El uso de Chironomidae (Diptera) en superficie flotante pupal Exuviae como Protocolo Bioassessment rápida para las Masas de Agua

El objetivo general de este procedimiento es describir las técnicas de recolección y procesamiento de muestras de pupilas flotantes de superficie para la evaluación de la calidad del agua. Esto se logra recolectando primero muestras de campo de Chiron pupil ex de ambientes acuáticos. En el segundo paso, se selecciona una submuestra de 300 especímenes de cada muestra de campo, y las muestras se separan en distintos grupos morfológicos.

En el paso final, varios representantes de cada grupo se montan en portaobjetos de microscopio de vidrio. En última instancia, los especímenes se identifican por género o especie para evaluar las condiciones de calidad del agua. La principal ventaja de esta técnica sobre los métodos existentes, como el muestreo tradicional de macroinvertebrados bentónicos, es que la recolección y el procesamiento de las muestras son eficientes, económicos y aplicables en casi todos los ambientes acuáticos.

El uso de esta técnica proporciona información valiosa para los estudios de monitoreo biológico y puede proporcionar información sobre cómo cambian los sitios con el tiempo debido a perturbaciones, eventos de contaminación o cambio climático. Aunque nos estamos enfocando en cómo se puede usar esta técnica en el hábitat de un arroyo, se puede aplicar fácilmente a otros sistemas acuáticos como ríos, lagos, estanques, es, jurados o pozas de rocas antes de entrar en el campo. Coloque una etiqueta de fecha y localidad en el interior, y una etiqueta en el exterior de un frasco de muestra para cada muestra que se recolecte.

Luego, para cada muestra con una bandeja para larvas en una mano y un tamiz en la otra, sumerja la bandeja para larvas en el agua donde se acumulan los exudados de las pupilas cuando el exus de la pupila de agua y los desechos han ingresado a la bandeja para larvas o a la muestra a través del tamiz. Después de 10 minutos de recolección, use una botella llena de agua recolectada del alcance de la muestra para concentrar cualquier residuo en un área del tamiz. Luego, usando pinzas y un chorro de etanol, transfiera con cuidado el exus de la pupila al frasco de muestra preetiquetado apropiado y llene el frasco con etanol.

Para comenzar la selección de la muestra, coloque la fecha y la etiqueta de localidad apropiadas en un vial Dr. para cada muestra de exudado de alumno y llene el vial tres cuartas partes con etanol. A continuación, retire la tapa del frasco de muestra correspondiente y verifique si hay alguna pupila ex adherida a la tapa. Con una botella rociadora de etanol, enjuague suavemente el contenido de la tapa y colóquelo en una placa de Petri.

A continuación, retire la etiqueta del interior del tarro de muestra. Enjuaga suavemente el contenido de la etiqueta y colócalo en la placa de Petri y deja la etiqueta a un lado. A continuación, transfiera el contenido del tarro de muestra a una bandeja blanca para larvas y enjuague el tarro con etanol para asegurarse de que no quede exudado de pupila en el tarro.

Transfiera una elocuente porción del residuo de exudado de la pupila y el etanol de la bandeja de larvas a la placa de Petri. Asegúrese de que la muestra esté cubierta de etanol. A continuación, coloque la placa de Petri bajo un microscopio estereoscópico y escanee sistemáticamente la placa en busca de los organismos.

A continuación, utilice fórceps para transferir el exudado de la pupila de la placa al vial correspondiente adecuado. Trate de evitar recoger el exudado de la pupila que esté roto o seco para evitar problemas de identificación posteriores. Cuando se haya transferido todo el exudado visible de la pupila, agite y escanee el plato tres veces más en busca de muestras adicionales, incluidas las que puedan estar pegadas a los lados del plato.

Cuando se hayan seleccionado 300 pupilas exe, devuelva el residuo de la placa de Petri a la bandeja de larvas y enjuague la placa de Petri con etanol. A continuación, transfiera el residuo de la bandeja de larvas al frasco de muestra vacío. Agregue la etiqueta de fecha y localidad al frasco y coloque la tapa encima del frasco para clasificar las muestras.

