Name: El trasplante de la cola de la piel para el Estudio alogénico de células T CD4 respuestas en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: Aprende el trasplante de piel de cola en ratones para estudiar el rechazo mediado por células T CD4 y la inducción de tolerancia. Este modelo permite monitorear respuestas inmunitarias alogénicas sin sacrificar al animal receptor.

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Este trabajo fue apoyado por las subvenciones de SNF PPOOA-_119204 y PPOOP3_144918 a S.W.R. Agradecemos a E. Palmer y B.T.H. Hausmann por los ratones y la experiencia técnica.

En esta publicación, el vídeo y el protocolo, se llevaron a cabo todos los procedimientos con animales de acuerdo con el protocolo de los animales aprobado por la autoridad cantonal de Basilea-Ciudad, Suiza. Realice todos los procedimientos en condiciones de esterilidad, cuando sea posible. 1. Preparación de Cirugía <ol><li> Autoclave todos los instrumentos quirúrgicos y gasas antes de su uso. </li><li> Calentar la almohadilla caliente y organizar los instrumentos quirúrgicos en la tabla (Tabla de Materiales / Métodos). </li><li> Abra las vendas de la tira dedo. Aplique vaselina en la plataforma de la herida con un algodón (asegúrese de que la gasa se cubre totalmente). </li><li> Pesar los ratones y administrar analgesia buprenorfina 0,05 mg / kg de peso corporal. Nota: esto proporcionará analgesia inmediatamente después del trasplante. </li></ol> 2. Preparación de la cola de la piel para el Trasplante <ol><li> La eutanasia a los ratones donantes (por ejemplo, IA) BM12, los cuales por asfixia de CO 2 y disinfect las colas con solución de desinfección antes de la escisión. </li><li> Coloque la cola con la franja negro sobre una placa de plástico limpio y cortado longitudinalmente a lo largo de la línea media, haciendo una incisión superficial que afecta sólo la capa de piel. </li><li> Retirar la piel de la cola utilizando pinzas de agarre. </li><li> Ponga la cola de la piel en una placa de cultivo de 10 cm celda llena con 10 ml de HBSS. </li></ol> 3. Procedimiento Quirúrgico <ol><li> Anestesie ratones receptores (por ejemplo, ratones C57BL / 6) por inhalación de una solución de isofluorano 3% en una caja de inducción transparente. Nota: Se necesita 3-5 minutos para el ratón para llegar a la anestesia plano quirúrgico. Use ungüento veterinario en los ojos para evitar la sequedad, mientras que bajo anestesia. </li><li> Coloca el ratón sobre la almohadilla tibia y aplicar el 1,5% isofluorane través de una mascarilla boca y el culo cada reflejo animal toe pellizcos. </li><li> Afeitar el sitio dorsal de los ratones receptores (por ejemplo, C57BL / 6) y quitar los pelos contaminantes utilizando un sw gasa secaab. </li><li> Desinfectar sitio trasplante afeitado con solución aséptica. </li><li> Apriete la piel con unas pinzas en el sitio central / derecha del dorso y el uso de tijeras curvas para hacer una incisión alrededor de alrededor de 1 x 0,6 cm. </li><li> Si se produce una hemorragia, luego limpiar la herida con un hisopo de algodón estéril. </li><li> Evaluar el tamaño de la incisión y cortar un trasplante de el tamaño estimado de la cola-piel utilizando el bisturí. </li><li> Recorte esquinas para redondear el trasplante. </li><li> Cargue el trasplante en el bisturí, el exceso seca de HBSS en un hisopo de algodón estéril y lo coloca en el lecho del injerto del ratón receptor. </li><li> Evitar la superposición de los donantes y de la piel de acogida y aplicar adhesivo tisular en la zona de contacto de forma exclusiva. </li><li> Aplicar un yeso sin arrugas alrededor de la cintura del ratón. </li><li> Aplicar el adhesivo vendaje no elástico para fijar el yeso para el ratón (3 mm desplazado). </li><li> Una incisión con las tijeras alrededor de 3 mm en el sitio ventral superior del vendaje. Nota: Esto es para evitar trapping de los dientes del ratón durante la fase de recuperación. </li><li> Retire la anestesia boca máscara y mantener a los ratones trasplantados en la almohadilla caliente hasta que despierto. </li><li> Volver ratones trasplantados a sus jaulas sólo cuando esté completamente recuperado y evaluar su movilidad para asegurarse de que el vendaje no está demasiado ajustado. </li><li> Esterilizar todos los instrumentos quirúrgicos con etanol al 70% antes de proceder con la cirugía siguiente. </li></ol> 4. Cuidado post-operatorio <ol><li> Añadir jarabe que contiene paracetamol al agua de bebida (4 mg / ml) y administrarlo durante 7 días. </li><li> Ratón Regresar a la sala de los animales una vez que se haya recuperado. </li><li> Seguir de cerca los ratones en busca de signos clínicos como la depresión u otros cambios de comportamiento (comer o inmovilidad), aspecto anormal (falta de aseo personal) o la postura (pilo-erección o postura encorvada) durante el tiempo que el vendaje está en su lugar (1 semana). </li></ol> 5. Eliminación del vendaje (6-7 días post-trasplante) <ol><li> Anesthetize los ratones por inhalación de una solución de isofluorano 3% en una caja de inducción transparente (véase más arriba). </li><li> Cortar el vendaje y el yeso con unas tijeras de la arteria y cuidadosamente eliminarlos. Nota: evitar el estiramiento del sitio de trasplante. </li><li> Monitorear los ratones trasplantados en busca de signos clínicos (ver 4.3) y la puntuación para el rechazo de los injertos de piel (Tabla 1). Nota: El sistema de puntuación de injerto se aprovecha de las diferentes texturas de pelo en la cola de la piel en comparación con el dorsal de la piel. La aparición del trasplante y su rechazo se clasifica en 3 grados. Piel alogénico (MHC II no coinciden, por ejemplo, IA BM12) injertos de C57BL / 6 ratones inmunocompetentes son generalmente rechazados dentro de 12 a 15 días después del trasplante (datos propios y 15-20). </li></ol>

