Name: Tomando ventaja de la reducción de la interacción de gotas en la superficie para optimizar el transporte de Bioanalytes en microfluídica digitales (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-11-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 57 s
Description: Aprende a fabricar dispositivos de deshumectación de campo para transportar bioanalitos sin aditivos mediante campos eléctricos. Este método optimiza la microfluídica digital para aplicaciones bioanalíticas avanzadas.

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Damos las gracias a la Fundación Lindbäck de apoyo financiero, y el Dr. Alexander Sidorenko y Elza Chu para un debate fructífero y asistencia técnica, y el profesor Robert Smith para obtener ayuda con la C. ensayos elegans.

NOTA: En los procedimientos que se describen a continuación, las pautas de seguridad de laboratorio siempre se deben seguir. De particular importancia es la seguridad cuando se trata de alto voltaje (&gt; 500 V) y manipulación de productos químicos. 1. Recubrimiento de un sustrato conductor con la vela hollín <ol><li> Cortar en rectángulos de metal de cobre (75 x 43 mm, 0,5 mm de espesor). Limpie cada sustrato de cobre por inmersión en solución de ataque de cobre durante unos 30 segundos, lavar con agua del grifo durante unos 20 segundos, y secar con papel. NOTA: Si se utiliza el método 1 a continuación, cambie las dimensiones de 75 x 25 mm para encajar en la máquina. </li><li> Barrer una vela de parafina iluminada bajo el substrato de cobre durante 30-45 segundos, para obtener un recubrimiento de hollín aproximadamente uniforme (alrededor de 40 m de espesor). Mantenga el sustrato a ~ 1 cm dentro de la llama. No toque la superficie de hollín frágil. </li></ol> 2. La protección de la capa de hollín con Recubrimiento NOTA: La capa de hollín es muy frágil, Y debe ser cubierto para la protección. Dos alternativas simples (métodos 1 y 2 a continuación) se sugieren aquí, pero los protocolos más robustos están actualmente en desarrollo. <ol><li> Método 1 <ol><li> Cargar la muestra en el evaporador de metal o sistema de pulverización catódica. Siguiendo los procedimientos de operación del sistema, evacuar la cámara y comenzar la deposición controlada de oro sobre la capa de hollín (150-200 nm). Deje que el dispositivo se enfríe a temperatura ambiente. </li><li> Dip-revestir el sustrato metalizado en una solución de 1-dodecanotiol (1% v / v, en etanol al 95%, grado ACS / USP), durante 10 minutos dentro de una campana química. Entonces, sostiene el dispositivo en un ángulo cercano a 60 °, lavar suavemente la superficie con varias gotas de etanol sólo. Deje que los dispositivos seca, durante la noche. </li></ol></li><li> Método 2 <ol><li> En una campana química, inmediatamente después de revestir el sustrato con hollín y mientras el sustrato está todavía caliente de la llama de la vela, depositar algunas gotas de líquido fluorado en un lado de lasustrato, e inclinar el sustrato a un ángulo próximo a 90 °. Deposite más gotas, y dejar que ellos ruedan sobre la superficie entera de hollín. NOTA: Cuando la gota cae en un punto, el hollín se lavará lejos de esa zona. Dejar que las gotitas de líquido fluorado propagación tanto como sea posible. </li><li> Hornear el sustrato sobre una placa caliente (160 ° C durante 15 min) dentro de una campana química. </li><li> Deje que el sustrato reposar toda la noche a temperatura ambiente antes de su uso. Almacenar indefinidamente. </li></ol></li></ol> 3. Fabricación de electrodos superiores (Adaptado de Abdelgawad et al. 12) <ol><li> Dibuje los electrodos utilizando software de diseño gráfico. Cada electrodo es de 2 mm de largo, 0,3 mm de ancho, y la brecha entre los electrodos es de 0,3 mm. La brecha entre los contactos (para encajar en el conector, ver más abajo) es de 2,3 mm (Figura 1). </li><li> Recorte un laminado flexible de cobre (35 micras de espesor) en el formato Monarch (3,87 x 7,5 pulgadas). Utilice otros tamaños if compatible con la impresora. Cargue