Un ensayo de conducta Barato, escalable para medir etanol Sedación La sensibilidad y la tolerancia rápida en

El objetivo general del siguiente experimento es evaluar la sensibilidad a la sedación por etanol en moscas de la fruta. Esto se logra colocando moscas en viales y exponiéndolas a vapor de etanol. El segundo paso consiste en determinar el número de moscas que están sedadas en cada vial en intervalos de tiempo periódicos hasta que todas las moscas estén sedadas.

A continuación, se interpola el punto temporal. Cuando el 50 % de las moscas están sedadas en cada vial, los resultados muestran un índice del tiempo necesario para sedar moscas de la fruta con etanol, demostrando que este procedimiento lo realizará hoy Simran Sindu, una estudiante en mi laboratorio. Para comenzar el experimento, recolecte moscas en viales con alimento fresco en grupos de 11 de un mismo sexo durante hasta cinco minutos de CO2, y permita que las moscas se recuperen durante la noche en viales con alimento en un espacio controlado ambientalmente.

Prepare una solución de etanol diluyendo etanol puro al 100 % en agua purificada hasta una concentración final del 85 %. Deje que la solución alcance la temperatura ambiente durante la noche antes del ensayo. Prepare un vial de alimento limpio y vacío, que servirá como vial de prueba. Tenga listo un nuevo tapón de acetato de celulosa, un tapón de silicona y un mililitro de solución de etanol para cada vial de moscas que se vaya a probar. Ajuste la temperatura ambiente a entre 20 y 25 grados Celsius y la humedad relativa a entre 55 y 65 %. Asigne a otro trabajador la tarea de asignar un código único a cada grupo de viales y de registrar dicho código para su uso posterior. Coloque los viales codificados con las moscas en la sala de pruebas para que se aclimaten durante unos minutos. A continuación, etiquete los viales de prueba vacíos para que coincidan con los códigos de los viales de moscas.

Elabore un registro impreso de pruebas ingresando los códigos en columnas, con una columna por vial, en una hoja de cálculo. Utilizando el registro de pruebas como guía, organice los viales codificados con alimento y moscas, junto con los viales de prueba vacíos, en arreglos coincidentes en la sala de pruebas; luego transfiera las moscas de los viales de alimento a los viales de prueba emparejados y etiquetados, una a la vez.

Luego, inserte inmediatamente tapones de acetato de celulosa en los viales de prueba hasta que los tapones queden a dos centímetros por debajo de los extremos de los viales. Para la evaluación del tiempo cero, sostenga cada vial individualmente con el pulgar y el índice.

Toque suavemente la mesa tres veces para hacer caer a las moscas al fondo del vial. Espere 30 segundos y cuente el número de moscas que están inmóviles y/o muertas. Registre el número de moscas inmóviles y muertas para cada vial en cada momento.

Cero minutos en el registro impreso de pruebas. Inicie el cronómetro en el tiempo cero y agregue inmediatamente un mililitro de etanol al acetato de celulosa. Agite en movimiento circular a intervalos de cinco segundos para el primer conjunto de cuatro viales en orden.

Se realizará la prueba cuando se haya agregado etanol a los cuatro viales de ensayo del conjunto. Inserte un tapón de silicona en cada vial para sellarlo a los 1, 2, 3, 4 y cinco minutos. Añada un mililitro de etanol al segundo, tercer, cuarto, quinto y sexto conjunto de cuatro viales, respectivamente.

Continúe insertando tapones de silicona después de agregar etanol a cada conjunto de cuatro viales LS a los seis minutos. Pruebe el primer conjunto de cuatro viales sujetando cada vial con el pulgar y el índice y golpeando suavemente tres veces sobre la mesa para hacer caer a las moscas al fondo del vial. Espere 30 segundos, luego cuente y registre el número total de moscas que están sedadas.

Puntúe las moscas como sedadas si, uno, permanecen en el fondo del vial sin caminar, o dos, yacen sobre sus espaldas con o sin agitar sus alas. Manipule cada vial del conjunto a intervalos de cinco segundos siguiendo este horario en los tiempos de 7, 8, 9, 10 y 11 minutos.

Pruebe el segundo, tercer, cuarto, quinto y sexto conjunto de viales respectivamente como se hizo con el primer conjunto a los 12 minutos. Vuelva a probar el primer conjunto de cuatro viales y continúe probando el segundo, tercer, cuarto, quinto y sexto conjunto de viales a los 13, 14, 15, 16 y 17 minutos respectivamente. Continúe probando las moscas hasta que todas estén sedadas.

Introduzca el número total de moscas en cada vial en la prueba impresa. Registre las moscas inmóviles o muertas detectadas por el sensor en el tiempo cero a partir del número total de moscas. Los datos brutos del ensayo de sedación con etanol se convirtieron al porcentaje de moscas activas en función del tiempo.

La sensibilidad a la sedación por etanol a partir de los datos primarios se cuantificó como el tiempo de sedación 50 o ST 50. El tiempo necesario para que el 50 % de las moscas quedaran sedadas o el área bajo la curva o a UC. El ensayo detecta los efectos del ARNip contra calnexina 14 D en el sistema nervioso, lo cual redujo la sensibilidad al etanol en comparación con los controles, la mutación de scab y rouser, aumentó la sensibilidad a la sedación por etanol y la mutación de happy hour. Sensibilidad reducida a la sedación por etanol en comparación con los controles una vez dominado.

Esta técnica puede realizarse en una hora y media si se lleva a cabo correctamente.