Name: Imágenes de contraste en embriones de ratón Uso de alta frecuencia de ultrasonido (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 39 s
Description: Aprende a inyectar microburbujas en embriones de ratón vivos para imagenología de ultrasonido de alta frecuencia con contraste. Este método permite evaluar parámetros de perfusión vascular y unión de microburbujas dirigidas en estudios de biología del desarrollo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Este trabajo fue apoyado por el Programa Terry Fox del Instituto Nacional del Cáncer de Canadá.

<ol><li>Voigt, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+molecular+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Ultrasound molecular imaging.</a> Methods. 48 (2), 92-97 (2009).</li>
<li>Klibanov, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+targeted+microbubbles%3A+Ultrasound+contrast+agents+for+molecular+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Biological+Engineering+Computing%22%5BJournal%5D)">Preparation of targeted microbubbles: Ultrasound contrast agents for molecular imaging.</a> Medical Biological Engineering Computing. 47 (8), 875-882 (2009).</li>
<li>Cosgrove, D., Lassau, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+perfusion+using+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+Of+Nuclear+Medicine+And+Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Imaging of perfusion using ultrasound.</a> European Journal Of Nuclear Medicine And Molecular Imaging. 37 (S1), 65(2010).</li>
<li>Williams, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+microbubble+contrast-enhanced+US+to+measure+tumor+response+to+targeted+therapy%3A+A+proposed+clinical+protocol+with+results+from+renal+cell+carcinoma+patients+receiving+antiangiogenic+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Dynamic microbubble contrast-enhanced US to measure tumor response to targeted therapy: A proposed clinical protocol with results from renal cell carcinoma patients receiving antiangiogenic therapy.</a> Radiology. 260 (2), 581(2011).</li>
<li>Burns, P. N., Wilson, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+liver+masses%3A+Enhancement+patterns+on+contrast-enhanced+Images+-+Concordance+of+US+scans+with+CT+scans+and+MR+images%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Focal liver masses: Enhancement patterns on contrast-enhanced Images - Concordance of US scans with CT scans and MR images.</a> Radiology. 242 (1), 162(2006).</li>
<li>Phoon, C. K. L., Aristizabal, O., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((40+MHz+doppler+characterization+of+umbilical+and+dorsal+aortic+Blood+flow+in+the+early+mouse+embryo.+Ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22In+Medicine+And+Biology%22%5BJournal%5D)">40 MHz doppler characterization of umbilical and dorsal aortic Blood flow in the early mouse embryo. Ultrasound.</a> In Medicine And Biology. 26 (8), 1275-1283 (2000).</li>
<li>Phoon, C. K. L., Aristizabal, O., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+velocity+profile+in+mouse+embryonic+aorta+and+doppler-derived+volumetric+flow%3A+A+preliminary+model%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Spatial velocity profile in mouse embryonic aorta and doppler-derived volumetric flow: A preliminary model.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 283, H908-H916 (2002).</li>
<li>Aristizábal, O., Williamson, R., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAristiz%C3%A1bal%2C+O+%2212A-4+in+vivo+3D+contrast-enhanced+imaging+of+the+embryonic+mouse+vasculature.+Paper+presented+at+Ultrasonics+Symposium%22">12A-4 in vivo 3D contrast-enhanced imaging of the embryonic mouse vasculature. Paper presented at Ultrasonics Symposium</a>. , IEEE. New York, NY. (2007).</li>
<li>Bartelle, B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+genetic+approach+for+in+vivo+vascular+imaging+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.Res%22%5BJournal%5D)">Novel genetic approach for in vivo vascular imaging in mice.</a> Circ.Res. 110 (7), 938-947 (2012).</li>
<li>Endoh, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+gene+transfer+by+intrauterine+injection+with+microbubble-enhanced+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Fetal gene transfer by intrauterine injection with microbubble-enhanced ultrasound.</a> Molecular Therapy. 5 (5), 501-508 (2002).</li>
<li>Yamada, M., Hatta, T., Otani, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+exo+utero+development+system%3A+Protocol+and+troubleshooting%5BTitle%5D)+AND+%22Congenital+Anomalies%22%5BJournal%5D)">Mouse exo utero development system: Protocol and troubleshooting.</a> Congenital Anomalies. 48 (4), 183-187 (2008).</li>
<li>Denbeigh, J. M., Nixon, B. A., Hudson, J. M., Purin, M. C., Foster, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGFR2-targeted+molecular+imaging+in+the+mouse+embryo%3A+An+alternative+to+the+tumor+model%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+medicine+and+biology%22%5BJournal%5D)">VEGFR2-targeted molecular imaging in the mouse embryo: An alternative to the tumor model.</a> Ultrasound in medicine and biology. 40 (2), 389-399 (2014).</li>
<li>Paauwe, M., Dijke, ten, P,, Hawinkels, L. J. A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoglin+for+tumor+imaging+and+targeted+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+On+Therapeutic+Targets%22%5BJournal%5D)">Endoglin for tumor imaging and targeted cancer therapy.</a> Expert Opinion On Therapeutic Targets. 17 (4), 421-435 (2013).</li>
<li>Bourdeau, A., Faughnan, M. E., Letarte, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoglin-deficient+mice%2C+a+unique+model+to+study+hereditary+hemorrhagic+telangiectasia%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cardiovasc.+Med%22%5BJournal%5D)">Endoglin-deficient mice, a unique model to study hereditary hemorrhagic telangiectasia.</a> Trends Cardiovasc. Med. 10 (7), 279-285 (2000).</li>
<li>Whiteley, K. J., Adamson, S. L., Pfarrer, C. D. Vascular corrosion casting of the uteroplacental and fetoplacental vasculature in mice. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWhiteley%2C+KJ+%22Placenta+And+Trophoblast%3A+Methods+And+Protocols%22">Placenta And Trophoblast: Methods And Protocols</a>. 121 (121), Humana Press. Totowa, NJ. 371-392 (2006).</li>
<li>Kulandavelu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryonic+and+neonatal+phenotyping+of+genetically+engineered+mice%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Embryonic and neonatal phenotyping of genetically engineered mice.</a> ILAR Journal. 47 (2), 103-10 (2006).</li>
<li>Kalaskar, V. K., Lauderdale, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+embryonic+development+in+a+serum-free+whole+embryo+culture+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Mouse embryonic development in a serum-free whole embryo culture system.</a> Journal of Visualized Experiments. 85, (2014).</li>
<li>Willmann, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+contrast-enhanced+ultrasound+imaging+of+tumor+angiogenesis+with+contrast+microbubbles+conjugated+to+integrin-binding+knottin+peptides%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Targeted contrast-enhanced ultrasound imaging of tumor angiogenesis with contrast microbubbles conjugated to integrin-binding knottin peptides.</a> The Journal of Nuclear Medicine. 51 (3), 433-440 (2010).</li>
<li>Deshpande, N., Ren, Y., Foygel, K., Rosenberg, J., Willmann, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+angiogenic+marker+expression+levels+during+tumor+growth%3A+Longitudinal+assessment+with+molecularly+targeted+microbubbles+and+US+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Tumor angiogenic marker expression levels during tumor growth: Longitudinal assessment with molecularly targeted microbubbles and US imaging.</a> Radiology. 258 (3), 804-811 (2011).</li>
