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DOI: 10.3791/52212-v
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Presentamos aquí un protocolo optimizado para genotipar, teñir y preparar ratones fetales para la obtención de imágenes de proyecciones de axones nociceptores periféricos en todo el animal, como un método eficaz para evaluar los fenotipos de crecimiento sensorial de axones en ratones modificados genéticamente en desarrollo.
El objetivo general del siguiente experimento es evaluar de manera efectiva los fenotipos sensoriales de crecimiento de axones en ratones fetales en desarrollo. Esto se logra primero mediante la cría y el genotipado adecuados de ratones reporteros tau laxos, de modo que se puedan realizar ensayos de tinción posteriores como segundo paso. Los embriones de ratón se fijan y tiñen para permitir la visualización de las proyecciones sensoriales de los axones en todo el animal.
A continuación, los embriones se deshidratan y se limpian para visualizar completamente las proyecciones axónicas profundas que de otro modo no serían visibles. Los resultados demuestran que estos métodos son un medio eficaz para evaluar rápidamente los fenotipos de crecimiento de axones nociceptivos embrionarios. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo del crecimiento sensorial de los axones al permitir a los investigadores cruzar su gen de interés en el seguimiento de un fondo tlac Z y detectar cualquier cambio en los fenotipos sensoriales de crecimiento de los axones.
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