el laminado en la bandeja de alimentación manual de una impresora a color. </li><li> Asegúrese de utilizar &quot;negro rico&quot;, o &quot;registro negro&quot;, cuando se imprime en la hoja de cobre (ver Abdelgawad et al. 12 para más detalles) para permitir que una capa más densa de tinta negro sobre el sustrato de cobre, protegiendo el patrón impreso durante el grabado . Deje secar completamente el sustrato impreso, durante la noche. </li><li> Dentro de una campana química, caliente (40 ° C) un vaso de precipitados con 50 ml de reactivo de ataque de cobre. Sumerja el laminado impreso en el vaso de precipitados, y agítelo suavemente en la solución durante unos 10 minutos. Tiempo de grabado depende de la solución de grabado de cobre. Cada pocos minutos, comprobar la corrosión y ver si el patrón está intacto. </li><li> Lave cuidadosamente la lámina con agua, y eliminar el recubrimiento con acetona y etanol en la campana química. Lavar una vez más, y seque con cuidado el laminado con una toalla de papel. </li><li> Conecte con cuidado el laminado con electrodos a un gladiapositiva ss (75 x 25 mm, ~ 1 mm de espesor), utilizando cinta de doble cara. Evite las bolsas de aire. </li><li> Adjunte una película de perfluoroalcoxi PFA a los electrodos utilizando cinta. Esto sirve para evitar el contacto accidental de los electrodos con la gota, que daña electrodos superiores debido a cortocircuito. </li></ol> 4. La interfaz electrónica (circuito de la Figura 2) <ol><li> Soldar los relés y los condensadores C a una placa de circuito universal. </li><li> Montar el resto de los controladores de relé 10 en un circuito sin soldadura para circuitos electrónicos. </li><li> Cable de entrada de cada conductor del relé a un canal en el tablero de control. </li><li> Romper con cuidado los electrodos superiores en un conector (Figura 3). Cada cable de salida del controlador de relés a un electrodo superior, como se muestra en la figura. Tenga en cuenta que hay un contacto del conector a tierra entre un par de cables de relés, para minimizar el ruido eléctrico. NOTA: El conector se asienta sobre una plataforma ajustable para controlar la tque la distancia (0,1-0,5 mm) entre el sustrato (hollín-revestido) superior e inferior. </li><li> Utilice un programa para controlar el tiempo para la aplicación de alta tensión (HV) (alrededor de 0,8 seg) para 4 electrodos al mismo tiempo, desplazando 1 electrodo en la dirección del movimiento (es decir, para 0,8 seg, 1234 accionar, a continuación, 2345, 3456, etc ., 0,8 seg para cada grupo, y luego hacia atrás, se mueve de modo de gotitas en la dirección opuesta también). </li></ol> 5. Visualización de la gotita y Manipulación <ol><li> Para grabar el movimiento de las gotas, utilizar el sistema de visualización, que se compone de un 24X - conjunto de magnificación 96X combinado con una cámara CCD. Conecte la grabadora de vídeo a la cámara mediante S-vídeo. </li><li> Pipetear una gota de 4 l que contiene C. elegans en los medios de comunicación en la parte inferior del sustrato recubierto de hollín. </li><li> Traiga los electrodos superiores a ~ 0,3 mm por encima de la gota. La gota debe estar cerca de la mitad, justo por debajo del quinto electrodo, para facilitar la operación. </li><li> Encienda la interfaz electrónica y alta tensión (500 V RMS), y ajustar la distancia de la parte superior del electrodo a la gota hasta que comienza a moverse. No deje que los electrodos superiores tocan la gota. </li><li> Recopilar datos mediante el registro del número de transferencias exitosas de gotitas en el dispositivo en respuesta a impulsos eléctricos. Un experimento exitoso se caracteriza por al menos 700 transferencias de gotitas, es decir, una transferencia después de cada pulso eléctrico. </li><li> Recopilar datos continuamente, hasta que la gota no se mueve más en respuesta a 5 a 10 pulsos. NOTA: Cuando la superficie comienza a degradarse, el movimiento podría ser restaurado por traer los mejores electrodos cerca de la gota. </li></ol>