<li>Lyshchik, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+of+vascular+endothelial+growth+factor+receptor+2+expression+using+targeted+contrast-enhanced+high-frequency+ultrasonography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Of+Ultrasound+In+Medicine%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging of vascular endothelial growth factor receptor 2 expression using targeted contrast-enhanced high-frequency ultrasonography.</a> Journal Of Ultrasound In Medicine. 26 (11), 1575-1586 (2007).</li>
<li>Jerkic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoglin+regulates+nitric+oxide-dependent+vasodilatation%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Endoglin regulates nitric oxide-dependent vasodilatation.</a> The FASEB Journal. 18 (3), 609-611 (2004).</li>
<li>Denbeigh, J. M., Nixon, B. A., Lee, J. J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDenbeigh%2C+JM+%22Contrast-Enhanced+Molecular+Ultrasound+Differentiates+Endoglin+Genotypes+in+Mouse+Embryos%22">Contrast-Enhanced Molecular Ultrasound Differentiates Endoglin Genotypes in Mouse Embryos</a>. , Angiogenesis. Press. (2014).</li>
<li>Adamson, S. L., Lu, Y., Whiteley, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+between+trophoblast+cells+and+the+maternal+and+fetal+circulation+in+the+mouse+placenta%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Interactions between trophoblast cells and the maternal and fetal circulation in the mouse placenta.</a> Dev Biol. 250, 358-35 (2002).</li>
<li>Needles, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+contrast+imaging+with+an+array-based+micro-ultrasound+system.+Ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+Biology%22%5BJournal%5D)">Nonlinear contrast imaging with an array-based micro-ultrasound system. Ultrasound.</a> Medicine Biology. 36 (12), 2097(2010).</li>
<li>Watson, E. D., Cross, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+structures+and+transport+functions+in+the+mouse+placenta%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology%22%5BJournal%5D)">Development of structures and transport functions in the mouse placenta.</a> Physiology. 20 (3), 180-193 (2005).</li>
<li>Shalaby, F., Rossant, J., Yamaguchi, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+blood-island+formation+and+vasculogenesis+in+Flk-1-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Failure of blood-island formation and vasculogenesis in Flk-1-deficient mice.</a> Nature. 376, 62-66 (1995).</li>
<li>Kwee, L., Baldwin, H. S., Shen, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defective+development+of+the+embryonic+and+extraembryonic+circulatory+systems+in+vascular+cell+adhesion+molecule+%28VCAM-1%29+deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Defective development of the embryonic and extraembryonic circulatory systems in vascular cell adhesion molecule (VCAM-1) deficient mice.</a> Development. 121, (1995).</li>
<li>Mercurio, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+from+the+%CE%B12+integrin+knockout+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+journal+of+pathology%22%5BJournal%5D)">Lessons from the α2 integrin knockout mouse.</a> The American journal of pathology. , 161-163 (2002).</li>
<li>Hodivala-Dilke, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B1v%CE%B23+integrin+and+angiogenesis%3A+a+moody+integrin+in+a+changing+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">αvβ3 integrin and angiogenesis: a moody integrin in a changing environment.</a> Curr Opin Cell Biol. 20, 514-519 (2008).</li>
<li>Pysz, M. A., Gambhir, S. S., Willmann, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging%3A+current+status+and+emerging+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+radiology%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging: current status and emerging strategies.</a> Clinical radiology. 65, 500-516 (2010).</li>
<li>Cybulsky, M. I., Iiyama, K., Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+major+role+for+VCAM-1%2C+but+not+ICAM-1%2C+in+early+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">A major role for VCAM-1, but not ICAM-1, in early atherosclerosis.</a> J Clin Invest. 107, 1255-1262 (2001).</li>
<li>Xu, H., Gonzalo, J. A., St Pierre,, Y,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leukocytosis+and+resistance+to+septic+shock+in+intercellular+adhesion+molecule+1-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Leukocytosis and resistance to septic shock in intercellular adhesion molecule 1-deficient mice.</a> J Exp Med. 180, 95-109 (1994).</li>
<li>Gerwin, N., Gonzalo, J. A., Lloyd, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+eosinophil+accumulation+in+allergic+lung+interstitium+of+ICAM-2-deficient+mice+results+in+extended+hyperresponsiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Prolonged eosinophil accumulation in allergic lung interstitium of ICAM-2-deficient mice results in extended hyperresponsiveness.</a> Immunity. 10, 9-19 (1999).</li>
<li>Johnson, R. C., Mayadas, T. N., Frenette, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+cell+dynamics+in+P-selectin-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Blood cell dynamics in P-selectin-deficient mice.</a> Blood. 86, 1106-1114 (1995).</li>
<li>Corrigan, N., Brazil, D., McAuliffe, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-frequency+ultrasound+assessment+of+the+murine+heart+from+embryo+through+to+juvenile%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Sciences%22%5BJournal%5D)">High-frequency ultrasound assessment of the murine heart from embryo through to juvenile.</a> Reproductive Sciences. 17 (2), 147-14 (2010).</li>
<li>Turnbull, D. H., Bloomfield, T. S., Baldwin, H. S., Foster, F. S., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+backscatter+microscope+analysis+of+early+mouse+embryonic+brain+development%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Ultrasound backscatter microscope analysis of early mouse embryonic brain development.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 92, 2239-2243 (1995).</li>
<li>Greco, A., Mancini, M. L., Gargiulo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+Biomicroscopy+in+Small+Animal+Research%3A+Applications+in+Molecular+and+Preclinical+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedicine+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Ultrasound Biomicroscopy in Small Animal Research: Applications in Molecular and Preclinical Imaging.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2012, (2012).</li>
<li>Pysz, M. A., Guracar, I., Foygel, K., Tian, L., Willmann, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+tumor+angiogenesis+using+real-time+motion-compensated+contrast-enhanced+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of tumor angiogenesis using real-time motion-compensated contrast-enhanced ultrasound imaging.</a> Angiogenesis. 15, 433-442 (2012).</li>
<li>Larina, I. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+blood+flow+in+mammalian+embryos+using+doppler+swept-source+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J.Biomed.Opt%22%5BJournal%5D)">Live imaging of blood flow in mammalian embryos using doppler swept-source optical coherence tomography.</a> J.Biomed.Opt. 13 (6), 060506-06 (2008).</li>
<li>Garcia, M. D., Udan, R. S., Hadjantonakis, A. K., Dickinson, M. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGarcia%2C+MD+%22Live+imaging+of+mouse+embryos%22">Live imaging of mouse embryos</a>. 4 (4), Cold Spring Harbor. 104-10 (2011).</li>
<li>Teichert, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+nitric+oxide+synthase+gene+expression+during+murine+embryogenesis.+Commencement+of+expression+in+the+embryo+occurs+with+the+establishment+of+a+unidirectional+circulatory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Endothelial nitric oxide synthase gene expression during murine embryogenesis. Commencement of expression in the embryo occurs with the establishment of a unidirectional circulatory system.</a> Circulation Research. 103 (1), 24-33 (2008).</li>
<li>Walls, J. R., Coultas, L., Rossant, J., Henkelman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+analysis+of+vascular+development+in+the+mouse+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional analysis of vascular development in the mouse embryo.</a> PLoS One. 3 (8), (2008).</li>
</ol>