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<li>Rosenberg, A. S., Finbloom, D. S., Maniero, T. G., Vander Meide, P. H., Singer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+prolongation+of+MHC+class+II+disparate+skin+allografts+by+in+vivo+administration+of+anti-IFN-gamma+monoclonal+antibody%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+immunology%22%5BJournal%5D)">Specific prolongation of MHC class II disparate skin allografts by in vivo administration of anti-IFN-gamma monoclonal antibody.</a> Journal of immunology. 144 (12), 4648-4650 (1950).</li>
<li>Goes, N., Sims, T., Urmson, J., Vincent, D., Ramassar, V., Halloran, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disturbed+MHC+regulation+in+the+IFN-gamma+knockout+mouse.+Evidence+for+three+states+of+MHC+expression+with+distinct+roles+for+IFN-gamma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+immunology%22%5BJournal%5D)">Disturbed MHC regulation in the IFN-gamma knockout mouse. Evidence for three states of MHC expression with distinct roles for IFN-gamma.</a> Journal of immunology. 155 (10), 4559-4566 (1995).</li>
<li>Surquin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-4+deficiency+prevents+eosinophilic+rejection+and+uncovers+a+role+for+neutrophils+in+the+rejection+of+MHC+class+II+disparate+skin+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">IL-4 deficiency prevents eosinophilic rejection and uncovers a role for neutrophils in the rejection of MHC class II disparate skin grafts.</a> Transplantation. 80 (10), 1485-1492 (2005).</li>
<li>Gaylo, A. E., Laux, K. S., Batzel, E. J., Berg, M. E., Field, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+rejection+of+MHC+class+II-disparate+skin+allografts+in+mice+treated+with+farnesyltransferase+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+immunology%22%5BJournal%5D)">Delayed rejection of MHC class II-disparate skin allografts in mice treated with farnesyltransferase inhibitors.</a> Transplant immunology. 20 (3), 163-170 (2009).</li>
<li>Bose, A., Inoue, Y., Kokko, K. E., Lakkis, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutting+edge%3A+perforin+down-regulates+CD4+and+CD8+T+cell-mediated+immune+responses+to+a+transplanted+organ%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+immunology%22%5BJournal%5D)">Cutting edge: perforin down-regulates CD4 and CD8 T cell-mediated immune responses to a transplanted organ.</a> Journal of immunology. 170 (4), 1611-1614 (2003).</li>
</ol>

Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.