<ol><li>Fair, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+microfluidics%3A+is+a+true+lab-on-a-chip+possible%5BTitle%5D)+AND+%22Microfluid+Nanofluid%22%5BJournal%5D)">Digital microfluidics: is a true lab-on-a-chip possible.</a> Microfluid Nanofluid. 3 (3), 245-281 (2007).</li>
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<li>Barbulovic-Nad, I., Yang, H., Park, P. S., Wheeler, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+microfluidics+for+cell-based+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Digital microfluidics for cell-based assays.</a> Lab Chip. 8 (4), 519-526 (2008).</li>
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</ol>

Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.

El paso más importante del protocolo es la protección de la capa de hollín, directamente relacionado con el éxito en gotas en movimiento. Metalizar la capa de hollín (método 1 anterior) permite cerca de 100% de éxito de fabricación. Sin embargo, el tiempo máximo de funcionamiento es de aproximadamente 10 min; posiblemente, las fracciones de gotitas están mojando el hollín a través de agujeros en la capa de metal. El recubrimiento de la capa de hollín con el líquido fluorado es la alternativa más fácil y rápida, y requie...

La miniaturización de los dispositivos que funcionan con líquidos es de suma importancia para el desarrollo de plataformas de &quot;lab-on-a-chip&quot;. En este sentido, las dos últimas décadas han sido testigos de un avance significativo en el campo de la microfluídica, con una variedad de aplicaciones. 5.1 En contraste con el transporte de fluidos en los canales cerrados (canal de microfluidos), DMF manipula gotitas en matrices de electrodos. Uno de los méritos más atractivas de esta técnica es la ausencia de partes móviles para el transporte de fluidos, y el movimiento se detiene al instante apagando señales eléctricas. Sin embargo, el movimiento de gotitas depende de su contenido de gota, sin duda una característica indeseable para una plataforma universal &quot;lab-on-a-chip&quot;. Las gotitas que contienen proteínas y otros analitos se adhieren a las superficies de dispositivos, convirtiéndose en inamovible. Sin duda, ésta ha sido la principal limitación para ampliar el alcance de las aplicaciones de DMF; 6-8alternativas para minimizar el ensuciamiento superficie no deseado implican la adición de especies químicas adicionales a la gota o sus alrededores, lo que podría afectar el contenido de las gotas. Anteriormente, nuestro grupo desarrolló un dispositivo para permitir el transporte de células y proteínas en DMF, sin aditivos adicionales (aparatos de campo-DW). 9 Esto se logró mediante la combinación de una superficie basada en el hollín vela, 10 con una geometría del dispositivo que favorece la gotita de laminación y conduce a una fuerza hacia arriba en la gotita, disminuyendo aún más la interacción de gotitas en la superficie. En este enfoque, el movimiento gotita no está asociado con humectación de la superficie. 11 El objetivo del método detallado se describe a continuación es producir un dispositivo de DMF capaz de transportar gotitas que contienen proteínas, células y organismos enteros, sin aditivos adicionales. Los dispositivos de campo-DW allanan el camino para las plataformas de trabajo totalmente controladas en gran medida independiente de farmacia gotary. Aquí, también presentes simulaciones que muestran que, a pesar de la alta tensión necesaria para el funcionamiento del dispositivo, la caída de voltaje a través de la gotita es una pequeña fracción de la tensión aplicada, lo que indica efectos insignificantes en bioanalytes dentro de la gotita. De hecho, las pruebas preliminares con Caenorhabditis elegans (C. elegans), un nematodo utilizado para una variedad de estudios de la biología, muestran que los gusanos nadan sin perturbaciones como se aplican voltajes.