F.S. Foster reconoce su papel como consultor de VisualSonics Inc.

Los agentes de contraste de ultrasonido fueron inyectadas en la última etapa de la gestación de embriones de ratón y las imágenes de contraste no lineales fueron adquiridos para medir parámetros de perfusión y microburbujas dirigidos vinculante. El éxito de formación de imágenes de microburbujas dentro de la vasculatura embrionaria era dependiente de una serie de factores, siendo el primero la viabilidad del embrión. Todo el equipo y el aparato se prepararon de antemano con el fin de minimizar el tiempo requerido para e...

La ecografía con contraste hace uso de agentes de contraste de microburbujas de visualizar y caracterizar el ambiente vascular. Estos agentes permiten la evaluación no invasiva de la microcirculación, la vascularización y la función cardiovascular. Además, la modificación de la superficie de la burbuja puede resultar en microburbujas específica de unión a los biomarcadores endoteliales, como se ha demostrado en aplicaciones preclínicos de la angiogénesis, la aterosclerosis y la inflamación 1,2 toma de imágenes por ultrasonido molecular de eventos vasculares posibles. Por lo tanto, un mayor contraste de ultrasonido puede ser usado para identificar los entornos complejos y diversos que influyen en los estados vasculares sanas y enfermas 3-5. En el último número de años, el interés en la utilidad de las imágenes de microburbujas se ha extendido al modelo de embrión de ratón versátil. Como modelo de desarrollo de los mamíferos, la introducción de microburbujas en la vasculatura embrionaria mejora fisiológicaestudio del desarrollo del sistema circulatorio (por ejemplo, el flujo sanguíneo, el gasto cardíaco) y en casos de transgénicos y dirigidos modelos de ratones mutantes de la enfermedad cardíaca 6,7, puede ayudar a comprender cómo los factores genéticos alterar la función cardiovascular. De hecho, los análisis 2D cuantitativa y cualitativa de la vasculatura del cerebro embrionario ya se han logrado 8. Además, el embrión de ratón se presenta como un modelo excelente para examinar la unión de microburbujas dirigidas a los marcadores vasculares in vivo. Bartelle et al. 9, por ejemplo, han introducido microburbujas avidina en embrión ventrículos cardíaco para evaluar dirigido específicamente vinculante en Biotag-Bira embriones transgénicos y examinar la anatomía vascular. La generación de modelos heterocigotos y homocigotos ratón también puede ser utilizado como un sustituto de los estudios de modelos tumorales con el objetivo de definir la naturaleza cuantitativa de ultrasonido molecular - un punto de referencia importante en la traducción de esta técnica a la clínica. <p clculo = &quot;jove_content&quot;&gt; microburbujas se presentó con mayor frecuencia a la circulación embrionaria a través de inyecciones intra-cardiaca en embriones únicos expuestos a través de una laparotomía 8-10. En inyecciones útero, sin embargo, se enfrentan a una serie de desafíos. Estos incluyen la orientación de la inyección, la necesidad de contrarrestar el movimiento en la madre y el embrión exteriorizada, el mantenimiento de la viabilidad de hemodinámica en la madre y embriones exteriorizados, abordando los efectos a largo plazo de la anestesia y las complicaciones por sangrado 11. Por lo tanto, el objetivo de la investigación fue desarrollar una técnica para la inyección de microburbujas en aislados de vida embriones en etapa tardía 12. Esta opción ofrece más libertad en términos de control de la inyección y el posicionamiento, la reproducibilidad del plano de formación de imágenes sin obstrucción, y análisis de imagen simplificada y cuantificación. En el presente estudio, se describe un nuevo procedimiento para la inyección de microburbujas en que viven los embriones murinos FOr los efectos de estudiar el comportamiento cinético de microburbujas y de estudiar la unión a marcadores de superficie endoteliales endógenos de microburbujas dirigidas. Ecografía específica contraste no lineal se utiliza para medir una serie de parámetros de perfusión básicos, incluyendo la mejora de pico (PE), lavandería en la tasa y el tiempo hasta el pico (TTP) en aislados embriones E17.5. También demuestran la validez del modelo de embrión para evaluar la naturaleza cuantitativa de la ecografía molecular en una pérdida de la endoglina embrionario de modelo de ratón transgénico función, donde la endoglina es una diana clínicamente relevante debido a su alta expresión en las células endoteliales vasculares en los sitios de angiogénesis activa 13 . La adhesión de isotipo IgG de rata de control de la endoglina 2-dirigida (MB E), (MB C) y (U) MB microburbujas no focalizados se evalúa en la endoglina heterocigotos (Esp +/-) y homocigotos endoglina (Eng + / +) que expresan embriones. Análisis del bindi apuntadong revela que el ultrasonido molecular es capaz de diferenciar entre los genotipos endoglina y relacionando densidad de los receptores a los niveles cuantificables de ultrasonido moleculares.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Reagents<</td></tr><tr>td colspan="4">Antibodies (biotinilado, eBioscience) &#8212; La elección del anticuerpo depende del experimento</td></tr><tr><td><ul style="padding:0px; margin:0px"><li>rata isotipo IgG2 control</li></ul></td><td>eBioscience</td><td>13-4321-85</td><td>Esta combinación de anticuerpos/microburbujas se requiere a menudo como control experimental&nbsp;</td></tr><tr><td><ul style="relleno:0px; margin:0px"><li>biotina anti-ratón CD309</li></ul></td><td>eBioscience</td><td>13-5821-85</td><td></td></tr><tr><td>Rata biotinilada MJ 7/18 anticuerpo contra endoglina de ratón</td><td>Hibridoma</td><td></td> interno <td>Los anticuerpos externos también pueden ser apropiados: hemos utilizado eBioscience (13-1051-85) en el pasado</td></tr><tr><td>Agua</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr> destilada<td