Name: Método alternativo de Extracción de otolitos de esturión (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 7 s
Description: Aprende a extraer otolitos intactos de esturiones amenazados mediante técnicas de necropsia que preservan estructuras anatómicas críticas. Este método facilita estudios de edad, crecimiento y microquímica en ecología de peces.

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Un agradecimiento especial a la División de St. Regis Mohawk Ambiental, Welaka Nacional de Peces, Pesca y Unidad de Investigación del Servicio de Vida Silvestre de la Universidad del Sur de Illinois, US Fish and Wildlife Service Center Pesca noreste, Sterling Caviar, de la Universidad de California-Davis, Garrison presa Nacional de Pesca criadero, osos Bluff Nacional de Peces y Pesca y la Oficina de recursos de la Ciudad de Panamá Servicio de Pesca de la fauna por su ayuda el suministro de esturión para este proyecto. este artículo es la contribución de la USGS 2013 Great Lakes Science Center.

Nota importante: Debido al estado de protección de todas las especies de esturión en los Estados Unidos, permite adquirir y manipular el pescado se obtuvieron antes de su procedimiento de laboratorio. Todos los especímenes fueron adquiridos a partir de fuentes de incubación post mortem debido a causas naturales y eliminarse siguiendo el procedimiento estándar. 1. Preparación de las muestras <ol><li> Antes de que las incisiones ponen en canal de esturión en su lado y con una cinta métrica para medir la longitud total desde el hocico hasta la punta de la cola hasta el 1 mm más cercano. (Figura 1A) </li><li> Pesar carcasa de esturión en una escala tarado aproximadamente a 1 g. Evaluar la canal a todas las etiquetas o marcas externas y registro. </li></ol> 2. Extracción de otolitos <ol><li> Hacer una incisión vertical con un gran cuchillo filete entre la base del cráneo y la primera scute dorsal a través del cuerpo para separar la cabeza del cuerpo (Figura 1B). Después de quitar la cabeza, marn la cabeza para que la boca quede hacia arriba (Figura 1C). </li><li> Quitar el tejido blando de la boca y las branquias mediante el uso de la cuchilla para cortar el filete a lo largo de la parte ventral del cráneo (Figura 1D). Hacer una incisión con una sierra para huesos eléctrica desde la punta del hocico hasta la base del cráneo hasta la bisectriz por completo la cabeza (Figura 1E). Separar las dos mitades con la mano para exponer la cavidad cerebro (Figura 2A). </li><li> Retirar y desechar la materia cerebral (cuadro rojo de la izquierda) con una pinza para ver canales semicirculares (cuadro rojo) dentro de la cavidad del cerebro (Figura 2B). </li><li> Retire el cartílago canal semicircular de la cavidad cerebral con unas pinzas (Figura 2C). Perfore cuidadosamente cartílago canal semicircular con la punta del fórceps y retirar los otolitos (Figura 2D). Retire los otolitos (estructura ósea con fuerza en el interior del cartílago) con unas pinzas de cartílago canal semicircular (Figura 2E) </strong&gt;. </li><li> Repetir los pasos 2.3 hasta 2.4 para eliminar los otolitos de la otra mitad del cráneo. </li><li> Sumergir los otolitos en 92% de etanol durante 5 segundos para eliminar cualquier cartílago. Coloque los otolitos en un vial de centelleo de 25 ml abierta se sequen durante 24 horas. </li></ol>

