y, por último, 45% de grasa). </li></ol> 4. Cálculos y análisis de datos <ol><li> Calcular la ingesta diaria de alimentos para cada animal restando la masa final de la tolva de alimentación + de la masa inicial de la comida+ Tolva. Debido a que cada comida se mide más de 2 días, el total de 2 días se pueden sumar para cada contenido de grasa%. </li><li> Calcular la puntuación de preferencia la grasa dividiendo el consumo de la mayor de alimentos de grasa del total de alimentos consumidos durante cada período de dos días. Por ejemplo, una rata comió 8,9 g de la dieta de grasa 12,5% y 27,5 g de la dieta 17,5% durante 2 días. Por tanto, la puntuación de preferencia para ese animal individual es del 76% (27,5 dividido por 36,4). </li><li> Promedio y el gráfico de la puntuación de preferencia para cada dieta (15%, 17,5%, 20% y 45% de grasa) (Figura 3). La ingesta total de alimentos también es informativo y fácilmente se puede trazar en gramos (Figura 4). </li><li> Expresar la puntuación de preferencia (Figura 5A) y la ingesta total de alimentos (Figura 5B) como una función de la ingesta de energía total (kilocalorías) usando la densidad de energía en la Tabla 1. </li><li> Si se utiliza más de un grupo de animales, lleve a cabo una repetición de dos víased mide ANOVA seguido de un post-test de Bonferroni. El análisis del poder indica que n = 8 animales por grupo es apropiado para detectar una diferencia de 7% entre los grupos de tratamiento. </li></ol>

<ol><li>Flegal, K. M., Carroll, M. D., Ogden, C. L., Curtin, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+and+trends+in+obesity+among+US+adults%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Prevalence and trends in obesity among US adults.</a> JAMA. 303 (3), 235-241 (1999).</li>
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<li>Lucas, F., Ackroff, K., Sclafani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+fat-induced+hyperphagia+in+rats+as+a+function+of+fat+type+and+physical+form%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Dietary fat-induced hyperphagia in rats as a function of fat type and physical form.</a> Physiol Behav. 45 (5), 937-946 (1989).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

El modelo de Preferencia La grasa es un ensayo informativo y fácil de realizar la conducta alimentaria. Este ensayo ofrece una oportunidad para identificar mecanismos neurales y moleculares que subyacen a la preferencia de alimentos, que es una importante zona aún poco de investigación sobre la obesidad. Los cambios en la preferencia grasa de diferencias genéticas o manipulaciones farmacológicas pueden ser visualizados como desplazamientos a la derecha o hacia la izquierda en la curva de preferencia (Figura 3B)....

La obesidad es un problema frecuente en los Estados Unidos 1, con los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades estiman que más de un tercio de los adultos estadounidenses son obesos. La obesidad también se ha identificado como un factor de riesgo para numerosas preocupaciones de salud, incluyendo diabetes tipo 2, presión arterial alta y colesterol alto 2. Aunque se han mostrado muchos factores para influir en el aumento de las tasas de obesidad, existe un interés continuo y controversia en el papel macronutrientes desempeñan en 3,4 obesidad. Un factor que contribuye a la obesidad es alta ingesta de grasas en la dieta 5. Aumento de la grasa de la dieta se correlaciona con un mayor consumo de energía humano 6 y aumentos significativos en el contenido de grasa corporal 7,8. Además, la grasa de la dieta tiene valor de la recompensa, tanto durante como después de 7,9 consumo. Por lo tanto, determinar qué factores influyen preferencia por alimentos con alto contenido de grasa puede producir tanto desi guía farmacoterapéuticagn y promover la comprensión de los hábitos dietéticos subyacentes que pueden conducir a la obesidad. El modelo Preferencia Fat aquí descrito pruebas de preferencia de las ratas entre los alimentos de diferente contenido de grasa, pero el valor nutricional similar. En concreto, este modelo presenta las ratas con una opción de dos alimentos diferentes a la vez, permitiendo así la cuantificación de preferencia basada en gramos consumidos de los alimentos con menos grasa versos la comida con más grasa. Los efectos farmacológicos y genéticos se pueden medir como un cambio en la preferencia por la comida con alto contenido de grasa. El modelo Preferencia grasa sirve para complementar los modelos de consumo de alimentos apetecibles ampliamente utilizados 10, pero también ofrece varias ventajas. Este modelo permite que el experimentador para evaluar específicamente el comportamiento de alimentación en un ambiente controlado en el que dos opciones de comida están disponibles. Los modelos tradicionales de alimentación rica en grasas sólo ofrecen un alimento que elimina la capacidad para estudiar la elección de alimentos, una importantepecto de la ingesta de alimentos para humanos. Algunos ensayos ofrecen varios tipos de alimentos y se refieren a menudo como &quot;cafetería&quot; estudios de tipo de alimentación 11. Estos estudios sufren de reproducibilidad debido a la alimentación humana se utiliza a menudo en el ensayo y no es muy adecuado para el entorno del laboratorio debido a la variabilidad de nutrientes. Utilizamos dietas definidas que contienen ingredientes así purificadas individuales que mejora la reproducibilidad y la flexibilidad de cambiar el contenido de macronutrientes tales como grasa de la dieta. Con una mayor ingesta de grasas en la dieta asociada a la obesidad en los seres humanos 5 y la preferencia humana natural para alimentos con mayor contenido de grasa 12, los tratamientos que alteran la preferencia de la rata para los alimentos altos en grasa pueden proporcionar información valiosa sobre la obesidad.