colspan="4">Embryo media</td></tr><tr><td><ul style="relleno:0px; margen:0px"><li>500 ml Dulbecco' s Águila Modificada' s Medio con glucosa alta</li></ul></td><td>Sigma</td><td>D5796</td><td></td></tr><tr><td><ul style="padding:0px; margin:0px"><li>50 ml Suero Fetal Bovino</li></ul></td><td>ATCC</td><td>30-2020</td><td>lote # 7592456</td></tr><tr><td><ul style="relleno:0px; margin:0px"><li>Hepes</li></ul></td><td>Gibco</td><td>15630</td><td>5 ml, 1 M</td></tr><tr><td><ul style="relleno:0px; margen:0px"><li>Penicilina-Estreptomicina</li></ul></td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td>5 ml, 10,000 unidades Pen., 10,000 &#956; g Etanol estreptocócico</td></tr><tr><td>, 70%</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hielo</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehído</td><td>Sigma</td><td>76240</td><td>4%</td></tr><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato [1x]&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>D8537</td><td>1x, sin cloruro de calcio y cloruro de magnesio</td></tr><tr><td>Ratón embarazada, CD-1</td><td>Charles River Laboratories Inc.&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cloruro de sodio (solución salina) al 0,9%</td><td>Hospira</td><td>0409-7984-11</td><td></td></tr><tr><td>Agente de contraste ultrasónico, micromarcador listo para objetivos y no dirigido</td><td>; VisualSonics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gel de ultrasonido (Aquasonic 100, incoloro)</td><td>CSP Medical</td><td>133-1009</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Equipment</td></tr><tr><td>Placas de cultivo celular (4) :&nbsp; 100&nbsp; x&nbsp; 20&nbsp; mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-772-22</td><td></td></tr><tr><td>Placas de cultivo celular (12) : 60&nbsp; x&nbsp; 15&nbsp; mm</td><td>Centrífuga Sigma</td><td>D8054</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Sorvall Legend RT&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubos cónicos, 50 ml BD Falcon</td><td>VWR</td><td>21008-938</td><td></td></tr><tr><td>Diluyente</td><td>Beckman Coulter</td><td>Isoton II Diluyente, 8448011</td><td></td></tr><tr><td>tijeras de disección (Wagner)</td><td>Fine Science Tools</td><td>Wagner 14068-12</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas (2), Dumont SS (0,10 x 0,06 mm)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11200-33</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas de astilla</td><td>VWR</td><td>25601-134</td><td></td></tr><tr><td>Vaso de precipitados de vidrio, 2 L (Vaso Griffin)</td><td>VWR</td><td>89000-216</td><td></td></tr><tr><td>Capilares de vidrio, 1 x 90&nbsp; mm GD-1 con filamento</td><td>Narishige</td><td>GD-1</td><td></td></tr><tr><td>Extractor de agujas de vidrio</td><td>Narishige</td><td>PN-30</td><td></td></tr><tr><td>Guantes</td><td>Ansell</td><td>4002</td><td></td></tr><tr><td>Sonda de anatomía macroscópica</td><td>Fine Science Tools</td><td>10088-15</td><td></td></tr><tr><td>Placa calefactora</td><td>VWR</td><td>89090-994</td><td></td></tr><tr><td>Cubitera</td><td>Cole Parmer</td><td>RK 06274-01</td><td></td></tr><tr><td>Imagen Plataforma</td><td>: VisualSonics Inc.</td>Sistema <td></td><td>de rieles integrado</td></tr><tr><td>Fuente de luz, fibra óptica</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-562-36</td><td>Idealmente tiene brazos ajustables</td></tr><tr><td>Luers (12), polipropileno con púas hembra &frac14;-28 UNF rosca</td><td>Cole Parmer</td><td>45500-30</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de microultrasonido, alta frecuencia</td><td>VisualSonics Inc.</td><td>Agujas Vevo2100</td><td></td></tr><tr><td>, calibre 21&nbsp; (1")</td><td>VWR</td><td>305165</td><td></td></tr><tr><td>Analizador de tamaño de partícula</td><td>Beckman Coulter</td><td>Multisizer 3 Coulter Counter</td><td></td></tr><tr><td>Cuchara perforada (Moria)</td><td>Fine Science Tools</td><td>MC 17 10373-17</td><td></td></tr><tr><td>Pines (6), negro anodizado minutien 0.15 mm</td><td>Fine Science Tools</td><td>26002-15</td><td></td></tr><tr><td>Pipettors [2-20 &#956; l, 20-200 &#956; l, 100-1.000 &#956; l]</td><td>Eppendorf</td><td>Research Plus&nbsp; 3120000038 ajustable; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 3120000054; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; </td><td></td>3120000062</tr><tr><td>Puntas de pipeta [2-200&nbsp; &#956; l, 50-1.000&nbsp; &#956; l]</td><td>Eppendorf</td><td>epT.I.P.S.&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 22491334; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; </td><td></td>022491351</tr><tr><td>Tijeras</td> Sylgard 184 Kit de <td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Elastómero de Silicona</td><td>Dow Corning</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubing, laboratorio Tygon 1/32" x 3/32"</td><td>VWR</td><td>63010-007</td><td></td></tr><tr><td>Barra aplicadora de madera (hisopo, cabeza de algodón)</td><td>VWR</td><td>CA89031-270</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio quirúrgico con aumento de 5-8X</td><td>Jeringas Fisher Scientific</td><td>Steromaster</td><td></td></tr><tr><td>, 1 ml Jeringas Normject</td><td></td><td>Fisher 14-817-25</td><td></td></tr><tr><td>(10), 30 ml</td> Bomba de infusión de jeringa <td>VWR</td><td>CA64000-041</td><td></td></tr>&<tr><td>nbsp;</td><td>Bio-lince&nbsp;</td><td>Termómetro NE-1000</td><td></td></tr><tr><td>, -20-110&nbsp; &#176; C</td><td>VWR</td><td>89095-598</td><td></td></tr><tr><td>Temporizador</td><td>VWR</td><td>33501-418</td><td></td></tr><tr><td>Tubos, Eppendorf</td><td>VWR</td><td>20170-577</td><td></td></tr><tr><td>Bastidores de tubos (3)</td><td>VWR</td><td>82024-462</td><td></td></tr><tr><td>Transductor de ultrasonidos, 20 MHz</td><td>VisualSonics Inc.</td><td>MS250</td><td></td></tr><tr><td>Vannas-Tubingen, Fine</td><td>Science Tools</td><td>15005-08</td><td></td></tr></tbody></table>

