Name: La determinación de Preferencias ultrasónico Vocalización en ratones utilizando una prueba de reproducción de dos elección (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-09-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 16 s
Description: Aprende a determinar preferencias de vocalizaciones ultrasónicas en ratones mediante una prueba de reproducción de dos elecciones. Este método permite evaluar respuestas conductuales y comprender la comunicación murina.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Este trabajo fue apoyado por una subvención-en-Ayudas a JSP becarios a AA; por subvenciones-en-Ayudas a la Investigación Científica en Áreas innovadoras para JSP Fellows (Nº 4501 y Nº 25132712) a los conocimientos tradicionales; y con una donación proyecto de investigación otorgado por la Universidad de Azabu. Figura 2 se reimprime de Kihara, T., Harada, T., y Koshida, fabricación y características de silicio nanocristalino inducidos térmicamente emisores de ultrasonido compatible con la oblea N.. En: Los sensores y actuadores A: físicas, volumen 125, Elsevier, p. 426, (2006), con permiso de Elsevier.

<html> Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité de Ética de la Universidad de Azabu. Todos los experimentos se llevaron a cabo en una cámara insonorizada. 1. Preparación Animal <ol><li> Machos para grabación <ol><li> Obtener ratones machos sexualmente maduros con experiencia en el apareamiento. </li></ol></li><li> Los sujetos femeninos <ol><li> Obtener ratones hembra virgen que han sido alojados con 2 a 5 compañeros de camada por jaula (generalmente 8 - 12 semanas de edad). </li><li> Obtener frotis vaginal a diario para determinar la fase del ciclo estral antes de la prueba, según McLean 21. Se debe tener cuidado para minimizar la estimulación vaginal para evitar pseudopreñez. </li><li> Tinción de los frotis con Giemsa, y determinar la fase del ciclo estral en base a la presencia o ausencia de leucocitos, células epiteliales cornificadas y células epiteliales nucleadas, de acuerdo con Nelson 22. </li></ol></li></ol> 2. Dispositivos (Figura 1) _content &quot;&gt; <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/53074/53074fig1.jpg" /> Figura 1. Esquema de la Dos-elección Box Prueba y Dispositivos. Los ratones pueden acceder a salas A y B a través de las pequeñas puertas situadas entre ellos y la zona neutral. La caja de dos elección y dos emisores de ultrasonido se coloca en el suelo de una cámara insonorizada. El micrófono está suspendido dentro de la cámara a prueba de sonido. Abreviatura:. PC, computadora personal <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53074/53074fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a> <ol><li> Para Grabación <ol><li> Conecte un micrófono de condensador de ultrasonidos a un PC mediante un convertidor de USB A / D. </li><li> Ajuste el nivel de ganancia del convertidor A / D a &quot;7&quot;. </li><li> Datos acústicos de Registros en archivos de formato de 16 bits con una frecuencia de muestreo de 400 kHz utilizando el software de captura de audio. </li></ol></li><li> Para la reproducción <ol><li> Conecte un convertidor D / A a la PC usandouna interfaz USB. </li><li> Conecte dos amplificadores al convertidor D / A través de un atenuador. (Este último dispositivo sirve para evitar la sobrecarga.) </li><li> Conectar un emisor de ultrasonido para cada amplificador. </li></ol></li></ol> 3. USV grabación <ol><li> Coloque un ratón macho en una pequeña (17 x 10 x 11 cm) o (21 x 14 x 13 cm) jaula de tamaño mediano con un agujero de 6 cm de diámetro en la pared lateral y el agujero cubierto con una malla de alambre de 0,5 cm. Cuando se utiliza una jaula de tamaño mediano, la construcción de una partición a través del centro de la jaula para reducir el área. </li><li> No use ropa de cama en la jaula para evitar ruidos susurrantes que podrían contaminar las grabaciones. </li><li> Coloque un micrófono al lado de la malla. </li><li> Comience monitoreo vocalización ultrasónica con la configuración de la grabación se muestra en el paso 2.1. </li><li> Colocar un ratón hembra sexualmente maduros, ya sea en metaestro o diestro en la jaula con el ratón macho. </li><li> USVs récord para 3-5 min. </li></ol> 4. Test Box <ol><li> Construir la caja de prueba utilizando tablero de acrílico (Figura 1). Nota: La caja de prueba (35 x 20 y 20 x cm de alto) se divide en tres compartimentos: una zona neutra (15 x 20 cm), y salas A y B (20 x 10 cm, cada uno). Habitaciones A y B tienen cada uno un agujero de 4 cm de diámetro que está cubierto con una malla de alambre de 0,5 cm. Los agujeros de malla y están situados en cada extremo de habitaciones A y