<table><tbody><tr><td>Vela</td><td></td><td></td> de parafina <td>Cualquier vela de parafina</td></tr><tr><td>Sistema de pulverización catódica</td><td>Denton Vacuum, Moorestown, NJ</td><td></td><td>Barnizador de pulverización catódica Escritorio V HP equipado con un objetivo Au.&nbsp;</td></tr><tr><td>1-dodecanetiol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>471364</td><td></td></tr><tr><td>Teflón</td><td>Dupont</td><td>AF-1600</td><td></td></tr><tr><td>Fluorinert FC-40</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F9755</td><td>Líquido fluorado: Prepare la resina de Teflón-AF en Fluorinerte FC-40, 1:100 (p/p), para crear el recubrimiento hidrofóbico.</td></tr><tr><td>Software de diseño gráfico: Adobe Illustrator</td>, <td>Adobe Systems</td><td></td><td>También se pueden utilizar otros softwares.</td></tr><tr><td>Laminado de cobre</td><td>Dupont</td><td>LF9110</td><td></td></tr><tr><td>Impresora láser</td><td>Xerox</td><td>Phaser 6360 o similar</td><td>Compruebe la compatibilidad con "negro enriquecido" o "negro de registro" (ver texto).</td></tr><tr><td>Grabador de cobre</td><td>Transene</td><td>CE-100</td><td></td></tr><tr><td>Película de perfluoroalcoxi (PFA)</td><td>McMaster-Carr</td><td>84955K22</td><td></td></tr><tr><td>Breadboard</td><td>Allied Electronics</td><td>70012450 o similar</td><td>Lo suficientemente grande como para permitir el montaje de 10 controladores.</td></tr><tr><td>Placa de circuito universal</td><td>Allied Electronics</td><td>70219535 o similar</td><td></td></tr><tr><td>Conector</td><td>Allied Electronics</td><td>5145154-8 o similar</td><td></td></tr><tr><td>Placa de control y programa de control (software LabView)</td><td>National Instruments</td><td>NI-6229 o similar</td><td></td></tr><tr><td>Amplificador de alto voltaje</td><td>Trek</td><td>PZD700</td><td></td></tr><tr><td>Condensadores C y C1, 100 nF, 60 V</td><td>Aliados&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>8817183 Transistor T, NPN</td><td>Aliado&nbsp;</td><td></td><td></td>9350289</tr><tr><td>diodo D, 1N4007</td><td>aliado&nbsp;</td><td></td><td></td>2660007</tr><tr><td>Relé&nbsp;</td><td>Aliados&nbsp;</td><td></td><td></td>8862527</tr><tr><td>Sistema de visualización</td><td>Edmund Optics</td><td>VZM 200i o similar</td><td>Sistema de aumento 24X &#8211; 96X. Se combina con una cámara a color Hitachi KP-D20B 1/2 en CCD.</td></tr><tr><td>Grabadora</td><td>Sony</td><td>GV-D1000 NTSC o similar</td><td>Se conecta a la cámara mediante un cable S-video.</td></tr><tr><td>Simulaciones</td><td>COMSOL Multifísica</td><td>V. 4.4</td><td></td></tr></tbody></table>

tomando ventaja de la reducción de la interacción de gotas en la superficie para optimizar el transporte de bioanalytes en microfluídica digitales

Taking Advantage of Reduced Droplet-surface Interaction to Optimize Transport of Bioanalytes in Digital Microfluidics

La microfluídica digital (DMF), una técnica para la manipulación de gotas, es una alternativa prometedora para el desarrollo de plataformas de "laboratorio en un chip". A menudo, el movimiento de las gotas se basa en la humectación de una superficie, directamente asociada con la aplicación de un campo eléctrico; Sin embargo, las interacciones de la superficie hacen que el movimiento dependa del contenido de las gotas, lo que limita la amplitud de las aplicaciones de la técnica.
Se han presentado algunas alternativas para minimizar esta dependencia. Sin embargo, se basan en la adición de especies químicas adicionales a la gota o a su entorno, que podrían interactuar con las fracciones de las gotas. Para hacer frente a este reto, nuestro grupo ha desarrollado recientemente dispositivos Field-DW que permiten el transporte de células y proteínas en el DMF, sin aditivos adicionales.
Aquí, se proporciona el protocolo para la fabricación y operación del dispositivo, incluida la interfaz electrónica para el control de movimiento. También continuamos los estudios con los dispositivos, demostrando que también se pueden transportar organismos modelo multicelulares, relativamente grandes, posiblemente no afectados por los campos eléctricos necesarios para el funcionamiento del dispositivo.

