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DOI: 10.3791/52803-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study aims to evaluate the physiological initiation of vaccine-specific adaptive immunity using a combination of reverse genetics and bone marrow chimeric mice. The focus is on understanding the early host immune responses, particularly the roles of dendritic cells and T cell immunity.
Hay una falta general de conocimiento sobre cómo funcionan las vacunas. Aquí proponemos el uso combinado de genética inversa y ratones quiméricos de médula ósea para obtener información sobre las respuestas inmunitarias tempranas del huésped a las vacunas, con un enfoque especial en las células dendríticas y la inmunidad de las células T.
El objetivo general de este procedimiento es describir un sistema para evaluar el inicio fisiológico de la inmunidad adaptativa específica de la vacuna. Esto se logra primero, utilizando la genética inversa para generar vacunas vivas atenuadas contra la influenza que contienen un péptido inmunogénico específico, y luego usando un embrión de pollo para multiplicar el virus. A continuación, se extraen células de los ganglios linfáticos de los ratones vacunados y se utiliza el análisis por fax para rastrear la migración de las células dendríticas.
En el siguiente ensayo, las células T CD ocho positivas reactivas al péptido inmunogénico se marcan y se inyectan en ratones vacunados, seguidas de un análisis por fax para medir la proliferación de esas células y analizar la respuesta inmunitaria con más detalle. Un espejo de campana de médula ósea competitivo se fabrica mediante la infusión de un receptor de toxina difteria que expresa células de médula ósea en ratones congénitos irradiados, que luego se exponen a la toxina difteria. Después de una depleción exitosa, el ratón se vacuna y se utilizan anticuerpos y tetrámeros marcados para identificar las células T CD ocho positivas.
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