imágenes de contraste en embriones de ratón uso de alta frecuencia de ultrasonido

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

Las imágenes con contraste por ultrasonido pueden transmitir información cuantitativa esencial sobre la vascularización y la perfusión de los tejidos y, en aplicaciones específicas, facilitar la detección y medición de biomarcadores vasculares a nivel molecular. Dentro del embrión de ratón, esta técnica no invasiva se puede utilizar para descubrir los mecanismos básicos que subyacen al desarrollo vascular en el sistema circulatorio temprano del ratón y en modelos genéticos de enfermedad cardiovascular. El embrión de ratón también se presenta como un modelo excelente para estudiar la adhesión de las microburbujas a las dianas angiogénicas (incluido el receptor 2 del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR2) o αvβ 3) y para evaluar la naturaleza cuantitativa de la ecografía molecular. Por lo tanto, desarrollamos un método para introducir agentes de contraste ultrasónicos en la vasculatura de embriones vivos aislados. Esto permite libertad en términos de control y posicionamiento de la inyección, reproducibilidad del plano de imagen sin obstrucciones ni movimiento, y análisis y cuantificación de imágenes simplificados. En la etapa gestacional tardía (día embrionario (E)16.6 y E17.5) se aislaron embriones murinos del útero, se exteriorizaron suavemente del saco vitelino y se inyectaron agentes de contraste de microburbujas en las venas accesibles en la superficie coriónica del disco placentario. A continuación, se emplearon imágenes de ultrasonido con contraste no lineal para recopilar una serie de parámetros básicos de perfusión (realce del pico, tasa de lavado y tiempo hasta el pico) y cuantificar la unión de microburbujas dirigidas en un modelo de ratón endoglina. Mostramos la circulación exitosa de microburbujas dentro de embriones vivos y la utilidad de este enfoque en la caracterización de la vasculatura embrionaria y el comportamiento de las microburbujas.

La inyección de agentes de contraste de ultrasonido en el útero los embriones de ratón ex depende del éxito en el aislamiento de la vida, embriones en fase tardía de la gestación del útero y el mantenimiento de la viabilidad en el transcurso de la inyección y de formación de imágenes de ultrasonido relacionada. Una vez que el embrión se ha exteriorizado y posicionado, como se muestra en la Figura 1, la inyección cuidadosa de agente de contraste en la vasculatura embrionaria es posible....

A continuación, presentamos un protocolo para inyectar medios de contraste de microburbujas de ultrasonidos en la vida, aislados finales de la gestación de embriones murinos etapa. Este método permite el estudio de los parámetros de perfusión y de marcadores moleculares vasculares dentro del embrión utilizando imágenes de ultrasonido de alta frecuencia con contraste.

Imágenes de contraste en embriones de ratón Uso de alta frecuencia de ultrasonido