Anteriormente, hemos utilizado dispositivos Field-DW para permitir el movimiento de las proteínas en DMF. En particular, las gotitas con albúmina de suero bovino (BSA) se pueden mover a una concentración 2.000 veces mayor que lo reportado previamente por otros autores (sin aditivos). Esto era debido a la reducción de la interacción entre las gotitas y superficie; La figura 4 muestra una gotita que contiene marcado con fluorescencia-BSA (ver Freire et al 9 para más información sobre l...

Se describe el protocolo para la fabricación y operación de dispositivos de deshumectación de campo (Field-DW), así como los estudios preliminares de los efectos de los campos eléctricos en el contenido de las gotas.

Tomando ventaja de la reducción de la interacción de gotas en la superficie para optimizar el transporte de Bioanalytes en microfluídica digitales

Digital microfluidics (DMF), a technique for manipulation of droplets, is a promising alternative for the development of &#8220;lab-on-a-chip&#8221; ...

El objetivo general de este procedimiento es fabricar un dispositivo de humectación de campo capaz de transportar gotas con bioanalitos sin aditivos. Esto se logra recubriendo primero un sustrato conductor con hollín de vela. El sustrato servirá como electrodo inferior del dispositivo.El segundo paso es proteger la capa de hollín mediante la aplicación de polímeros fluorados líquidos. A continuación, fabrique los electrodos superiores del dispositivo. A continuación, conecte los electrodos superior e inferior a la electrónica del experimento.El paso final es colocar una muestra entre los electrodos para probar el dispositivo. En última instancia, los resultados muestran que los dispositivos de humectación de campo pueden soportar la transferencia continua de gotas en respuesta a cada pulso eléctrico durante al menos 700 pulsos. Las principales ventajas de esta técnica sobre los métodos existentes como la electrohumectación es que el campo eléctrico no conduce a la humectación y no hay necesidad de aditivos adicionales para el transporte de gotas.Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia el desarrollo de un laboratorio totalmente automatizado en una plataforma de chips que funciona independientemente de la química de las gotas, La demostración de los procedimientos será Michael Kowski y Selena hacer investigadores de pregrado de mi laboratorio. El primer paso es preparar el sustrato conductor para el electrodo de tierra. Para ello, se ha cortado una lámina de cobre en rectángulos.Los rectángulos miden 75 milímetros por 43 milímetros con un grosor de 0,5 milímetros. Listo, Un recipiente de grabado de cobre para limpiar los sustratos. Este video seguirá el protocolo usando un solo sustrato.Sumerge el sustrato en el grabado durante unos 30 segundos. Después de la inmersión, recupere el sustrato y lávelo corriendo. Rocíe agua sobre él, séquelo con papel y, antes de continuar, colóquelo horizontalmente sobre un soporte que permita el acceso a su superficie orientada hacia abajo.Para este video, se utiliza un anillo abierto montado. Tenga lista una mezcla de fluoropolímero líquido y un gotero para su aplicación. Consigue una vela de parafina para proporcionar el hollín que se aplicará.Enciéndela y continúa barriendo la vela bajo el sustrato de cobre. Mantenga la parte superior de la llama aproximadamente un centímetro por debajo de la parte inferior del sustrato. Continúe barriendo la vela durante 30 a 45 segundos.Tenga cuidado de no tocar la superficie de hollín. Después de cubrir el sustrato con hollín, retire y apague la vela inmediatamente. Use pinzas para agarrar el sustrato y gírelo para exponer el lado cubierto de hollín.Mientras aún está caliente, use un gotero para depositar gotas del polímero fluorado líquido en los bordes para localizar la perturbación de la capa de hollín. Una vez aplicadas las gotas, inclina el sustrato de forma que quede casi vertical. A continuación, deposita más gotas y deja que rueden por toda la superficie del hollín esparciéndose.En la medida de lo posible. Continúe llevando el sustrato a una placa caliente sostenida a 160 grados centígrados. También dentro de la campana química, coloque el sustrato con el lado del hollín hacia arriba en una