B. Hacer puertas (5 x 5 cm cada uno) entre la zona neutral y habitaciones A y B. </li><li> Para evitar la pérdida de sonido aislar cada emisor de ultrasonido, excepto por el lado orientado hacia la malla, usando placas de caucho, sellándolos a la caja alrededor del perímetro de cada malla. </li><li> Lugar sellos de plomo en ambos lados de la pared entre las habitaciones A y B para el aislamiento acústico. </li></ol> 5. Preparación para la reproducción de sonido <ol><li> Creación de sonidos de reproducción <ol><li> Captura de un segmento de 20 segundos de USV del archivo grabado utilizando el software de edición de audio digital. </li><li> Seleccione y captar el fondo sinise (0,35 segundos) desde el archivo segmento sec USV 20. Cree un archivo de ruido de fondo 20 seg repitiendo el segmento de ruido. </li><li> Para reproducir los dos archivos de sonido simultáneamente, exportarlos como un solo archivo de sonido estéreo, con un archivo de la &quot;oreja izquierda&quot; y el otro archivo para el &quot;oído derecho.&quot; </li><li> Filtra los archivos de sonido utilizando como filtro de paso alto con un corte de 40 kHz. </li><li> Reduzca el ruido con la función de reducción de ruido en el software de post-procesamiento. Seleccione y capturar un segmento del archivo que contiene USVs como el perfil de reducción de ruido, y ejecutar la reducción de ruido con el nivel 40. </li></ol></li><li> Calibración de los sonidos de reproducción <ol><li> Asegúrese de que el espacio entre los emisores de ultrasonido y el micrófono es de 10 cm. </li><li> Para calibrar los niveles de presión de sonido de los emisores de ultrasonido, realizar monitoreo ultrasónica usando la configuración descrita en el paso 2.1. Medir el nivel de presión de sonido por el micrófono en decibelios (dB). </li><li> Using el atenuador y los amplificadores, ajustar el volumen de los USVs generadas por los emisores de ultrasonido para el mismo nivel de presión de sonido como los USVs masculinos registrado en el paso 3. </li><li> Al utilizar los dos emisores de ultrasonidos y un archivo de sonido compuesto por USVs y el ruido de fondo, confirmar que los dos emisores de ultrasonidos presentan el mismo nivel de presión de sonido con un sonido de calibración (por ejemplo, un tono puro de 75 kHz) antes de realizar la prueba de comportamiento. </li><li> Al reproducir un archivo de sonido compuesta de dos corrientes de USVs, ajustar los dos niveles de presión de sonido generado al mismo nivel, antes de la prueba. </li></ol></li></ol> 6. Prueba de dos elección <ol><li> Coloque los emisores de ultrasonido detrás de las mallas de la caja de prueba. </li><li> Cerrar las puertas a las salas A y B con un tablero de acrílico, y habituarse al sujeto femenino a la zona neutral durante 30 min. Cubra la caja con tablero de acrílico para evitar que el ratón puede escapar. </li><li> Inicie la grabación de vídeo con un CCCámara D montado en la caja. La cámara (no mostrada en la figura 1) cubre el área de todos los tres compartimientos. </li><li> Retire la puerta y la cubierta a bordo y permitir a la hembra para explorar libremente la caja de prueba, incluyendo las zonas de sonido. </li><li> Una vez que la hembra ha investigado ambas mallas, y ha vuelto a la zona neutral, empezar a jugar un archivo de sonido de 20 segundos en varias ocasiones durante 5 o 10 minutos. </li><li> Llevar a cabo el monitoreo del comportamiento durante 5 o 10 minutos. </li><li> Para reducir señales olfativas deseadas depositado a partir de la materia anterior, limpiar las jaulas de ensayo entre los ensayos con etanol al 70%. </li><li> Cambiar el lugar de emisores de ultrasonidos A y B al azar para evitar el efecto de sesgo lateral inherente hacia salas A o B. </li></ol> 7. Análisis estadísticos <ol><li> El uso de software evento puntuable del comportamiento, análisis de los siguientes parámetros: número total de entradas en cada habitación; duración total de la estancia en cada zona media; duración total de la estancia en cada zona de sonido; yduración total de búsqueda de cada malla en frente del emisor de ultrasonidos. Figura 1 ilustra lo que se entiende por &quot;zona intermedia&quot; y &quot;zona de sonido.&quot; Nota: En los casos en que el ratón se mantiene en la línea divisoria entre las dos zonas (Figura 1, línea discontinua) decidir la ubicación de la dirección de la cabeza. Cuando la cabeza se enfrenta al lado de la malla, se anotó como una estancia en la zona de sonido. </li><li> Para cada parámetro del comportamiento, comparar las respuestas de las habitaciones A y B mediante una prueba de rangos de Wilcoxon firmado-o T-pruebas pareadas con un nivel de significación de 0,05. </li></ol>