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

El objetivo general de este procedimiento es inyectar microburbujas en embriones de ratón vivos aislados, para la obtención de imágenes por ultrasonido con contraste. Esto se logra primero recolectando embriones vivos E 16.5 o E 17.5 de un ratón preñado.Después de preparar las microburbujas de direccionamiento, se inyectan en el embrión vivo a través de la red vascular placentaria. El paso final consiste en obtener imágenes de las microburbujas mediante ecografía. En última instancia, la ecografía con contraste podría utilizarse para medir parámetros de perfusión vascular y evaluar la unión de microburbujas dirigidas en embriones.Por lo general, las personas nuevas en este método tendrán dificultades con el manejo de los embriones y las partes de inyección del protocolo hasta que hayan practicado lo suficiente para aplicar las presiones adecuadas con la aguja y las pinzas necesarias para un experimento exitoso. La persona que demostrará el procedimiento será Brian Nixon, un estudiante cooperante de nuestro laboratorio. Para reconstituir los viales de destino listos, comience diluyendo 20 microgramos de la solución de anticuerpo en un volumen final de un mililitro de solución salina. Mantenga los viales sobre hielo. A continuación, llene una jeringa con un mililitro de solución salina.Eliminación de todas las burbujas de aire. Coloque una aguja de calibre 21 e inyecte lentamente la solución en el vial de microburbujas. Retire lentamente el émbolo, extrayendo un mililitro de aire, luego retire la aguja.Agite suavemente el vial y déjelo reposar sobre hielo durante cinco minutos. Después de cinco minutos, llene una nueva jeringa con la dilución de anticuerpo y añádala al vial correspondiente. Después de agitar, deje reposar suavemente la mezcla ahora de dos mililitros.Deje reposar durante 10 minutos sobre hielo. Para reconstituir los viales no dirigidos, llene una jeringa con un mililitro de solución salina. Elimine todas las burbujas de aire.Coloque una aguja de calibre 21 e inyecte lentamente la solución en un nuevo vial de microburbujas. Retire lentamente el émbolo, extrayendo un mililitro de aire, luego retire la aguja. Agite suavemente y deje reposar durante cinco minutos.Después de agregar un mililitro adicional de solución salina para alcanzar un volumen total de dos mililitros, agite suavemente y deje reposar durante 10 minutos en hielo. Después de agitar suavemente el vial deseado de microburbujas, utilice una aguja de calibre 21 en una jeringa de un mililitro para aspirar aproximadamente 50 microlitros de la solución. A continuación, inyecte las microburbujas en un tubo microcetrífugo vacío de dos mililitros.A continuación, pipete una muestra de 10 microlitros de la solución stock de microburbujas en 10 mililitros de diluyente. Después de mezclar suavemente, utilice el recuento Coulter para evaluar las distribuciones de concentración y tamaño de la población de microburbujas. Cuente un mínimo de tres mediciones de 50 microlitros por muestra de vial.Utilizando una abertura de 30 micrómetros. Este paso se realiza en paralelo con la inyección de microburbujas en los embriones. Mientras el cirujano está inyectando los embriones, el asistente prepara la siguiente inyección para garantizar que el cirujano no conozca el tipo de burbuja que se está inyectando.Determine el volumen de solución stock de burbujas necesario para obtener una concentración final de 100 millones de microburbujas por mililitro en un volumen de 400 microlitros. Ali-cuote el volumen correspondiente de solución salina en un tubo microcéntrifugo vacío. Después de agitar suavemente el vial seleccionado de microburbujas, utilice una jeringa de un mililitro con una aguja de calibre 21 para aspirar un volumen excesivo de la solución.Luego inyecte las microburbujas en un tubo de microcentrífuga vacío. A continuación, aspire con la pipeta el volumen necesario de la solución stock de microburbujas y añádalo al Ali quad de solución salina. Mezcle agitando suavemente con la punta de la pipeta.Luego, use una aguja de calibre 21 para aspirar la solución diluida de microburbujas en una jeringa limpia. Después de retirar la aguja, elimine cualquier burbuja de aire de la jeringa y conecte el cebo y el tubo. Empuje lentamente la solución hasta el extremo del tubo, asegurándose de no generar burbujas de aire.Finalmente, inserte la jeringa en una bomba de infusión de jeringas ajustada para dispensar las microburbujas a una velocidad de 20 microlitros por minuto. Para un volumen total de 20 microlitros, sujete una aguja de vidrio estirada al extremo del tubo. Acerque la bomba al soporte de inyección.Utilice una cuchara perforada para seleccionar y retirar al azar un embrión del recipiente con medio frío. Coloque el embrión en un recipiente para disección situado sobre la plataforma de ultrasonido