La entrega de proteínas, péptidos o impermeable a las células pequeñas moléculas en células vivas por incubación con el reactivo endosomolítico dfTAT

El objetivo general del siguiente experimento es administrar macromoléculas en células vivas utilizando dímero, tat fluorescente o df tat, un reactivo que puede penetrar en las células de manera muy eficiente sin dañarlas. Esto se logra generando y purificando primero el agente de entrega. Dfta como segundo paso.

Dfta se incuba con células durante una hora a 37 grados centígrados en presencia de la carga macromolécula de interés, df tat induce la absorción de la carga dentro de las vesículas endocíticas. Las vesículas maduran en endosomas tempranos, alcanzando finalmente la etapa de endosoma tardío donde DF tat es capaz de liberar la carga en el espacio citosólico de las células. A continuación, se obtienen imágenes de las células mediante microscopía de fluorescencia para evaluar la eficiencia de entrega de detta y la carga de interés.