<table><tbody><tr><td>Dieta para roedores con 10 kcal% de grasa</td><td>Dietas de investigación</td><td>D12450B</td><td>10% de grasa Alimento</td></tr><tr><td>para ratas Dieta para roedores con 12,5 kcal% de grasa</td><td>Dietas de investigación</td><td>D07040501</td><td>12,5% de grasa alimento</td>para</tr><tr><td>ratas Dieta para roedores con 15 kcal% de grasa</td><td>Dietas de investigación</td><td>D07040502</td><td>15% de grasa</td></tr><tr><td>Alimento para ratas Dieta para roedores con 17,5 kcal% de grasa</td><td>Dietas de investigación</td><td>D07040503</td><td>17,5% de grasa Alimento</td></tr> <tr><td>para ratasDieta para roedores con 20 kcal%</td><td>de grasa Dietas de investigación</td><td>D07040504</td><td>20% de grasa alimento</td>para</tr><tr><td>ratas Dieta para roedores con 45 kcal% de grasa</td><td>Dietas de investigación</td><td>D12451</td><td>45% de grasa alimento</td>para</tr><tr><td>ratas Comederos para ratas (3.75"W x 2.875"D x 5.25"H)</td><td>Labex de MA</td><td>2528</td><td>Tolvas de alimentos</td></tr></tbody></table>

preferencia grasa: un modelo de novela de la conducta alimentaria en ratas

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

La obesidad es un problema creciente en los Estados Unidos de América, con más de un tercio de la población clasificados como obesos. Un factor que contribuye a este trastorno multifactorial es el consumo de una dieta alta en grasas, un comportamiento que se ha demostrado que aumenta tanto la ingesta de calorías y el contenido de grasa corporal. Sin embargo, los elementos que regulan la preferencia por la comida rica en grasas sobre otros alimentos permanecen poco estudiados. Para superar este déficit, un modelo para probar rápidamente y fácilmente los cambios en la preferencia por la grasa de la dieta fue desarrollado. El modelo Preferencia Fat presenta ratas con una serie de opciones entre los alimentos con diferente contenido de grasa. Como los humanos, las ratas tienen un sesgo natural hacia el consumo de alimentos con alto contenido de grasa, por lo que el modelo de rata ideal para los estudios de traducción. Los cambios en las preferencias se pueden atribuir al efecto de cualquiera de las diferencias genéticas o intervenciones farmacológicas. Este modelo permite la exploración de los determinantes de la preferencia por la grasa y scremiento agentes farmacoterapéuticos que la adquisición de influencia de la obesidad.

Las ratas tuvieron acceso físico a las dos tolvas de alimentos al mismo tiempo (Figura 1) con el fin de demostrar su preferencia por la elección de alimentos disponibles con diferente contenido en grasa (Tabla 1). Comida de rata se pesó diariamente y cualquier derrame de alimentos se encuentra fácilmente y representó (Figura 2). El derrame de finas partículas de alimentos se encontró que era mínimo y no influye sustancialmente los datos. Usando el modelo de Preferencia ...

Influencias contenido de grasa en la dieta, tanto la ingesta de energía y la composición de la grasa corporal en los mamíferos. Mediante el examen de la preferencia de las ratas por la comida rica en grasas en una serie de experimentos de elección, es posible poner a prueba las diferencias genéticas y las intervenciones farmacológicas en su preferencia por la comida rica en grasas.

