El uso de proteínas fluorescentes de Seguimiento glicosoma Dinámica en el tripanosoma africano

El objetivo general del siguiente experimento es observar los cambios en tiempo real en la composición de gliconucleosis en células vivas. Esto se logra mediante la expresión de una proteína fluorescente fusionada con una secuencia de diana Pero Somal PTs dos. La proteína de fusión se importa a las zonas glicológicas maduras, que se convierten en orgánulos fluorescentes.

La degradación y el reciclaje conducen a una pérdida de fluorescencia que se puede monitorear a través de flujo. Las células de citometría se exponen a diferentes condiciones ambientales para identificar los factores que desencadenan la remodelación del glico. Los resultados muestran que la composición del glico varía en respuesta a los cambios ambientales basados en los cambios en la fluorescencia celular al paso de las células de medios pobres en nutrientes a medios ricos en nutrientes. Por lo tanto, la principal ventaja de esta técnica sobre los métodos existentes, como la microscopía electrónica y la microscopía de fluorescencia, es que permite el análisis en tiempo real de miles de células.