bajo el estereoscopio. A continuación, localice el lado del embrión que parece estar menos vascularizado.Aquí hay una zona de baja vascularización generalmente adyacente a la región cefálica. Luego, use pinzas finas para cortar o rasgar lo suficiente del saco vitelino y las membranas amnióticas como para poder extraer al embrión desde el interior, pero no más. A continuación, manipule suavemente el saco alrededor del embrión.Luego, coloque el embrión de lado con la placenta y los vasos umbilicales en la parte frontal. Estabilice el recipiente de disección utilizando pequeños trozos de plastilina y cuatro alfileres de insecto clavados en la bolsa de yema y en los bordes de la placenta, evitando cualquier vaso importante usando una jeringa que contiene precalentado. 45 grados Celsius.Lave el embrión con PBS hasta que se observe sangre fluyendo hacia el embrión. La arteria umbilical se identifica por la sangre roja brillante y pulsátil. La vena umbilical y su red vascular asociada tienen sangre más oscura y generalmente se ubican sobre los vasos de la arteria umbilical en el lado placentario.En este momento, coloque el plato de manera que la inyección se pueda realizar cómodamente. Una vez que el embrión haya revivido, cúbralo, pero no la placenta. Con gel de ultrasonido precalentado, use pinzas finas para retirar delicadamente cualquier burbuja de aire alrededor del embrión y reponga el plato con PBS precalentado durante todo el procedimiento.Observe el nivel de la solución en las jeringas de PBS y de gel y agregue jeringas de repuesto al vaso de precipitados caliente según sea necesario. A continuación, sujete la aguja de vidrio sobre una bola grande de plastilina en el borde del recipiente para disección e introduzca el extremo de la aguja en el PBS. Elija una vena en la superficie coriónica del disco placentario lo más alejada posible de la rama principal, dentro de lo razonable.Luego, use tijeras para recortar la punta de la aguja de modo que coincida con el tamaño del vaso. Corte la punta con un ligero ángulo. Use el borde de las tijeras de resorte para eliminar cualquier borde irregular del vidrio.Ahora, utilizando la bomba de jeringa, inyecte lentamente la solución de microburbujas a 20 microlitros por minuto en la aguja de vidrio hasta que todo el aire sea expulsado de la punta de la aguja, y se observe que las microburbujas fluyen libremente hacia el PBS. Detenga la bomba y reajústela para un volumen de inyección de 20 microlitros. No permita que entre aire en la aguja de inyección, con el fin de evitar inyectar aire en el sistema vascular del embrión.Inserte suavemente la punta de la aguja de vidrio en la vena seleccionada de la placenta y asegúrese de que esté inmóvil. Gire el cabezal del estereoscopio hacia un lado y coloque el transductor de ultrasonido de modo que el embrión quede situado uniformemente entre los focos a seis y diez milímetros. A continuación, inicie la adquisición de imágenes y comience la inyección en bolo de las microburbujas; un minuto después de que finalice la inyección, active el temporizador para la etapa de adquisición de datos.Esta imagen de ultrasonido en modo B muestra un embrión exteriorizado de E 17.5 inmediatamente antes de la inyección de microburbujas dirigidas. Esta imagen de ultrasonido con contraste no lineal muestra el embrión antes de la inyección de microburbujas, cuando solo son visibles las interfaces fuertemente reflectantes, como el hueso, con una señal mínima proveniente de los tejidos blandos. La inyección de microburbujas mejora el contraste en todo el animal, incluyendo la vena cava inferior, el corazón y el cerebro.Un gráfico de intensidad de microburbujas en función del tiempo dentro de una única región de interés en el cerebro embrionario permite la identificación de diversos parámetros de perfusión, incluyendo el refuerzo máximo o velocidad de entrada, mostrado por la pendiente, y el tiempo hasta el pico o TTP. Las relaciones promedio de potencia media del contraste de microburbujas dirigidas a endoglina fueron significativamente más altas que las obtenidas con microburbujas no dirigidas en el control. Además, se encontró que la unión de microburbujas dirigidas a endoglina fue significativamente mayor en embriones ogly más más en comparación con embriones ogly más menos.Una vez dominada, cada embrión puede inyectarse y visualizarse en 15 minutos si la técnica se realiza adecuadamente.

contrast-imaging-in-mouse-embryos-using-high-frequency-ultrasound

Research

Investigación

JoVE Journal

Developmental Biology

Biología del Desarrollo

En la cirugía de la supervivencia en ratones in utero permite la manipulación molecular de la expresión génica durante el desarrollo. A continuación se describe el uso de alta frecuencia, la ecografía para guiar la inyección de vectores retrovirales en el cerebro del ratón en el día embrionario (E) 9.5.

