Diferenciación neural de células madre embrionarias de ratón en el suero libre de monocapa Cultura

El objetivo general de este procedimiento es diferenciar las células madre embrionarias de ratón en un linaje neural en un cultivo de células monocapa libres de suero. Esto se logra recubriendo primero el recipiente de cultivo con gelatina. En el segundo paso, las células madre embrionarias se asocian en una sola suspensión celular en medio de diferenciación y se diluyen a las densidades de siembra adecuadas.

En el paso final, las células se siembran en la placa recubierta de gel ENC. En última instancia, la microscopía de inmunofluorescencia se utiliza para confirmar el éxito de la diferenciación mediante la visualización de los marcadores neuronales de interés. Por lo general, las personas nuevas en este método tendrán dificultades, ya que el recubrimiento a la densidad adecuada es fundamental para lograr una buena diferenciación.