placa caliente para hornear durante 15 minutos.Después de 15 minutos, retire el sustrato de la placa calefactora y déjelo reposar durante la noche a temperatura ambiente antes de usarlo como electrodo inferior. El sustrato se puede almacenar indefinidamente cuando el electrodo de tierra esté listo para su uso. El siguiente paso es preparar los electrodos superiores.En este vídeo se utilizan electrodos fabricados siguiendo un protocolo de la literatura. El diseño del electrodo se imprimió en un delgado laminado de cobre, grabado y se limpió para llegar a este punto. Cada uno de los 10 electrodos mide dos milímetros de ancho y 0,3 milímetros de ancho.Los electrodos se montarán en un portaobjetos de vidrio de 75 milímetros por 25 milímetros y aproximadamente un milímetro de grosor. Aplique cinta adhesiva de doble cara en un extremo del portaobjetos y evite introducir bolsas de aire. A continuación, fije con cuidado el laminado al portaobjetos para que los electrodos queden cerca del borde.A continuación, corte un trozo de película de fluorescencia del ancho de la diapositiva. Coloque la película sobre los electrodos para evitar cortocircuitos accidentales. Sujétalo con cinta adhesiva.Los electrodos ahora se pueden utilizar con la interfaz electrónica. Lleve los electrodos superior e inferior a la configuración experimental para completar el dispositivo de humectación de campo. En la configuración experimental, el electrodo inferior está conectado a tierra eléctricamente.Por encima de él, los electrodos superiores están conectados a los relés a través de un conector de altura ajustable. Controle el dispositivo de microfluídica con un programa informático que mueve una gota entre electrodos adyacentes. En este experimento, se visualizará el movimiento de las gotas en el dispositivo de microfluídica.Utilice un conjunto de 24 96 aumentos combinado con una cámara CCD. Conecte una grabadora de vídeo a la cámara mediante S video. En este punto, obtenga una muestra para el experimento en este caso, C elegance y pipeta mediana de cuatro microlitros de gota.Coloque la gota en el electrodo inferior recubierto de hollín de modo que quede en el centro de los electrodos superiores. A continuación, ajuste la posición de los electrodos superiores, de modo que queden a unos 0,3 milímetros por encima de la gota. Con la interfaz electrónica y el alto voltaje encendido, ajuste la altura del electrodo superior hasta que la gota comience a moverse.No permita que el electrodo toque la gota. Una vez que el movimiento de la gota sea estable, comience a grabar con la cámara hasta que la gota no se mueva en respuesta a cinco a 10 pulsos. Este video muestra la transferencia exitosa de C elgan en medio entre los electrodos de un dispositivo de dúo de campo.Trabajos previos con albúmina sérica bovina marcada con fluorescencia o BSA ayudan a demostrar la interacción entre las muestras y el sustrato de la izquierda. El BSA se asienta sobre una superficie recubierta de hollín en contraste a la derecha en una superficie que utiliza solo un líquido fluorado. La muestra de BSA muestra una fuerte interacción de superficie.Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo fabricar, sentir los dispositivos de boda. No olvide seguir las pautas de seguridad del laboratorio.

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Microfluídica digital es una técnica caracterizada por la manipulación de las gotas discretas (~ NL - mL) en una matriz de electrodos en la aplicación de campos eléctricos. Es muy adecuado para llevar a cabo rápida y secuencial, en miniatura ensayos bioquímicos automatizados. Aquí, se presenta una plataforma capaz de automatizar varios pasos de procesamiento de proteómica.

Microfluídica digitales para el procesamiento automatizado de Proteómica

Gota de plataformas basadas en microfluidos son candidatos prometedores para la experimentación de alto rendimiento, ya que son capaces de generar picolitros, la auto-compartimentado barcos bajo costo en las tasas de kHz. Mediante la integración con rápido, sensible y de alta resolución espectroscópica métodos de fluorescencia, la gran cantidad de información generada dentro de estos sistemas se puede extraer de manera eficiente, aprovechar y utilizar.

