8 de julio de 2016
El objetivo de este protocolo es demostrar la aceleración de la tasa de crecimiento inicial de las plantas mediante la aplicación de campos magnéticos estáticos sin energía externa.
El objetivo general de este procedimiento es facilitar la tasa de crecimiento de las plantas utilizando campos magnéticos estáticos. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en la agricultura y el campo de la medicina nutricional, que abordan técnicas en la producción de alimentos. La principal ventaja de esta técnica es que no utiliza energía ni fertilizantes.
Para empezar, cultiva impatiens balsamina o semillas de bálsamo de jardín, colocándolas sobre una toalla de celulosa en placas de Petri separadas de 100 milímetros de diámetro. Luego, sumerge la toalla y las semillas en agua destilada triple. Mida y confirme que la temperatura del laboratorio interior es de 18 a 25 grados centígrados, con una humedad que oscila entre el 65 y el 75%Coloque tres imanes de 1, 750 más o menos 350 Gauss, debajo del plato de bálsamo del jardín, con una distancia de dos a cuatro milímetros entre las semillas y los imanes.
A continuación, después de colocar tres imanes debajo de un segundo plato de semillas, apile dos imanes con el lado norte hacia arriba para el imán superior y el lado sur hacia arriba para el imán inferior. Luego, coloque los dos imanes juntos en la parte inferior de la placa de cultivo de bálsamo del jardín. Para generar imágenes de lapso de tiempo del crecimiento de las plantas, después de configurar una cámara digital para fotografiar la planta de acuerdo con el protocolo de texto, coloque marcadores de tamaño, como un cuarto canadiense y un centavo estadounidense y una regla de centímetros en el lado del campo de visión.
Luego, recoja de 700 a 900 imágenes durante siete a 10 días. Después de usar el software de creación de películas para crear una película de lapso de tiempo con las imágenes, de acuerdo con el protocolo de texto, ejecute la película para verificarla. Después de colocar las semillas en una toalla de celulosa, como se demostró anteriormente en este video, coloque dos imanes con el polo norte hacia arriba en la parte inferior de la placa de 100 milímetros e incube durante 48 horas.
Para teñir las plantas, coloque toda la planta de doble flor impatiens SPP en un 4% de paraformaldehído y un tampón de alimentación rápida 0,1 molar y fije la planta durante 15 minutos. Transfiera la muestra de planta a un tampón de bloqueo e incube durante dos horas. A continuación, sumerja la muestra de impatiens en PDS durante 15 minutos para lavarla.
Después del lavado, agregue anticuerpos primarios anti-alfa-tubulina e incube a cuatro grados centígrados durante la noche. Al día siguiente, transfiera la muestra a PBS durante 10 minutos. A continuación, coloque la planta en IgG anti-ratón conjugada con FITC e incube en la oscuridad a 25 grados centígrados durante dos horas.
Después de la incubación, sumerja la muestra en PBS en el pocillo de una placa de 24 pocillos y coloque un cubreobjetos en toda la muestra. Luego, use un microscopio de fluorescencia para observar la orientación turbulenta. Esta figura muestra que en condiciones de crecimiento oscuro, las plantas de bálsamo de jardín solo exhibieron un aumento marginal en la tasa de crecimiento cuando se expusieron a un campo magnético estático.
Sin embargo, el campo magnético se asoció con una mayor tasa de crecimiento cuando las plantas crecieron bajo luz. En el tercer día, la diferencia de altura entre las plantas expuestas al imán y los controles fue estadísticamente significativa. Y las diferencias continuaron hasta el séptimo día.
Estas imágenes de fluorescencia demuestran la turbulentez desarrollada en estructuras dispersas o delgadas en las plantas que crecen en presencia de imanes, en comparación con las plantas de control. Una vez dominada, esta técnica se puede realizar en 72 horas si se realiza correctamente. Al intentar este procedimiento, es importante recordar controlar la intensidad de los imanes.
Siguiendo este procedimiento, se puede realizar la aplicación a otros organismos modelo con el fin de responder preguntas adicionales, como la base genética de la mejora del crecimiento en un campo. Después de su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la medicina nutricional exploraran un regulador clave del enriquecimiento nutricional y el crecimiento de las plantas. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo mejorar el crecimiento inicial de una planta usando imanes.
No olvide que trabajar en contacto directo con imanes puede ser extremadamente peligroso y condiciones como la humedad, pueden causar la descomposición del hierro y siempre deben tenerse en cuenta al realizar este procedimiento.
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Este protocolo demuestra cómo los campos magnéticos estáticos pueden acelerar la tasa de crecimiento inicial de las plantas sin el uso de energía externa. Destaca un método que podría tener un impacto significativo en las prácticas agrícolas.
La aplicación de un campo magnético estático ofrece un enfoque no químico para modular el crecimiento temprano de las plantas, relevante para la investigación y desarrollo en agricultura sostenible y medicina nutricional. Este método apoya la validación de objetivos en fisiología vegetal al permitir la manipulación controlada de la cinética de crecimiento sin fertilizantes ni aporte externo de energía. Proporciona una herramienta mecanicista para reducir riesgos al evaluar estímulos ambientales en las etapas de desarrollo de cultivos.
El método se integra en flujos de trabajo de descubrimiento temprano en los que la tasa de crecimiento sirve como lectura fenotípica para la modulación de vías o dianas.