<ol><li>Panksepp, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affiliative+behavior%2C+ultrasonic+communication+and+social+reward+are+influenced+by+genetic+variation+in+adolescent+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Affiliative behavior, ultrasonic communication and social reward are influenced by genetic variation in adolescent mice.</a> PLoS One. 2 (4), e351(2007).</li>
<li>Scattoni, M. L., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+adult+BTBR+T%2Btf%2FJ+mice+during+three+types+of+social+encounters%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Unusual repertoire of vocalizations in adult BTBR T+tf/J mice during three types of social encounters.</a> Genes Brain Behav. 10 (1), 44-56 (2010).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+and+usage+of+female+and+male+mouse+ultrasonic+vocalizations+reveal+only+minor+differences%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The structure and usage of female and male mouse ultrasonic vocalizations reveal only minor differences.</a> PLoS One. 7 (7), e41133(2012).</li>
<li>Merten, S., Hoier, S., Pfeifle, C., Tautz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+ultrasonic+vocalisation+in+social+communication+and+divergence+of+natural+populations+of+the+house+mouse+%28Mus+musculus+domesticus%29%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A role for ultrasonic vocalisation in social communication and divergence of natural populations of the house mouse (Mus musculus domesticus).</a> PLoS One. 9 (5), e97244(2014).</li>
<li>Amato, F. R., Moles, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations+as+an+index+of+social+memory+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations as an index of social memory in female mice.</a> Behav. Neurosci. 115 (4), 834-840 (2001).</li>
<li>Chabout, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+male+mice+emit+context-specific+ultrasonic+vocalizations+that+are+modulated+by+prior+isolation+or+group+rearing+environment%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Adult male mice emit context-specific ultrasonic vocalizations that are modulated by prior isolation or group rearing environment.</a> PLoS One. 7 (1), e29401(2012).</li>
<li>Ehret, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infant+rodent+ultrasounds%E2%80%93a+gate+to+the+understanding+of+sound+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Genet%22%5BJournal%5D)">Infant rodent ultrasounds–a gate to the understanding of sound communication.</a> Behav. Genet. 35 (1), 19-29 (2005).</li>
<li>Holy, T. E., Guo, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+songs+of+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic songs of male mice.</a> PLoS Biol. 3 (1), e386(2005).</li>
<li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Assoc.+Lab.+Anim.+Sci%22%5BJournal%5D)">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. 46 (1), 28-34 (2007).</li>
<li>Holfoth, D. P., Neilans, E. G., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+partial+from+whole+ultrasonic+vocalizations+using+a+go%2Fno-go+task+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Acoust.+Soc.+Am%22%5BJournal%5D)">Discrimination of partial from whole ultrasonic vocalizations using a go/no-go task in mice.</a> J. Acoust. Soc. Am. 136 (6), 3401(2014).</li>
<li>Neilans, E. G., Holfoth, D. P., Radziwon, K. E., Portfors, C. V., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+ultrasonic+vocalizations+by+CBA%2FCaJ+mice+%28Mus+musculus%29+is+related+to+spectrotemporal+dissimilarity+of+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Discrimination of ultrasonic vocalizations by CBA/CaJ mice (Mus musculus) is related to spectrotemporal dissimilarity of vocalizations.</a> PLoS One. 9 (1), e85405(2014).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+respond+to+male+ultrasonic+%E2%80%98songs%E2%80%99+with+approach+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Lett%22%5BJournal%5D)">Female mice respond to male ultrasonic ‘songs’ with approach behaviour.</a> Biol. Lett. 5 (5), 589-592 (2009).</li>
<li>Musolf, K., Hoffmann, F., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+courtship+vocalizations+in+wild+house+mice%2C+Mus+musculus+musculus%5BTitle%5D)+AND+%22Anim.+Behav%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic courtship vocalizations in wild house mice, Mus musculus musculus.</a> Anim. Behav. 79 (3), 757-764 (2010).</li>
<li>Asaba, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+social+environment+imprints+female+preference+for+male+song+in+iice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Developmental social environment imprints female preference for male song in iice.</a> PloS one. 9 (2), e87186(2014).</li>
<li>Uematsu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+approaches+to+pup+ultrasonic+vocalizations+produced+by+a+nanocrystalline+silicon+thermo-acoustic+emitter%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Maternal approaches to pup ultrasonic vocalizations produced by a nanocrystalline silicon thermo-acoustic emitter.</a> Brain Res. 1163, 91-99 (2007).</li>
<li>Okabe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+social+experience+and+gonadal+hormones+on+retrieving+behavior+of+mice+and+their+responses+to+pup+ultrasonic+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22Zoolog.+Sci%22%5BJournal%5D)">The effects of social experience and gonadal hormones on retrieving behavior of mice and their responses to pup ultrasonic vocalizations.</a> Zoolog. Sci. 27 (10), 790-795 (2010).</li>
<li>Okabe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pup+odor+and+ultrasonic+vocalizations+synergistically+stimulate+maternal+attention+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pup odor and ultrasonic vocalizations synergistically stimulate maternal attention in mice.</a> Behav. Neurosci. 127 (3), 432-438 (2013).</li>