Trasplante de la piel es un método ampliamente utilizado para el estudio de rechazo y dependiente de las células T de la tolerancia. Desde que se estableció el modelo de trasplante de piel, se han aplicado varias adaptaciones y cambios. En el procedimiento descrito, IA BM12 trasplante de cola de piel se realiza con gas anestésico (isofluorano). El uso de la anestesia con gas reduce el tiempo de ejecución y la recuperación de los ratones, lo que disminuye la presión sobre los ratones trasplantados. El procedim...

El trasplante de órganos sólidos, como la piel, el corazón y los riñones es ahora un procedimiento estándar en la práctica médica en todo el mundo 1. Órganos trasplantados con éxito pueden ser rechazadas por la activación del sistema inmune receptor, que reconoce los antígenos principales de histocompatibilidad del donante. Por lo tanto los pacientes transplantados necesitan tratamiento con medicamentos inmunosupresores 2. El trasplante alogénico de piel en ratones fue establecido por Medawar y sus colegas en 1955 y ha sido útil para la identificación de las moléculas específicas que se describen más adelante como complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase I y II. Desde entonces, el modelo de trasplante de piel ha sido modificado y adaptado para estudiar el papel de los subconjuntos de células T y la relevancia de la química y la intervención biológica en la supresión de rechazo de injertos 2-4 continuamente. La piel de la oreja y el tronco son más difíciles de preparar y son más susceptibles a la hipoxia y la necrosis de la piel de la cola-5; Sin embargo,el procedimiento de trasplante es similar. Además, el seguimiento de trasplantes de cola de la piel es fácil debido a la textura del cabello característico de la piel. Este artículo proporciona un procedimiento detallado de MHC de clase II desajuste trasplante de cola de la piel que permite el estudio de los diferentes aspectos de la T CD4 + rechazo de aloinjertos mediada por células y la tolerancia en ratones. La mutación natural de tres puntos en la molécula de MHC clase II IA B (llamado IA BM12) 6-9 es suficiente para inducir el rechazo de aloinjertos de piel en ratones C57BL / 6 8. La molécula de BM12 IA activa las células T CD4 + con diferentes receptor de células αβ-T (TCR) cadenas de ratones C57BL / 6, entre las que se identificaron las células T Vα2Vβ8-TCR-específicas con el fin de generar un ratón transgénico TCR-10. La transferencia adoptiva de células-TCR-específicos Vα2Vβ8 T se ha usado para establecer un modelo de rechazo en C57B inmunodeficienteL / 6 Rag2 - / - ratones transplantados con la piel IA BM12. Las diferencias genéticas entre el donante y el receptor afectan el resultado de la aceptación y el rechazo de trasplante. Hay diferentes tipos de trasplantes: autoinjertos son los trasplantes de la persona beneficiaria misma; syngrafts y aloinjertos son los trasplantes de individuos genéticamente idénticos y no relacionados genéticamente, respectivamente. Aceptación de diferentes trasplantes de órganos alogénicos se ha demostrado por la intervención química y biológica en pacientes y modelos de ratón 11,3,4. En un enfoque básico, anti-CD3 tratados C57BL / 6 ratones mostraron una supervivencia prolongada de IA BM12 cola-piel (datos no publicados). El agotamiento de los CD4 + y CD8 + T las células antes del trasplante en ratones receptores resultó en la aceptación de MHC de clase I y II injertos no coincidentes (Apocalipsis en el 12). Curiosamente, el rechazo de injertos de piel depende de la presencia de células CD4 + </sup&gt; Células T (rev. en 12). En este modelo, la orientación interacciones específicas entre diferentes células inmunes mediante el bloqueo de las moléculas coestimuladoras con anticuerpos o supresión con células T reguladoras podría inducir tolerancia (datos no publicados). De hecho, el bloqueo de ambos CD40 y CD28 dio lugar a la tolerancia 13,14 aloinjerto de piel a largo plazo. Trasplante de Cola-piel es fácil de realizar y fácil de controlar en comparación con el trasplante de otros órganos. Además, los trasplantes de cola de la piel son fáciles de preparar y son menos susceptibles a la isquemia de otros tejidos de la piel. En contraste a los anestésicos inyectados, el uso de gas anestésico (isofluorano) durante el trasplante acorta tanto el procedimiento y el tiempo de recuperación destinatario. Curling del trasplante de cola de la piel, que puede conducir a la cicatrización de heridas incompleta y el rechazo del injerto, se evita mediante la aplicación de adhesivo de tejido. Además, el modelo de trasplante de piel de la cola-IA BM12 activa exclusivamente CD4 <sup&gt; + Células T, tanto inmunocompetentes como ratones inmunodeficientes (de los mismos antecedentes genéticos) facilitar la interpretación de los resultados. Este protocolo describe un modelo de ratón fiable, reproducible y fácilmente controlables que permite la intervención química y biológica. El modelo está diseñado para investigar el rechazo y la tolerancia a la inducción de los trasplantes de cola de la piel.

