Preparación de mitocondriales enriquecidos fracciones de Análisis metabólico en Drosophila

El objetivo general del siguiente experimento es obtener fracciones mitocondriales enriquecidas que produzcan suficientes metabolitos mitocondriales para estudios metabolómicos utilizando Drosophila melanogaster. Esto se logra criando primero una cantidad suficiente de moscas para generar suficientes metabolitos para las fracciones enriquecidas mitocondriales. Como segundo paso, las moscas se homogeneizan en un homogeneizador de plumones de teflón de vidrio, que rompe la membrana celular sin dañar la integridad mitocondrial.

Los siguientes homogeneizados se someten a centrifugación diferencial para generar muestras mitocondriales enriquecidas. Los resultados muestran que se detectaron cambios metabólicos mitocondriales pronunciados utilizando este protocolo, que no se detectaron utilizando el análisis metabolómico de base completa en fracciones enriquecidas mitocondriales y extractos de animales enteros. La principal ventaja de este procedimiento frente a un análisis metabolómico de mosca completa es que el aislamiento de las mitocondrias antes del análisis metabolómico permite una mayor sensibilidad y detección del cambio de metabolitos mitocondriales.