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JoVE Journal Biology
Isolation of Mitochondria from Minimal Quantities of Mouse Skeletal Muscle for High Throughput Microplate Respiratory Measurements

Aislamiento de mitocondrias a partir de cantidades mínimas de ratón músculo esquelético para mediciones de alto rendimiento de microplacas Respiratorias

Full Text
13,427 Views
10:12 min
November 13, 2015

DOI: 10.3791/53217-v

Nabil E. Boutagy1,2, Emily Pyne1, George W. Rogers3, Mostafa Ali1, Matthew W. Hulver1,2, Madlyn I. Frisard1,2

1The Department of Human Nutrition, Foods, and Exercise,Virginia Tech, 2The Metabolic Phenotyping Core,Virginia Tech, 3Seahorse Bioscience

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aquí, presentamos una modificación de un método previamente reportado que permite el aislamiento de mitocondrias purificadas y de alta calidad a partir de cantidades más pequeñas de músculo esquelético de ratón. Este procedimiento da como resultado mitocondrias altamente acopladas que respiran con alta función durante los ensayos respirometirc basados en microplacas.

El objetivo general de este artículo de video es aislar mitocondrias de alta calidad de pequeñas cantidades de músculo esquelético de ratón para su uso en ensayos tric basados en microplacas. Este método podría ayudar a responder preguntas clave en la investigación biomédica, como describir cómo ciertos medicamentos y proteínas modulan el músculo esquelético y el consumo de oxígeno mitocondrial. La principal ventaja de esta técnica es que se pueden aislar mitocondrias de alta calidad a partir de cantidades más pequeñas de músculo esquelético de ratón de lo que se ha informado anteriormente.

Realizar la eutanasia del ratón de acuerdo con las directrices de la institución. A continuación, coloque el ratón de lado y utilice unas tijeras de punta fina para hacer una incisión en la piel. Superposición del epicóndilo lateral del fémur.

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