Vierta el exus de la pupila del frasco etiquetado en una placa de Petri llena de suficiente etanol para cubrir las muestras. A continuación, bajo un microscopio estereoscópico, utilice las características morfológicas externas del Chiron Pub ex para separar los especímenes en axa morfa y transfiera los diferentes axa morfo a viales marcados por separado. Los tres cuartos llenos de etanol o ejemplo al clasificar por el Celi thax utilizan las diferencias en la presencia, tamaño, forma y coloración del cuerno torácico para distinguir los especímenes.

Si clasifica por el abdomen, use las espinas, los pelos y los espolones de los segmentos abdominales y el lóbulo anal para la separación de la morfina. Después de la clasificación, llene un pocillo de una placa de pocillos múltiples para cada axón morfo con etanol al 95% y coloque múltiples representaciones de cada taxón morfo en pocillos individuales de la placa durante al menos 10 minutos para permitir una desecación suficiente. Luego, mientras las muestras se secan, etiquete los portaobjetos con la colección del sitio adecuada y la información de identificación para montar el exus de personas.

Pega una plantilla del portaobjetos a la platina de un microscopio y coloca un portaobjetos encima de esta plantilla. A continuación, extienda una gota de URL en el portaobjetos de forma que se aproxime al tamaño de un cubreobjetos y utilice unas pinzas para golpear suavemente un representante del primer axón morph en una toallita de laboratorio para eliminar el exceso de etanol. Ahora incruste el espécimen en la URL y use pinzas con punta de lomo y una sonda de disección para separar el sepha thax del abdomen.

El aspecto más difícil de este procedimiento es desarrollar la destreza manual necesaria para diseccionar el cefalón del abdomen durante el montaje de la corredera. Para asegurar el éxito de la disección, use pinzas de punta fina o sondas de disección para separar el exe entre el thax cefálico y el primer segmento abdominal. Como se ha demostrado, dividir el texo cefálico a lo largo de la sutura esal.

A continuación, abra el táxaxo cefálico de modo que los bordes de la sutura queden en lados opuestos, y oriéntelo de modo que el lado ventral se espacie. Coloque el abdomen con el lado dorsal hacia arriba y colóquelo inmediatamente debajo del saphá thax. Luego, sosteniendo una cubierta en un ángulo con una pulgada tocando la corredera, baje lentamente y deje caer la cubierta para reducir la formación de burbujas de aire.

Finalmente, presione ligeramente sobre el cubreobjetos para aplanar el espécimen y use un microscopio compuesto para determinar el género del espécimen montado en portaobjetos. En estos gráficos, se muestran las curvas de acumulación taxonómica para muestras de pupilas ex recolectadas en 16 lagos urbanos de Minnesota para determinar el número de especies en general dentro de cada lago. Cada línea de datos representa uno de los lagos, y cada punto de datos representa una muestra mensual recolectada de abril a octubre de 2005, lo que demuestra que la adquisición de cuatro muestras por lago recuperó la mayoría de la comunidad de Quirón y detectó cualquier variación estacional importante dentro de los lagos. Los estudios de monitoreo a largo plazo de quirones se pueden utilizar para evaluar el cambio climático en los lagos de Minnesota, ya que los cambios en las variables ambientales, como la profundidad del lago y la concentración de fósforo, pueden afectar las especies acumulativas detectadas a través de un gradiente de químicas lacustres.

De hecho, como ilustra este gráfico, el número acumulado de especies encontradas aumenta a medida que aumenta la relación entre la concentración media de fósforo y la profundidad media. El paso más crítico para la recolección exitosa de exudado de la pupila es ubicar las áreas de alta acumulación de exudado dentro del área de estudio. Al comenzar las muestras en el laboratorio, es importante escanear el contenido de la placa de Petri lentamente, ya que algunas muestras pueden pigmentarse ligeramente y adherirse al tamaño de la placa.

Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo recolectar y procesar muestras de pupilas flotantes de superficie omie para proyectos destinados a monitorear y evaluar la calidad del agua.