<ol><li>Auer, N. A. Conservation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAuer%2C+NA+%22Sturgeons+and+Paddlefish+of+North+America%22">Sturgeons and Paddlefish of North America</a>. LeBreton, G. T. O., Beamish, F. W. H., McKinley, R. S. 27, Kluwer Academic Publishers. 252-276 (2004).</li>
<li>Sturgeon Specialists Group, sturgeon conservation. IUCN (International Union for the Conservation of Nature). , Source: 
 <a target="_blank" href="www.iucn.org">www.iucn.org</a> (2008).</li>
<li>Campana, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy%2C+precision+and+quality+control+in+age+determination%2C+including+a+review+of+the+use+and+abuse+of+age+validation+methods%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fish+Biology%22%5BJournal%5D)">Accuracy, precision and quality control in age determination, including a review of the use and abuse of age validation methods).</a> Journal of Fish Biology. 59, 197-242 (2001).</li>
<li>Bruch, R. M., Campana, S. E., Davis-Foust, S. L., Hansen, M. J., Janssen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lake+Sturgeon+age+validation+using+bomb+radiocarbon+and+known-age+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Lake Sturgeon age validation using bomb radiocarbon and known-age fish.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 138, 361-372 (2009).</li>
<li>Baremore, I. E., Rosati, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated%2C+minimally+deleterious+method+for+ageing+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">A validated, minimally deleterious method for ageing sturgeon.</a> Fishery Bulletin. 112, 274-282 (2014).</li>
<li>Stevensen, J. T., Secor, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age+determination+and+growth+of+Hudson+River+Atlantic+sturgeon%2C+Acipenser+oxyrhynchus%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Age determination and growth of Hudson River Atlantic sturgeon, Acipenser oxyrhynchus.</a> Fishery Bulletin. 97, 153-166 (1999).</li>
<li>Brennan, J. S., Cailliet, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+age-determination+techniques+for+white+sturgeon+in+California%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fishery+Society%22%5BJournal%5D)">Comparative age-determination techniques for white sturgeon in California.</a> Transactions of the American Fishery Society. 118, 296-310 (1989).</li>
<li>Rossiter, A., Noakes, D. L. G., Beamish, F. W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+age+estimation+for+the+lake+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Validation of age estimation for the lake sturgeon.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 124, 777-781 (1995).</li>
<li>Chalupnicki, M. A., Dittman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((North+American+Sturgeon+Otolith+Morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Copeia%22%5BJournal%5D)">North American Sturgeon Otolith Morphology.</a> Copeia. , 260-266 (2016).</li>
<li>Secor, D. H., Dean, J. M., Laban, E. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSecor%2C+DH+%22Manual+for+otolith+removal+and+preparation+for+microstructural+examination%22">Manual for otolith removal and preparation for microstructural examination</a>. , Barach Press. Columbia, South Carolina. (1991).</li>
</ol>

Cualquier uso de nombres comerciales, de productos o de empresas es solo para fines descriptivos y no implica el respaldo del gobierno de los EE. UU.

La visión general de un método alternativo de extracción de otolitos de las canales de esturión se ha detallado. Es importante tener en cuenta que debe prestarse especial atención a la colocación de la incisión lateral sobre la línea media del cráneo con el fin de dividir en dos el cráneo de manera uniforme para asegurar que ningún daño a los otolitos durante la disección. Si la incisión no es lo suficientemente profunda para bisecar completamente el cráneo será muy difícil para exponer la cavidad cerebro donde la ubica...

