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DOI: 10.3791/52054-v
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Presentamos un método de preparación de mica apoyado bicapas lipídicas de microscopía de alta resolución. La mica es transparente y plana en una escala atómica, pero rara vez se utiliza en la formación de imágenes debido a dificultades de manejo; nuestra preparación resulta en la deposición uniforme de la hoja de mica, y reduce el material utilizado en la preparación bicapa.
El procedimiento presentado aquí muestra un método sencillo de preparación de lípidos soportados por MICA mediante capas adecuadas para la obtención de imágenes de alta resolución, como los estudios de seguimiento de una sola molécula. La superficie de MICA se prepara dividiendo un sándwich de una sola hoja de MICA pegada entre el portaobjetos de microscopio de vidrio y el cubreobjetos con adhesivo óptico que expone una superficie plana y extremadamente delgada de mica fresca. Al montar una pequeña cámara de plástico hecha de un vaso de vial de un mililitro y medio, el volumen de vesículas lipídicas necesarias para la formación de bicapas puede ser tan bajo como 30 microlitros.
Como primer paso, tome la lámina multicapa de MICA tal como viene del proveedor y córtela con unas tijeras en trozos más pequeños. Al folíolo en dos o tres folíolos más delgados con una hoja de cuchillo nueva. Ahora limpie bien la cubierta para dormir.
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