<li>Shinoda, H., Nakajima, T., Ueno, K., Koshida, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermally+induced+ultrasonic+emission+from+porous+silicon%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Thermally induced ultrasonic emission from porous silicon.</a> Nature. 400 (6747), 853-855 (1999).</li>
<li>Kihara, T., Harada, T., Koshida, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wafer-compatible+fabrication+and+characteristics+of+nanocrystalline+silicon+thermally+induced+ultrasound+emitters%5BTitle%5D)+AND+%22Sensor.+Actuat.+A-Phys%22%5BJournal%5D)">Wafer-compatible fabrication and characteristics of nanocrystalline silicon thermally induced ultrasound emitters.</a> Sensor. Actuat. A-Phys. 125 (2), 422-428 (2006).</li>
<li>Kikusui, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross+fostering+experiments+suggest+that+mice+songs+are+innate%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Cross fostering experiments suggest that mice songs are innate.</a> PloS One. 6 (3), e17721(2011).</li>
<li>McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+Vaginal+Lavage%2C+Crystal+Violet+Staining%2C+and+Vaginal+Cytological+Evaluation+for+Mouse+Estrous+Cycle+Staging+Identification%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification.</a> J. Vis. Exp. (67), e4389(2012).</li>
<li>Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+longitudinal+study+of+estrous+cyclicity+in+aging+C57BL%2F6J+mice%3A+I.+Cycle+frequency%2C+length+and+vaginal+cytology%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology.</a> Biol. Reprod. 27 (2), 327-339 (1982).</li>
<li>Tomihara, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+ER-beta+gene+disruption+on+estrogenic+regulation+of+anxiety+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Effect of ER-beta gene disruption on estrogenic regulation of anxiety in female mice.</a> Physiol. Behav. 96 (2), 300-306 (2009).</li>
<li>Zheng, Q. Y., Johnson, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+associated+with+the+modifier+of+deaf+waddler+%28mdfw%29+locus+corresponds+with+age-related+hearing+loss+in+12+inbred+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hear.+Res%22%5BJournal%5D)">Hearing loss associated with the modifier of deaf waddler (mdfw) locus corresponds with age-related hearing loss in 12 inbred strains of mice.</a> Hear. Res. 154 (1-2), 45-53 (2001).</li>
<li>Haga, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+male+mouse+pheromone+ESP1+enhances+female+sexual+receptive+behaviour+through+a+specific+vomeronasal+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The male mouse pheromone ESP1 enhances female sexual receptive behaviour through a specific vomeronasal receptor.</a> Nature. 466 (7302), 118-122 (2010).</li>
<li>Grimsley, J. M., Monaghan, J. J., Wenstrup, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+social+vocalizations+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Development of social vocalizations in mice.</a> PLoS One. 6 (3), e17460(2011).</li>
<li>Sugimoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+strain+differences+in+waveforms+of+ultrasonic+vocalizations+during+male-female+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A role for strain differences in waveforms of ultrasonic vocalizations during male-female interaction.</a> PLoS ONE. 6 (7), (2011).</li>
<li>Hanson, J. L., Hurley, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+presence+and+estrous+state+influence+mouse+ultrasonic+courtship+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Female presence and estrous state influence mouse ultrasonic courtship vocalizations.</a> PLoS One. 7 (7), e40782(2012).</li>
<li>Wang, H., Liang, S., Burgdorf, J., Wess, J., Yeomans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations+induced+by+sex+and+amphetamine+in+M2%2C+M4%2C+M5+muscarinic+and+D2+dopamine+receptor+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations induced by sex and amphetamine in M2, M4, M5 muscarinic and D2 dopamine receptor knockout mice.</a> PLoS One. 3 (4), (2008).</li>
<li>Moles, A., Kieffer, B. L., D'Amato, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficit+in+attachment+behavior+in+mice+lacking+the+mu-opioid+receptor+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Deficit in attachment behavior in mice lacking the mu-opioid receptor gene.</a> Science. 304 (5679), 1983-1986 (2004).</li>
<li>Hiramoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tbx1%3A+identification+of+a+22q11.2+gene+as+a+risk+factor+for+autism+spectrum+disorder+in+a+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet%22%5BJournal%5D)">Tbx1: identification of a 22q11.2 gene as a risk factor for autism spectrum disorder in a mouse.</a> Hum. Mol. Genet. 20 (24), 4775-4785 (2011).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absence+of+deficits+in+social+behaviors+and+ultrasonic+vocalizations+in+later+generations+of+mice+lacking+neuroligin4%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Absence of deficits in social behaviors and ultrasonic vocalizations in later generations of mice lacking neuroligin4.</a> Genes Brain Behav. , (2012).</li>
<li>Roy, S., Watkins, N., Heck, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+analysis+of+ultrasonic+vocalizations+in+a+mouse+model+of+fragile+X+syndrome+reveals+limited%2C+call+type+specific+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Comprehensive analysis of ultrasonic vocalizations in a mouse model of fragile X syndrome reveals limited, call type specific deficits.</a> PLoS One. 7 (9), e44816(2012).</li>
</ol>

