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DOI: 10.3791/54144-v
Haseong Kim*1, Gui Hwan Han*1, Yaoyao Fu1, Jongsik Gam2, Seung Goo Lee1,3
1Synthetic Biology & Bioengineering Research Center,Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, 2College of Interdisciplinary & Creative Studies,Konyang University, 3Biosystems and Bioengineering Program,University of Science and Technology
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Este protocolo describe la cuantificación rápida y altamente sensible de Förster de transferencia de energía de resonancia (FRET) datos de sensor utilizando un analizador de FRET portátil a medida. El dispositivo se utilizó para detectar la maltosa dentro de un rango de temperatura crítico que maximiza la sensibilidad de detección, lo que permite la evaluación práctica y eficiente de contenido de azúcar.
El objetivo general de este protocolo es demostrar la aplicabilidad general del analizador FRET en condiciones óptimas mediante la cuantificación del contenido de azúcar de las bebidas disponibles comercialmente. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la detección y el monitoreo de moléculas pequeñas, como el azúcar. La principal ventaja de esta técnica es que puede monitorear de manera eficiente una señal fresca que responde a las moléculas pequeñas sin fluorómetros costosos y de alta gama.
La demostración del procedimiento estará a cargo del Dr. Han de nuestro laboratorio. En primer lugar, prepare el plásmido biosensor fluorescente amarillo cian y amarillo específico de maltosa o sacarosa. A continuación, inocular cinco mililitros de caldo Luria con una sola colonia de DE3 E.Coli, e incubar el cultivo a 37 grados centígrados en una incubadora agitadora durante 16 horas.
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