VacuSIP, un método mejorado para InEx In Situ Medición de las partículas y compuestos disueltos procesada por Alimentadores Active Suspension

El objetivo general de este método es limpiar el colector de agua inhalada y exhalada por los alimentadores de suspensión bentónicos en condiciones naturales para que se puedan cuantificar las partículas y los compuestos disueltos que eliminaron y excretaron. Al preparar recipientes de recolección para el análisis de compuestos orgánicos disueltos y amoníaco, use viales nuevos de EPA previamente limpios. Para tomar muestras de otros nutrientes, use viales de vidrio EPA.

Use viales de HDPE para el silicato. Enjuague los viales y tapones con agua bidestilada de alta calidad. A continuación, sustituya el tabique de silicona perforado por uno nuevo y remoje los viales y los tapones en ácido clorhídrico al 10% durante al menos tres días, seguidos de tres enjuagues con agua bidestilada de alta calidad.

Para preparar aún más los viales de vidrio para los nutrientes, quémelos a 450 grados centígrados durante cuatro horas y déjelos enfriar en el horno. A continuación, coloque las tapas y envuelva los viales en papel de aluminio. A continuación, mezcle DDW con surfactante filtrado de 0,2 micras para preparar la solución al cinco por ciento.

Ahora coloque un filtro de fibra de vidrio sin aglutinante quemado dentro del portafiltros swinnex de acero inoxidable en línea limpio. A continuación, utilice una jeringa limpia con ácido para hacer pasar 100 mililitros de la solución de tensioactivo filtrada por todo el conjunto. Enjuague el conjunto con 100 mililitros de agua doble destilada de alta calidad.

Si el conjunto del filtro es para tomar muestras de sílice, prepárelo con un filtro de policarbonato y haga pasar 30 mililitros de ácido clorhídrico al cinco por ciento, seguido de 30 mililitros de agua destilada doble de alta calidad. Ensamble el sistema para trabajos subacuáticos utilizando tubos de PEEK. Utilice un cuchillo afilado o un cortador de PEEK para preparar las longitudes requeridas.

Coloque cada tubo con un conector Luer macho conectado a una aguja de jeringa. Asegúrese de que el lado plano de la férula sin brida azul esté alineado con el extremo del tubo, luego apriete la tuerca verde con la mano. Luego, con cinta aislante, asegure el tubo de PEEK a los brazos del trípode para un manipulador hecho a medida.

A continuación, conecte las agujas de jeringa desechables con tapa a los conectores luer macho. Etiquete claramente el equipo de muestreo y codifique por colores los componentes de muestreo de inhalación y exhalación, por ejemplo, con cinta azul para adentro y amarilla para afuera. Del mismo modo, codifique por colores los recipientes de muestreo para identificar mejor los pares de recipientes que están numerados secuencialmente.

Ahora evacúe los recipientes de muestreo antes de la inmersión, idealmente con una buena bomba de vacío. Un liofilizador estándar proporciona un alto vacío y funciona tan bien. Finalmente, alinee todos los recipientes de muestreo según sea necesario para la inmersión.

Planifique todos los pasos de muestreo con anticipación y empaque en consecuencia. Primero confirme si la muestra está bombeando liberando un tinte fluorescente filtrado junto al orificio inhalante y confirme que el tinte está emergiendo a través del orificio del extremo de exhalación. A continuación, instale el dispositivo VacuSIP y asegúrese de que esté estable.

A continuación, coloque el tubo de muestreo de inhalante dentro del orificio de inhalante o muy cerca de él, asegurándose de que el tubo de inhalante no esté cerca de ningún otro orificio de exhalación. A continuación, dirija con cuidado el tubo de muestreo de exhalación hacia el sifón de exhalación e insértelo muy suavemente de uno a cinco milímetros en el sifón. Tenga mucho cuidado de no entrar en contacto con el organismo muestreado ni perturbarlo de otro modo.

A continuación, fije el conjunto de muestreo en una proximidad de trabajo cercana. Si utiliza el manipulador personalizado, tenga el mismo cuidado al colocar el tubo de inhalante y exhalación. El muestreo de ultraplancton no requiere filtro.

Para tomar muestras de ultraplancton, utilice la aguja para perforar el tabique del tubo de vacío inhalado y exhalado. Verifique que el agua esté goteando y recoja de dos a seis mililitros de agua de cada tubo. Para silicatos, instale los portafiltros de policarbonato inoxidable en línea con las membranas de policarbonato entre la aguja y el conector luer macho en el extremo de destilación del tubo.

A continuación, perfore el tapón del tabique de los viales de PEAD preparados para iniciar la toma de muestras. Para tomar muestras de compuestos orgánicos e inorgánicos disueltos, tenga a mano tres pares de viales. Uno para nitratos y fosfatos, otro para amoníaco y un tercer par para compuestos orgánicos disueltos.

Para tomar muestras de compuestos orgánicos o nutrientes disueltos, reemplace el conjunto del filtro de policarbonato con un soporte de filtro de acero inoxidable en línea previamente limpiado que contenga un filtro de vidrio prequemado. A continuación, perfore el tapón del tabique de un frasco de vidrio de la EPA para comenzar a tomar muestras. Los inorgánicos disueltos se recolectaron en viales de vidrio EPA nuevos limpiados por el fabricante o viales de EPA reutilizados limpiados de acuerdo con el protocolo descrito.

Los viales reciclados reportaron concentraciones de amoníaco más altas, pero otros valores fueron similares. Los portafiltros de acero inoxidable y los portafiltros Swinnex en línea de policarbonato se compararon filtrando agua pura y analizando los nutrientes orgánicos e inorgánicos disueltos. La membrana de policarbonato y el filtro de fibra de vidrio prequemado se probaron con cada soporte.

La combinación de un portafiltros de acero inoxidable y un filtro de fibra de vidrio quemado funcionó mejor. Los recuentos de células se realizaron con el citómetro de flujo para probar la calidad de la muestra. Cuando los pares de muestras in-ex se recogen correctamente, la mayoría de las células se extraen del agua exhalada.

Por el contrario, la recolección inadecuada no obtuvo el mismo resultado. Cuando el VacuSIP se emplea correctamente, los patrones de remoción o excreción fueron evidentes para la mayoría de los compuestos analizados. Las medidas que se ven aquí fueron tomadas de una esponja mediterránea.