Los autores declaran que no tienen intereses contrapuestos.

Aquí, los resultados de una prueba representativa mostraron que los ratones hembra pueden discriminar entre USV machos artificiales y ruido de fondo (Figura 3). La conclusión que se extrae de estos resultados es que la señal de discriminación se refleja en la duración de la estancia en la habitación y la zona de sonido, y en la duración de la búsqueda de la malla en los primeros 5 min de prueba, pero no en los segundos 5 min (Figura 3C, E y F). Estos datos indican que los ratones se habi...

Muchos animales utilizan vocalizaciones para la comunicación intraespecífica. En el ratón Mus musculus, un tipo importante de la señal de comunicación es vocalizaciones ultrasónicas (USVs), que tienen frecuencias superiores a 20 kHz. USVs emitidos por los ratones se consideran un componente de reconocimiento social en hombre-mujer 1.4, hembra-hembra 1, 5 y macho-macho 1, 6 interacciones. USVs también son emitidos por los cachorros cuando están aislados de su madre, lo que aumenta su comportamiento cachorro-recuperación, y por lo tanto PUP supervivencia 7. Aunque muchos informes han analizado y categorizado USVs ratón 8, 9, las respuestas de comportamiento y mecanismos neurales del animal que recibe se han documentado menos 10, 11. Este último es necesario aclarar el significado biológico de las diversas características de USVs. Para revelar estos mecanismos, el experimento de reproducción es un método eficiente. Estudios recientes han revelado que la reproducción femeninaratones son atraídos a USVs 12, y que prefieren USVs de machos que son diferentes de sus padres 13, 14. En este artículo se explica la prueba de reproducción se utiliza para evaluar USV preferencia en ratones. Una caja de prueba de dos elección se desarrolló en el que dos USVs diferentes se pueden reproducir simultáneamente en dos compartimentos de un recinto de ensayo, como se muestra en la Figura 1. Este tipo de caja de prueba evita la contaminación sonora dividiendo el área de prueba en tres sub-cámaras , el uso de paredes de plomo. Los emisores de ultrasonidos se encuentran fuera de cada habitación. En la pared entre las habitaciones y emisores de ultrasonido son agujeros cubiertos con una malla de alambre. Los ratones pueden moverse libremente en las tres habitaciones, y muestran una &quot;búsqueda de la malla&quot; el comportamiento, como para responder a USVs reproducidas por los emisores de ultrasonido. En esta prueba, los ratones se mantienen durante períodos de diferente duración cerca de un emisor de sonido o el otro. Estos parámetros se pueden registrar para obtener un measu sensibles<html> re de la preferencia de sonido. Para reproducir los USVs espalda, emisores termo-acústico de silicio nanocristalino (es decir, &quot;nc-Si emisor&quot;) fueron utilizados como en estudios previos 15-17. Estos dispositivos se componen de un electrodo de película delgada calentador, una capa de silicio nano-poroso, y una oblea de silicio monocristalino. El archivo de sonido digital se convierte en una señal analógica y después se pasa a través del electrodo calefactor. El dispositivo convierte