<table><tbody><tr><td>Betadine solución estándar</td><td>Mundipharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hisopo de algodón</td><td>Carl Roth GmbH</td><td>31025060</td><td></td></tr><tr><td>Dafalgan , UPSA</td><td>Bristol Myers Squibb UPSA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tiras de dedo Hansaplast</td><td>Beierdorf AG</td><td>REF.76861</td><td></td></tr><tr><td>Histoacryl adhesivo para tejidos</td><td>Braun</td><td>REF.1050052</td><td></td></tr><tr><td>Leukotape classic , 2 cm x 10 m</td><td>BSN Medical SAS</td><td>REF.02204-00</td><td></td></tr><tr><td>PBS, Solución salina tamponada con fosfato, pH 7,4</td><td>Invitrogen</td><td>10010015</td><td>GIBCO</td></tr><tr><td>Gasa estéril, 5 x 5 cm, 8 capas</td><td>MaiMed GmbH</td><td>21010</td><td></td></tr><tr><td>Pinza de patrón estrecho</td><td>FST</td><td>11003-12</td><td></td></tr><tr><td>Tijera de iris fina curvada</td><td>FST</td><td>14095-11</td><td></td></tr><tr><td>Tijera de iris</td><td>fina FST</td><td>14094-11</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de mayonesa</td><td>FST</td><td>14010-15</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de arteria punta de bola 11,5 cm</td><td>FST</td><td>14080-11</td><td></td></tr><tr><td>Pinza de tejido</td><td>FST</td><td>11021-14</td><td></td></tr><tr><td>Cuchilla quirúrgica n.º 20</td><td>Swann-Morton LTD</td><td>3006</td><td>Acero al carbono</td></tr><tr><td>Mangos de cuchilla quirúrgica</td><td>Swann-Morton LTD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Jeringa, 1 ml</td><td>ARTSANA</td><td></td><td>Temgesic Desechable</td></tr><tr><td>, buprenorfina</td><td>ESSEX Chemie AG</td><td></td><td>0,3 mg/ml</td></tr><tr><td>Placas de cultivo de tejidos 10 cm, 60,1 cm2</td><td>TPP</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vaselina</td><td>Vifor SA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Almohadilla caliente</td><td>Solis</td><td></td><td>Tipo 223</td></tr></tbody></table>

el trasplante de la cola de la piel para el estudio alogénico de células t cd4 respuestas en ratones