Poblaciones de esturión (Acipenseriformes) en todo el mundo han estado disminuyendo desde hace más de un siglo debido a los impactos, incluyendo la pérdida del hábitat, la fragmentación de la población, y la sobrepesca de tal manera que muchas poblaciones están protegidos por las leyes estatales y federales 1,2. Los organismos de gestión a lo largo de los EE.UU. y el mundo han identificado esturión como especie objetivo para la restauración y recuperación 1. Características de la población (crecimiento, reclutamiento, dieta) de la mayoría de las poblaciones de esturión se han estudiado para comprender mejor las características básicas de la biología y la historia de vida 1. Debido al estado de protección de la mayoría de las poblaciones de esturión, la evaluación de la edad es difícil en las pequeñas poblaciones amenazadas que se garantiza ningún sacrificio o daños a las personas. La extracción de estructuras óseas para el propósito de la estimación de la edad y el análisis de crecimiento ha sido una técnica común 3 uso .La de secciones de radios de las aletas para determinar la edad de Sturgese ha convertido en un método no letal práctica, pero la verificación de la técnica ha sido limitada y la edad pueden ser muy difíciles de descifrar en los individuos de mayor edad (&gt; 15 años) 4. Los investigadores evaluaron el uso de múltiples estructuras óseas de esturión para su uso en la validación de la edad del Golfo esturión (Acipenser oxyrinchus desoti) 5, Esturión atlántico (A. o. Oxyrinchus) 6, esturión blanco (A. transmontanus) 7, y el Lago de esturión (A. fluvescens) 8 llegó a la conclusión de que la primera aleta pectoral marginal rayos proporcionó la edad más precisa, pero llegó a la conclusión de este procedimiento invasivo ser perjudiciales para las personas mayores. Actualmente, no existe el desarrollo de métricas utilizando la forma de otolitos para distinguir entre las especies de esturión de América del Norte con una muy alta tasa de éxito 9. Los detalles sobre el proceso de eliminación de los otolitos con una incisión transversal dorsal en la base del cráneo es un otolitos común adicionalMétodo cción encuentra a través de la literatura y claramente detallado por Secor et al. (1991) 10. Sin embargo, este método es difícil de aplicar en esturión que tienen cráneos muy gruesas con otolitos que son pequeños y delicados y tenderían a romper. Una nueva revisión de la literatura muestra ninguna otra metodología detallada del proceso de eliminación de los otolitos para el esturión. El objetivo de este trabajo fue al detalle un método alternativo de extracción de otolitos de esturión mediante la introducción de la cavidad cerebral del lado ventral.

<table><tbody><tr><td>Tablero</td><td></td><td></td> de medición <td>Es preferible el vara métrica</td></tr><tr><td>Báscula</td><td></td><td></td><td></td>de pesaje</tr><tr><td>Cuchillo</td><td></td><td></td><td></td>para filetear</tr><tr><td>Pinzas</td><td></td><td></td><td></td></tr> de <tr><td>bisturí</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Viales de muestra Los viales de</td><td></td><td></td><td>centelleo de 25 ml funcionan bien</td></tr></tbody></table>

método alternativo de extracción de otolitos de esturión

Alternative Method of Removing Otoliths from Sturgeon

La extracción de los otolitos (huesos del oído) de peces que tienen cráneos muy gruesas puede llevar mucho tiempo y muy difícil. La práctica común de hacer una incisión vertical transversal en la parte superior del cráneo con una sierra manual o eléctrica puede dañar los otolitos si no se realiza correctamente. Esturiones (Acipenseridae) son una familia en particular que tiene un cráneo muy grande y gruesa. Un nuevo método de laboratorio en la cavidad cerebral del lado ventral del pez para exponer los otolitos era más fácil que otros métodos de extracción de otolitos que se encuentran en la literatura. Métodos revisados ​​en la literatura se han diseñado para el campo y son más eficientes en el procesamiento de grandes cantidades de pescado rápidamente. Sin embargo, esta nueva técnica fue diseñada para ser más adecuado para un entorno de laboratorio cuando el tiempo no es prensado y extracción exitosa de cada muestra es crítica. El éxito de la búsqueda y eliminación de los otolitos usando esta técnica es muy alta y no pone en peligro los structure de cualquier manera. Esta técnica alternativa es aplicable a otras especies de peces similares para la extracción de los otolitos.

El tamaño adulto de esturión en todo el mundo es muy variable, pero la ubicación de los otolitos es consistente. Se encontró que el uso de un cuchillo filete de afilado para eliminar el tejido blando de la boca fácilmente muestra en la Figura 1D. Una sierra para huesos eléctrica es la herramienta preferida para la incisión lateral para exponer la cavidad del cerebro en la Figura 1E. Sin embargo, la atención al que divide en dos la línea media del cráneo ...

El objetivo del protocolo es mostrar un método eficaz para extraer los otolitos de los cadáveres de esturión.

Método alternativo de Extracción de otolitos de esturión

Extracting the otoliths (ear bones) from fish that have very thick skulls can be difficult and very time consuming. The common practice of making a ...