las señales térmicas dependientes de voltaje resultantes en presión sonora significativa con baja distorsión. Este dispositivo es único en que, a diferencia de los generadores de sonido comunes que dependen de las vibraciones mecánicas, se puede reproducir el sonido sin la necesidad de un diafragma. El emisor presenta un nivel de presión sonora plana en las frecuencias de 20 a 160 kHz (Figura 2), y puede reproducir USVs murinos grabados digitalmente con mucha precisión en cuanto a la duración, la frecuencia y el nivel de presión acústica 15, 18, ​​19. ve_content &quot;&gt; En un experimento representativo se muestra en la Figura 3, C57BL / 6 (B6) hembras se les permitió elegir entre BALB / c (BALB) USVs masculinos y ruido de fondo. Además, la Figura 4 muestra la elección de las hembras B6 y BALB entre reproducciones USV simultáneas desde un BALB y un macho B6, según ha informado en un estudio previo 14. Las características de USVs machos difieren entre B6 y BALB cepas 20. Como se muestra por estos resultados, el atractivo de USVs se puede evaluar con el presente Protocolo, en el que los sonidos se registran de un individuo vivo, acústicamente analizados, y se reproducen a otros individuos.

<table><tbody><tr><td>Cámara insonorizada</td><td>Muromachi Kikai</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Jaula pequeña</td><td>CLEA Japón</td><td>CL-0113-1</td><td></td></tr><tr><td>Jaula intermedia</td><td>CLEA Japón</td><td>CL-0103-1</td><td></td></tr><tr><td>Micrófonos de condensador de ultrasonidos</td><td>Avisoft Bioacoustics</td><td>CM16/CMPA</td><td></td></tr><tr><td>Convertidor A/D</td><td>Avisoft</td><td>Bioacoustics UltraSoundGate116H</td><td></td></tr><tr><td>Audio software</td><td>Avisoft Bioacoustics</td><td>RECORDER USGH</td><td></td></tr><tr><td>Adobe Audition 3.0 / Software de edición de audio</td><td>Adobe Systems</td><td>Adobe Audition 3.0</td><td></td></tr><tr><td>Emisor de Nc-Si</td><td>Original</td><td></td><td>no está disponible comercialmente, pero está previsto que lo esté en un futuro próximo</td></tr><tr><td>Convertidor D/</td><td>A National Instruments</td><td>NI USB-6251 BNC</td><td></td></tr><tr><td>Attenuator</td><td>Original</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Amplificador</td><td>Yamatake</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PC</td><td>Windows 7 profesional</td><td></td><td>Intel&reg; core i7-2600K CPU @ 3.4GHz, 8GB RAM, sistema operativo de 64 bits</td></tr><tr><td>Grabador de eventos Excel-macro / Software de puntuación de eventos</td><td>original</td><td></td><td>Programado por Naoto Akagawa & Takeru Yamamoto</td></tr><tr><td>Cámara</td><td></td><td></td><td></td>CCD</tr><tr><td>Placas de goma (hechas de resina elastómera)</td><td>Tokyo bouon</td><td>TI-75BK B4</td><td>Córtelos al tamaño adecuado http://www.piano-bouon.jp/shopping/?pid=1329272401-447630&ca=6&p=3</td></tr><tr><td>Solución de azul de metileno de eosina azur de Giemsa</td><td>Merck Millipore</td><td>1.09204.0500</td><td></td></tr></tbody></table>

la determinación de preferencias ultrasónico vocalización en ratones utilizando una prueba de reproducción de dos elección