Transplantation of Tail Skin to Study Allogeneic CD4 T Cell Responses in Mice

El estudio de las respuestas de los linfocitos T y sus consecuencias durante el reconocimiento de aloantígenos requiere un modelo que permita distinguir entre linfocitos T donantes y huéspedes, monitorizar fácilmente el injerto y adaptar el sistema para responder a diferentes preguntas inmunológicas. Medawar y sus colegas establecieron el trasplante alogénico de piel de cola en ratones en 1955. Desde entonces, el modelo de trasplante de piel se ha modificado y adaptado continuamente para responder a preguntas específicas. El uso de la piel de la cola hace que este modelo sea fácil de puntuar para el rechazo del injerto, no requiere una preparación extensa ni anestesia profunda, es aplicable a animales de todos los antecedentes genéticos, desalienta la necrosis isquémica y permite la intervención química y biológica. 
En general, tanto los linfocitos T alogénicos CD4+ como los CD8+ son responsables del rechazo de los aloinjertos, ya que reconocen antígenos principales de histocompatibilidad no coincidentes de diferentes cepas de ratones. Se han descrito varios modelos para la activación de células T alogénicas en ratones trasplantados con piel. La identificación de moléculas de clase I y II del complejo principal de histocompatibilidad (MHC) en diferentes cepas de ratones, incluidos los ratones C57BL/6, fue un paso importante hacia la comprensión y el estudio de las alorespuestas mediadas por células T. En el modelo de trasplante de piel de cola descrito aquí, una mutación de tres puntos (I-Abm12) en el surco presentador de antígeno de la molécula MHC-clase II (I-A b) es suficiente para inducir una fuerte activación alogénica de las células T CD4+ en ratones C57BL/6. Los injertos de piel de ratones I-Abm12 en ratones C57BL/6 se rechazan en un plazo de 12 a 15 días, mientras que los injertos singénicos se aceptan durante un máximo de 100 días. La ausencia de linfocitos T (ratones CD3-/- y Rag2-/-) permite la aceptación del injerto de piel hasta 100 días, que puede superarse mediante la transferencia de 2 x 104 linfocitos T de tipo salvaje o transgénicos. Las células T transferidas adoptivamente proliferan y producen IFN-γ en ratones Rag2-/- trasplantados con i-Abm12.

En una primera aproximación C57BL / 6 ratones fueron trasplantados con aloinjertos BM12, los cuales IA y b syngrafts IA. Después de retirar el vendaje, injertos signos manifiestos de la cicatrización de heridas y sin cierre de la zona de contacto en C57BL / 6 ratones (Figura 1A). Después de la retirada del vendaje, CD4 + T inflamación mediada por células condujo a la aparición de áreas necróticas (manchas rojas) y el rechazo de aloinjertos BM12, los cuales IA ...

El trasplante de piel de cola es un poderoso modelo para estudiar el rechazo dependiente de las células T y la inducción de tolerancia durante las respuestas inmunes alogénicas en ratones. Las ventajas de este protocolo son la cirugía invasiva menor y la facilidad de seguimiento sin necesidad de sacrificar el ratón receptor.

El trasplante de la cola de la piel para el Estudio alogénico de células T CD4 respuestas en ratones

The study of T cell responses and their consequences during allo-antigen recognition requires a model that enables one to distinguish between donor and ...

