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DOI: 10.3791/51835-v
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Se describe una técnica para estudiar las células NG2 y los oligodendrocitos utilizando un sistema de cultivo en cortes del prosencéfalo y el cerebelo. Este método permite examinar la dinámica de proliferación y diferenciación de las células dentro del linaje de oligodendrocitos, donde el entorno extracelular puede manipularse fácilmente mientras se mantiene la citoarquitectura tisular.
El objetivo general de este procedimiento es investigar la proliferación y diferenciación de las células del linaje de oligodendrocitos en un entorno que se asemeja mucho a lo que se encuentra in vivo. Esto se logra preparando primero cultivos de cuatro rebanadas de cerebro y cerebelo de ratones transgénicos postnatales tempranos. A continuación, se obtienen imágenes de las células individuales de los trozos durante períodos de horas a días para visualizar la dinámica celular de su proliferación y diferenciación.
Después de la obtención de imágenes, se utiliza la inmunohistoquímica post hoc de las células para determinar diversas características celulares. En última instancia, los resultados pueden mostrar la dinámica de la proliferación y diferenciación celular en condiciones normales y después de la manipulación farmacológica o genética. La principal ventaja de esta técnica sobre los métodos existentes como el carbón disociado, los cultivos de neuronas y las células de linaje de ligacitos es que los cultivos en rodajas permiten la manipulación del entorno acelular mientras se mantiene la arquitectura citográfica del tejido.
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