El objetivo general de este método es proporcionar una técnica alternativa eficaz para extraer otolitos sin dañarlos de peces amenazados, como el esturión de lago. Este método de extracción de otolitos puede ayudar a responder preguntas clave sobre la edad y el crecimiento de los peces, la ubicación de los huesos del oído en relación con la morfología del cerebro y la microquímica correlacionada con el hábitat. La ventaja de esta técnica es que, en peces con cráneos gruesos y otolitos frágiles, abrir la cavidad cerebral no daña los otolitos ni altera otras estructuras críticas.La idea para este método se desarrolló durante la investigación sobre la ecología de la restauración de esturiones amenazados. En poblaciones remanentes, rara vez se obtienen especímenes para necropsia y análisis de laboratorio. Por lo tanto, recolectar con éxito información sobre la edad y otros datos de animales individuales es fundamental para llenar las lagunas de información de la especie.Mark realizará el procedimiento para extraer los otolitos del esturión del lago. Para extraer los otolitos, primero coloque al esturión sobre su vientre y use una cinta métrica para determinar la longitud total desde el hocico hasta la punta de la cola con una precisión de un milímetro. A continuación, pese el animal en una balanza tarada con una precisión de un gramo y evalúe el cuerpo en busca de etiquetas o marcas externas.Después de registrar estos datos, utilice un cuchillo de filete grande para hacer una incisión vertical a través del cuerpo entre la base del cráneo y la primera escama dorsal para separar la cabeza. Después de su eliminación, gire la cabeza de modo que la boca quede mirando hacia arriba. Luego, use el cuchillo de filete para cortar a lo largo del lado ventral del cráneo y eliminar el tejido blando.A continuación, realice una incisión con un cortador eléctrico desde la punta del hocico hasta la base del cráneo para dividir completamente la cabeza en dos mitades. Separe las dos mitades manualmente para exponer la cavidad cerebral. Luego, use pinzas para retirar y descartar el tejido cerebral y así exponer los canales semicirculares dentro de la cavidad cerebral.Retire el cartílago del canal semicircular de la cavidad cerebral. Luego, use la punta de la pinza para perforar cuidadosamente el cartílago del canal semicircular. Después de identificar la estructura ósea dura dentro del cartílago, extraiga el otolito y sumerja el hueso del oído en etanol al 92 % durante cuatro segundos para eliminar cualquier cartílago residual.Finalmente, seque el otolito en un vial de centelleo abierto de 25 mililitros durante 24 horas. El tamaño adulto del esturión en todo el mundo varía considerablemente, pero la ubicación de los otolitos es constante. Como se ha demostrado, un cuchillo de filete afilado elimina fácilmente el tejido blando de la boca.El cortador eléctrico de escayola es la herramienta preferida para la incisión lateral con el fin de exponer la cavidad cerebral. Sin embargo, es necesario prestar atención cuidadosa a la bisección de la línea media del cráneo. De lo contrario, los otolitos podrían aplastarse durante el proceso.La pinza facilita la extracción sencilla del tejido cerebral, permitiendo el acceso al cartílago del conducto semicircular que contiene el otolito en la base de la cavidad cerebral. El cartílago del conducto semicircular puede luego retirarse del otolito sin dificultad usando la pinza, para un análisis posterior del hueso auditivo. Una vez dominada, esta técnica puede completarse en menos de cinco minutos si se realiza adecuadamente.Al intentar este procedimiento, es importante recordar tomarse el tiempo necesario para realizar las incisiones. No olvide que trabajar con instrumentos de disección y peces muertos puede ser peligroso y maloliente. Por lo tanto, siempre se deben tomar precauciones, como el uso adecuado de los instrumentos quirúrgicos y el equipo de protección personal (EPP) adecuado, al realizar este procedimiento.Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo abrir el cráneo del esturión por el lado ventral y extraer los otolitos sin causar daño a los huesos del oído. Tras su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la ciencia pesquera exploraran formas alternativas de extraer con éxito los otolitos en especies de peces donde las técnicas estándar resultaron difíciles.

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