El objetivo general del siguiente procedimiento es realizar un trasplante de piel de cola. Para estudiar el rechazo mediado por linfocitos T o la inducción de tolerancia en un modelo murino, esto se logra primero obteniendo la piel de la cola de un ratón donante. En el segundo paso, se prepara el sitio de trasplante en el animal receptor.A continuación, en el paso final, el injerto se trasplanta y fija con adhesivo tisular y un vendaje. El vendaje se retira el día siete tras el trasplante y se evalúa el injerto. En última instancia, puede estudiarse la respuesta aloinmune mediada por linfocitos T.Esta técnica de trasplante de piel de cola proporciona un modelo potente para estudiar el rechazo dependiente de linfocitos T y la inducción de tolerancia durante las respuestas inmunitarias alogénicas en ratones. Antes de comenzar el procedimiento, abra las vendas adhesivas para dedos y aplique vaselina sobre las almohadillas para heridas con un hisopo de algodón, asegurándose de que la gasa quede completamente cubierta. A continuación, desinfecte la cola de un ratón donante sacrificado con solución desinfectante.Luego, coloque la cola sobre una placa de plástico limpia. Gire la franja negra superior hacia abajo y realice una incisión superficial longitudinal a través de la piel a lo largo de la línea media de la cola. Utilice pinzas de sujeción para retirar la piel y luego coloque el tejido en una placa de cultivo celular de 10 centímetros llena con 10 mililitros de HBSS.Afeite el área dorsal de un ratón receptor anestesiado y utilice un trozo seco de gasa para eliminar cualquier pelo contaminante. Después de desinfectar el sitio de trasplante afeitado con una solución aséptica, pellizque la piel con pinzas en el lado derecho medio del dorso y use tijeras curvas para hacer una incisión redonda de aproximadamente uno por 0,6 centímetros de diámetro. A continuación, use un bisturí para cortar un injerto de la piel de la cola del donante extirpada, recorte las esquinas para redondear el tejido, coloque el injerto sobre el bisturí y absorba el exceso de HBSS con un hisopo estéril.Luego, coloque el tejido seco sobre la cama del injerto del ratón receptor. Evite superponer la piel del donante y del huésped, aplicando adhesivo tisular únicamente en la zona de contacto. A continuación, envuelva una venda sin pliegues alrededor del abdomen del ratón y aplique una venda adhesiva no elástica para fijar la venda al ratón, evitando que el ratón enganche sus dientes en la venda.Durante la recuperación, realice una incisión de tres milímetros en el lado ventral superior del material. Después de una recuperación completa sobre una almohadilla térmica calentada, devuelva el animal trasplantado a su jaula y evalúe su movilidad. Para asegurarse de que el vendaje no esté demasiado apretado, trate al ratón con jarabe de paracetamol en el agua del animal durante siete días.Después de seis a siete días, utilice tijeras arteriales estériles para cortar y retirar cuidadosamente las vendas, teniendo cuidado de evitar estirar el sitio del trasplante. Finalmente, supervise a los ratones trasplantados en busca de signos clínicos y puntúe el rechazo de los injertos de piel. En este experimento, ratones C57BL/6 recibieron injertos alogénicos IABM12 e injertos IAB sin.Tras retirar los vendajes, el injerto mostró signos de cicatrización sin cierre de la zona de contacto en los ratones C57BL/6. Una a dos semanas después, una inflamación mediada por linfocitos T positivos para CD4 dio lugar a la aparición de áreas necróticas dentro del injerto. Se observó el rechazo de los injertos alogénicos IA BM12 en los ratones C57BL/6 dentro de los 13 días posteriores al trasplante.Aunque los injertos sín fueron tolerados durante hasta 100 días. El rechazo de la piel de colas no coincidentes en el MHC clase dos depende de la presencia de linfocitos T positivos para CD cuatro alogénicos. Por ejemplo, los ratones deficientes en linfocitos T, knockout para CD tres E, y los ratones deficientes en linfocitos T y B, knockout para RAG dos, muestran curación completa de la herida y toleran los injertos I a BM 12 durante hasta 100 días.La aceptación del injerto de piel de cola incompatible IABM 12 permite el estudio de linfocitos T CD4 positivos alogénicos y sus funciones efectoras en un modelo murino sin patologías graves de enfermedad. La ventaja de este modelo de trasplante de piel de cola es que el análisis funcional de los linfocitos T CD4 positivos puede realizarse fácilmente mediante la transferencia adoptiva de linfocitos T CD4 positivos específicos para antígeno. En este experimento representativo, la transferencia de dos veces 10 a la cuarta células A BM transgénicas específicas para antígeno fue suficiente para inducir el rechazo de injertos IABM 12 en ratones knockout rag2 dentro de los 13 días. Se observó que las células A BM que expresan las cadenas del TCR V alfa 2 V beta 8 proliferaron extensamente mediante el ensayo de dilución EFL 670 y produjeron IFN gamma tras la estimulación con PMA. En conjunto.Estos datos demuestran que solo se requieren unas pocas células T CD cuatro positivas alogénicas para rechazar injertos de piel uno A BM 12, lo que convierte este modelo en ideal para el análisis de células T alogénicas en ausencia de una patología grave. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo realizar el trasplante de piel de cola y monitorear con éxito el rechazo del injerto.

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