Determining Ultrasonic Vocalization Preferences in Mice using a Two-choice Playback Test

Los ratones emiten vocalizaciones ultrasónicas (USV) durante una variedad de condiciones, como el aislamiento de los cachorros y las interacciones sociales de los adultos. Estos USV difieren con la edad, el sexo, la condición y los antecedentes genéticos del animal emisor. Aunque muchos estudios han caracterizado estas diferencias, aún no se ha dilucidado si los ratones receptores pueden discriminar entre USV objetivamente diferentes y mostrar preferencias por rasgos sonoros particulares. Para determinar si los ratones pueden discriminar entre diferentes características de los USV, recientemente se desarrolló un experimento de reproducción, en el que las respuestas de preferencia de los ratones a dos USV diferentes podrían evaluarse en forma de preferencia de lugar.
Primero, se registraron los USV de ratones. A continuación, los USV grabados se editaron, se recortaron en consecuencia y se exportaron como archivos de sonido estereofónico. A continuación, las amplitudes USV generadas por los dos emisores de ultrasonidos utilizados en el experimento se ajustaron al mismo nivel de presión sonora. Se utilizaron emisores termoacústicos de silicio nanocristalino para reproducir los USV. Finalmente, para investigar la preferencia de los ratones en cuestión a los USV seleccionados, se reprodujeron simultáneamente pares de dos señales de USV diferentes en una caja de prueba de dos opciones. Al entrar repetidamente en una zona definida cerca de un emisor de ultrasonidos y buscar en la malla de alambre delante del emisor, el ratón revela su preferencia por un sonido sobre otro. Este modelo permite comparar el atractivo de las diversas características de los USV de ratón, en varios contextos.

Los USVs registran de una BALB-macho (161 sílabas por 20 sec), así como el ruido de fondo se usaron como la reproducción de sonidos en el experimento representativo se muestra en la Figura 3. En este experimento, se utilizaron 7 ratones B6 hembra a 9 semanas de edad . Para determinar la mejor duración de las pruebas de respuesta femenina para reproducir los sonidos, los parámetros de comportamiento se analizaron por separado para los primeros y últimos cinco min de la época total de la ...

Las vocalizaciones ultrasónicas (USV) en ratones difieren según la edad, el sexo, la condición y los antecedentes genéticos. Utilizando dos emisores de ultrasonido que emiten simultáneamente en diferentes ubicaciones, esta prueba de dos opciones puede evaluar el reconocimiento murino y las respuestas de preferencia a diferentes características de los USV.

La determinación de Preferencias ultrasónico Vocalización en ratones utilizando una prueba de reproducción de dos elección

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, ...

El objetivo general de este procedimiento es determinar las preferencias de vocalizaciones ultrasónicas o USV en ratones mediante una prueba de reproducción de dos opciones. Esto se logra primero grabando USV de un individuo vivo. El segundo paso consiste en editar y recortar adecuadamente las USV grabadas y generar archivos de sonido estereofónicos.A continuación, se calibran los emisores de ultrasonidos y se ajusta el volumen de las USV. Mediante el atenuador y los amplificadores, el paso final consiste en introducir el ratón sujeto en la caja de prueba e iniciar la reproducción simultánea de los dos archivos de sonido. En última instancia, el monitoreo del comportamiento puede revelar si el ratón muestra preferencia por un sonido frente al otro.Los emisores de USV que hemos desarrollado pueden ayudarnos a responder preguntas clave sobre la comunicación por ultrasonidos, como las partes implicadas y el significado biológico de diferentes tipos de USV. La principal ventaja de nuestro emisor cáustico frente a dispositivos existentes como los transductores eléctricos Pazo es que la respuesta en frecuencia no presenta picos resonantes. La emisión de banda ancha en la región de ultras

determining-ultrasonic-vocalization-preferences-mice-using-two-choice

Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

Las vocalizaciones ultrasónicas de ratón se utilizan como sustitutos para modelar las bases genéticas de los déficits de comunicación vocal en modelos de ratón para trastornos neuropsiquiátricos. El presente protocolo describe tres contextos experimentales que provocan vocalizaciones ultrasónicas de forma fiable de cachorros (a lo largo del desarrollo) y ratones adultos (interacciones entre personas del mismo sexo, interacciones macho-estro para hembras).