Métodos de detección de fluorescencia para las plataformas de las gotas de microfluidos

Hemos desarrollado un cultivo de células automatizado y la plataforma de interrogación para experimentos de estimulación de células micro-escala. La plataforma ofrece un control sencillo, versátil y precisa en el cultivo y estimular las pequeñas poblaciones de células, y la recuperación de lisados ​​de análisis moleculares. La plataforma se adapta bien a los estudios que utilizan las células preciosos y / o reactivos.

Una plataforma automatizada versátil para Micro escala experimentos de estimulación celular

Presentamos un sistema de introducción de muestras de gotas discreto para la espectrometría de masas con plasma acoplado inductivamente (ICP-MS). Se basa en un chip microfluídico barato y desechable que genera gotitas altamente monodispersas en un intervalo de tamaños de 40-60 micras, con frecuencias de 90 a 7000 Hz.

Un chip de microfluidos para ICPMS Introducción Muestra

Describimos un ensayo digital de punto final para cuantificar ácidos nucleicos con una lectura simplificada (analógica). Medimos la fluorescencia masiva de ensayos digitales basados en gotas utilizando una máquina de qPCR estándar en lugar de instrumentación especializada y confirmamos nuestros resultados mediante microscopía.

Lectura granel simple de Digital ácidos nucleicos Cuantificación ensayos

Una plataforma de biosensores de microfluídica fue diseñada y fabricado utilizando la tecnología de fotoresistencia de película seca de bajo costo para la cuantificación rápida y sensible de diversos analitos. Este sistema de uso único permite la lectura electroquímica de sobre-chip-inmovilizado análisis enzima-ligado mediante la técnica de stop-flow.

Seca de la película basada en la fotoresistencia el Biosensor electroquímico de microfluidos plataforma: Fabricación de dispositivo, preparación del análisis de la en-viruta y el funcionamiento del sistema

Este artículo presenta un protocolo para la escasa población de células mediante puntas de pipeta los dispositivos microfluídicos gotita para proporcionar una mayor eficiencia de encapsulación de células en gotas de siembra.

Método basado en una punta de pipeta para siembra células gota microfluídicos plataformas

El microfluídico digital basado en electrohumección es una técnica que utiliza un cambio impulsado por voltaje en el ángulo de contacto aparente de una gota de volumen de microlitros para facilitar su manipulación. La combinación de esto con perlas magnéticas funcionalizadas permite la integración de múltiples operaciones de unidades de laboratorio para la preparación de muestras y la identificación de patógenos utilizando el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA).

Plataforma de microfluídico digital basada en electrohumección para el ensayo automatizado de inmunoabsorbentes ligados a enzimas

Describimos un kit educativo que permite a los usuarios ejecutar múltiples experimentos y obtener experiencia práctica en microfluídicos digitales.

Un kit versátil basado en la actuación de gotas de microfluídica digital para la educación científica

Los ensayos de gotas de agua en aceite son útiles para la química analítica, la evolución enzimática y el análisis de células individuales, pero generalmente requieren microfluídica para formar las gotas. Aquí, describimos la emulsificación con plantilla de partículas, un enfoque libre de microfluídica para realizar ensayos de gotas.

La emulsificación con plantilla de partículas permite ensayos de gotas sin microfluídica

Aquí se presenta la fabricación de un dispositivo bicapa basado en polidimetilsiloxano (PDMS) para la producción de bibliotecas combinatorias en emulsiones de agua en aceite (tapones). El hardware y el software necesarios para automatizar la producción de enchufes se detallan en el protocolo, y también se demuestra la producción de una biblioteca cuantitativa de enchufes fluorescentes.

Dispositivo microfluídico bicapa para la producción de tapones combinatorios

Aprende a fabricar dispositivos de deshumectación de campo para transportar bioanalitos sin aditivos mediante campos eléctricos. Este método optimiza la microfluídica digital para aplicaciones bioanalíticas avanzadas.

Tomando ventaja de la reducción de la interacción de gotas en la superficie para optimizar el transporte de Bioanalytes en microfluídica digitales (Video) | JoVE Journal

Tomando ventaja de la reducción de la interacción de gotas en la superficie para optimizar el transporte de Bioanalytes en microfluídica digitales

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