Preferencia grasa: Un Modelo de Novela de la conducta alimentaria en ratas

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

El objetivo general de este procedimiento es evaluar los efectos de la manipulación genética y farmacológica sobre la preferencia por la grasa dietética, que es un factor clave subyacente al consumo excesivo de alimentos y a la obesidad. Esto se logra primero llenando los depósitos A y B con alimento al 10 % de grasa y midiendo el consumo de alimento 24 horas después. El segundo paso consiste en intercambiar las posiciones de los depósitos A y B y pesarlos nuevamente al día siguiente para determinar el sesgo basal de posición durante la alimentación.A continuación, se puede determinar la preferencia por grasa repitiendo los pasos anteriores varias veces con alimentos de 12 puntos, mitad y porcentajes superiores de grasa. El paso final consiste en calcular la puntuación de preferencia dividiendo los gramos ingeridos de la dieta más rica en grasa entre el alimento total consumido de ambas dietas. En última instancia, el modelo de preferencia por grasa se utiliza para mostrar cómo las manipulaciones experimentales pueden modificar la preferencia de las ratas por alimentos ricos en grasa.Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la obesidad, como qué vías en el cerebro median el comportamiento de alimentación con alta grasa. Esta técnica puede extenderse hacia el desarrollo de terapias para tratar la obesidad y los trastornos alimentarios en particular, porque podemos reducir selectivamente la ingesta de alimentos ricos en grasa y azúcar. Para el siguiente protocolo, ratas macho spra dolly se mantienen individualmente y bajo un ciclo de 12 horas de luz y oscuridad.Construya el comedero con un alimento bajo en grasa y acostumbre a las ratas al alimento y a la sala de colonia durante al menos siete días antes del experimento, durante cada uno de los tres días previos a la toma de mediciones basales. Manipule cada animal de prueba para reducir el estrés y adminístreles el vehículo para familiarizarlos con el proceso de administración, si es necesario. Para comenzar el estudio en el día uno, llene dos comederos limpios con alimento que contenga 10% de grasa, y etiquételos como comederos A y B. Pese los comederos llenos y colóquelos en la jaula asegurándose de que la rata tenga acceso a ambos.Permita que la rata coma libremente de ambos comederos durante 24 horas al día siguiente. Aproximadamente a la misma hora, registre el peso de ambos comederos. Examine siempre la jaula de alojamiento en busca de alimento que haya sido retirado del comedero.Si se encuentra comida derramada, pésela junto con el resto de la comida. Devuelva los comederos a la jaula, pero intercambie las posiciones del comedero A y el B para mitigar el sesgo de posición. Al tercer día, registre los pesos de los comederos como antes.Examine la cantidad de alimento consumido en cada posición del comedero para obtener una comprensión básica del sesgo de posición. Después de recopilar las mediciones basales, obtenga dos comederos limpios y llene el comedero A con alimento que contenga 12.5% de grasa, y el comedero B con alimento de 15% de grasa. Después de registrar los pesos iniciales de cada comedero, colóquelos ambos en la jaula al día siguiente.Registre los pesos de cada tolva como se demostró anteriormente e intercambie sus posiciones al colocarlas nuevamente en la jaula. En el quinto día, registre los pesos de cada tolva para determinar los gramos de alimento consumidos y determine la preferencia alimentaria de la rata.Los pasos anteriores pueden repetirse varias veces con los mismos animales utilizando alimentos con niveles crecientes de contenido de grasa. Para calcular la ingesta diaria de alimento de cada animal, reste la masa final del alimento más el comedero de la masa inicial. Dado que cada alimento se mide durante dos días, el total de los dos días puede sumarse para cada grupo.A continuación, calcule la puntuación de preferencia por grasa dividiendo el consumo del alimento con mayor contenido de grasa entre el alimento total ingerido durante cada período de dos días. Para expresar la puntuación de preferencia y el consumo total de alimento en función de la ingesta energética total y la densidad energética, se utiliza una tabla. Las ratas muestran una preferencia creciente por alimentos con mayor contenido de grasa; la preferencia por alimentos con 15%, 17,5%, 20% y 45% de grasa es significativamente mayor en comparación con el alimento con 12,5% de grasa. El método de preferencia por grasa produce una curva de efecto dosis-respuesta en la que la preferencia varía según el contenido de grasa en comparación con el alimento con 12,5% de grasa. Aquí, la preferencia por el alimento con mayor contenido de grasa se expresa en gramos de alimento consumido, proporcionando información adicional sobre los cambios en el consumo total de alimento a lo largo del experimento.Al analizarse los niveles de ingesta de energía, los datos muestran que las ratas consumen más calorías provenientes de alimentos con mayor contenido de grasa durante las pruebas de preferencia, dependiendo del porcentaje de grasa de los alimentos ofrecidos. Esta técnica allana el camino para que los investigadores en el campo de las enfermedades metabólicas exploren el complejo fenómeno conductual que subyace a nuestra preferencia por ciertos tipos de alimentos ricos en grasas y azúcares, como papas fritas, hamburguesas y galletas. Una vez dominada, esta técnica puede realizarse en 40 minutos por día durante 10 días.