Guiada por ultrasonido microinyección en el cerebro anterior Ratón In Utero En E9.5

La muerte fetal y perinatal es una característica común en el estudio de las alteraciones genéticas que afectan el desarrollo cardíaco. Alta frecuencia de imágenes por ultrasonido ha mejorado en 2-D y resolución pueden proporcionar información relevante sobre el desarrollo cardíaco temprano y es un método ideal para detectar el impacto en la estructura y función cardíaca antes de la muerte.

La ecocardiografía fetal murino

Este video muestra un procedimiento para inyectar agentes de contraste de microburbujas en un embrión de ratón aislado en etapa de gestación tardía. Las imágenes de ultrasonido basadas en agentes de contraste de microburbujas ayudan a visualizar y caracterizar el entorno vascular del embrión.

Inyección de microburbujas en embriones aislados de ratón: una técnica para administrar agentes de contraste de microburbujas en la vasculatura de embriones murinos vivos

En este video, demostramos la ecografía de alta frecuencia para obtener imágenes de los sitios de implantación de embriones en un modelo murino embarazada. Esta técnica de imagen detecta con éxito el embarazo viable y caracteriza los sitios de implantación embrionaria durante el embarazo murino temprano.

Caracterización temprana del embarazo basada en ecografía de alta frecuencia: una técnica para estudiar la implantación embrionaria y la progresión del embarazo en un modelo murino embarazada

Ultra-alta frecuencia de ultrasonido es una poderosa herramienta de imágenes en directo para examinar anormalidades cardíacas en animales pequeños. Su carácter no invasivo permite el mantenimiento del estado fisiológico de los embriones. En este documento, se muestra el uso del modo M ultrasonido para medir el ritmo cardíaco de los embriones en E18.5 en el útero.

En el útero de medición de la frecuencia cardíaca en el ratón por no invasiva Ecocardiografía en modo M

Ratones son ampliamente utilizados para estudiar biología gestacional. Sin embargo, interrupción del embarazo se requiere para este tipo de estudios que impide investigaciones longitudinales y hace necesario el uso de grandes cantidades de animales. Por lo tanto, describimos una técnica no invasiva de la ecografía de alta frecuencia para la detección precoz y seguimiento de eventos tras la implantación en el ratón embarazado.

Un nuevo uso de la ecografía tridimensional de alta frecuencia para la caracterización de embarazo temprano en el ratón

Proyección de imagen de ultrasonido de alta frecuencia del ratón fetal ha mejorado la resolución de imagen y puede proporcionar la precisa caracterización no invasiva de desarrollo cardíaco y defectos estructurales. El protocolo descrito en este documento está diseñado para realizar la ecocardiografía ratones fetales en tiempo real en vivo.

Proyección de imagen usando un sistema del ultrasonido de alta frecuencia (30 / 45MHZ) Cardiovascular fetal ratón

Aquí describimos la técnica de ultrasonido de alta frecuencia para el análisis en vivo de fetos de ratones. Este método permite el seguimiento de los fetos y el análisis de parámetros placentarios, así como el flujo de sangre materna y fetal durante el embarazo.

Ultrasonido de alta frecuencia para el análisis del desarrollo Fetal y placentario en Vivo

El ultrasonido de alta resolución puede ayudar a agilizar los experimentos que requieren ratones embarazadas cronometando al determinar el estado del embarazo, la edad gestacional y las pérdidas del embarazo. Aquí se presenta un protocolo para ilustrar métodos para evaluar embarazos de ratón, así como posibles escollos (artefactos de imagen) que pueden imitar el embarazo.

¿Está mi ratón embarazada? Evaluación de ultrasonido de alta frecuencia

Este protocolo describe tres métodos sobre cómo obtener y utilizar embriones de pollo de 5 a 8 días de edad y su membrana corioalantoidea (CAM) como modelo in vivo para estudiar imágenes de ultrasonido con contraste y administración de fármacos mediada por microburbujas.

La preparación de embriones de pollo ex ovo y vasos de membrana corioalantoicos como modelo in vivo para imágenes de ultrasonido con contraste y estudios de administración de fármacos mediados por microburbujas

Presentamos un protocolo detallado para el cultivo de embriones de ratón y la obtención de imágenes que permite obtener imágenes 3D + tiempo de células progenitoras cardíacas. Este kit de herramientas de video aborda las habilidades clave requeridas para obtener imágenes en vivo exitosas que de otro modo serían difíciles de adquirir de publicaciones de solo texto.

Imágenes en vivo de progenitores cardíacos tempranos en el embrión de ratón

Aprende a inyectar microburbujas en embriones de ratón vivos para imagenología de ultrasonido de alta frecuencia con contraste. Este método permite evaluar parámetros de perfusión vascular y unión de microburbujas dirigidas en estudios de biología del desarrollo.

Imágenes de contraste en embriones de ratón Uso de alta frecuencia de ultrasonido

Explorar más videos