Grabación de ratón de ultrasonidos Las vocalizaciones de Evaluación de la Comunicación Social

Los ratones producen un complejo repertorio multisilábico de vocalizaciones ultrasónicas (USVs). Estos USVs son ampliamente utilizados como lecturas de trastornos neuropsiquiátricos. Este protocolo describe algunas de las prácticas que aprendimos y desarrollamos para inducir, recopilar y analizar consistentemente las características acústicas y la sintaxis de las canciones del ratón.

Eliciando y analizando canciones masculinas de vocalización ultrasónica (USV)

Las vocalizaciones ultrasónicas de ratas y ratones de laboratorio (USVs) son útiles para estudiar la función vocal y neural. Este protocolo describe un paradigma de recompensa alimento que provoca de forma fiable los USVs apetitosos sin confusión relacionada con el apareamiento. Detalla el condicionamiento animal, la presentación de estímulos, el registro y el análisis acústico, proporcionando un método reproducible para estudiar la función afectivo-motivacional y sensoriomotora craneal.

Provocación anticipatoria de recompensa alimentaria de vocalizaciones ultrasónicas apetitivas en ratas y ratones de laboratorio

Las medidas más-laberinto ansiedad-como el comportamiento de los roedores. Hay dos opuesto cerrado y dos brazos abiertos opuestos; roedores ansiosos evitar los brazos abiertos. La zona central no es ni completamente abierta ni cerrada, así que el tiempo pasado aquí es ambigua y difícil de interpretar. Aquí se describe una modificación del protocolo de laberinto en cruz la eliminación de esta área.

Los callejones de prueba sucesiva de ansiedad en ratones y ratas

En este artículo se presenta un protocolo para un temor prueba contextual y complementada acondicionado mediante un sistema de análisis de vídeo para evaluar el aprendizaje del miedo y la memoria en ratones.

Contextuales y complementada el condicionamiento del miedo de prueba utilizando un sistema de análisis de vídeo en ratones

Este protocolo describe el tablero de perforación modificado, que es una configuración de prueba de comportamiento que comprende las características de un campo abierto y un tablero de perforación tradicional. Esta configuración permite el análisis diferencial del comportamiento incondicionado de pequeños mamíferos de laboratorio, así como el análisis de las capacidades cognitivas.

La Junta Agujero Modificado - Medición de Comportamiento, Cognición e interacción social en ratones y ratas

Las investigaciones anteriores sobre la dimensión social del estrés se han centrado en dos variables importantes: la identidad social y el apoyo social. Este protocolo introduce una manipulación experimental efectiva de estas dos variables sociales y describe su implementación en un paradigma estándar de inducción de estrés (Test de Estrés Social de Trier).

La dimensión social del estrés: Manipulaciones experimentales de Apoyo Social e Identidad Social en el Trier Social Estrés Prueba

El sabor dulce tiene un poderoso atractivo hedónico entre personas de todas las edades, especialmente los niños. En este trabajo se describe un método fiable y válido que puede utilizarse para determinar el nivel de dulzor más preferido, lo que lo convierte en una valiosa herramienta psicofísica para los científicos.

Psicofísico Método de Seguimiento para medir las preferencias de sabor en niños y adultos

Una versión de la rata de la prueba humana vigilancia psicomotora (PVT) se describe que mide los aspectos de la atención similares a los medidos con el PVT humana, incluyendo los aspectos de la vigilancia humana tales como la precisión de rendimiento, velocidad del motor, que responden prematuro y fallas en la atención.

La prueba de roedores psicomotor Vigilancia (rPVT): Un método para evaluar el rendimiento neuroconductual en ratas y ratones

La prueba de reconocimiento de objeto (ORT) es un ensayo sencillo y eficaz para evaluar el aprendizaje y la memoria en ratones. La metodología se describe a continuación.

Prueba de reconocimiento de objeto novedoso para la investigación del aprendizaje y la memoria en ratones

Aprende a determinar preferencias de vocalizaciones ultrasónicas en ratones mediante una prueba de reproducción de dos elecciones. Este método permite evaluar respuestas conductuales y comprender la comunicación murina.

La determinación de Preferencias ultrasónico Vocalización en ratones utilizando una prueba de reproducción de dos elección

Explorar más videos