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Investigación

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Comportamiento

El presente informe detalla el protocolo empleado para medir los efectos de recompensa de alimentos altos en grasa en ratones mediante una tarea progresiva relación de condicionamiento operante.

Progresista-relación de respuesta de alimento sabroso de alta en grasa y azúcar en ratones

El presente estudio evalúa un nuevo procedimiento para la evaluación de los efectos reforzantes de soluciones de sabor agradable en ratas de laboratorio: la auto-administración intraoral. Para este fin, en respuesta operante (es decir, palanca de presión) para las infusiones intraorales de soluciones dulces a diferentes concentraciones se midió sobre los coeficientes de continua y progresiva programas de refuerzo.

Un nuevo procedimiento para la evaluación de las propiedades reforzantes de estimulantes del gusto en las ratas de laboratorio: operante intraoral autoadministración

Aquí presentamos un protocolo para inducir anorexia basada en la actividad (ABA) en ratones adolescentes hembras. El ABA es una condición de hiperactividad provocada por la imposición de restricciones alimentarias a roedores con acceso a una rueda para correr. Este fenómeno se está utilizando como modelo para estudiar la neurobiología subyacente de la anorexia nerviosa.

Utilizando la anorexia Roedor modelo basado en actividades para el Estudio de las bases neurobiológicas de la anorexia nerviosa

El objetivo de este estudio es identificar las redes cerebrales relacionadas con la recompensa distribuidos por delinear una técnica fiable inmunohistoquímico mediante la activación celular de c-fos para medir los cambios simultáneos en las vías de la dopamina y sitios de terminal después de la novela de la ingestión de grasa y azúcar en ratas.

Detección simultánea de c-Fos activación de sitios de recompensa dopaminérgico mesolímbico y mesocortical Siguiendo Naive La ingestión de azúcar y grasa en ratas

Aquí, presentamos un protocolo para introducir un modelo de rata de la fatiga central mediante la modificación del método de plataforma múltiples (MMPM).

Modelo de una rata de la fatiga Central mediante la método de plataforma múltiple

Ratones alojados individualmente con una rueda de funcionamiento mientras que dado el acceso limitado a alimentos desarrollan reducciones en consumo de alimentos y aumentan la actividad en la corriente de la rueda. Este fenómeno experimental se llama anorexia basada en actividad. Este paradigma proporciona una herramienta experimental para el estudio de la neurobiología y comportamientos subyacen aspectos de la anorexia nerviosa.

Evaluación de Anorexia basada en actividad en ratones

Este modelo de conflicto se utiliza para medir el deterioro del control inhibitorio después de exposición a drogas adictivas, u otros factores que influyen en control inhibitorio. Un estímulo sexual y un obstáculo aversivo se presentan simultáneamente, así las ratas macho tienen que vencer el obstáculo para acercarse a la recompensa sexual.

Un modelo de conflicto de comportamiento de búsqueda de recompensa en las ratas macho

Este protocolo describe el uso de una dieta de cafetería de estilo occidental altamente apetecible para modelar la alimentación excesiva y la obesidad en roedores. Aquí, proporcionamos un esquema detallado de la selección, preparación y medición de alimentos, y explicamos factores metodológicos que ayudan a generar un fenotipo robusto y reproducible.

Dieta de cafetería de estilo occidental palatable como un método confiable para modelar la obesidad inducida por la dieta en roedores

Aquí se presenta un protocolo para estudiar el comportamiento anhedónico y similar a la depresión en ratas. Combina dos métodos de comportamiento bien establecidos, la preferencia de sacarosa y las pruebas de hipofagia inducidas por la novedad, con un sistema automatizado de monitoreo de ingesta de alimentos y líquidos, para investigar indirectamente el comportamiento de los roedores utilizando parámetros suplentes.

Pruebas de hipofagia inducida por la sacarosa y la novedad en ratas utilizando un sistema automatizado de monitoreo de la ingesta de alimentos

Presentamos un protocolo para un ensayo de alimentación de dos opciones para moscas. Este ensayo de alimentación es rápido y fácil de ejecutar y es adecuado no sólo para la investigación de laboratorio a pequeña escala, sino también para pantallas de comportamiento de alto rendimiento en moscas.

Un ensayo rápido de preferencia alimentaria en Drosophila

Se estableció un modelo de atracones en ratones utilizando el acceso intermitente a M&amp;M's (un alimento altamente palatable hecho de grasa y azúcar). Los ratones con acceso intermitente a este alimento rico en grasas y azúcares mostraron comportamientos similares al estrés, una mayor ingesta calórica y una preferencia por ese alimento sobre la comida estándar en comparación con los ratones con acceso continuo o nulo a la comida.

Modelo de ingesta de atracones intermitentes en ratones

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