Exploración de objetos novela como un ensayo de potencial de mayor orden repetitivo Comportamientos en ratones

El objetivo general de este ensayo conductual es identificar la presencia de comportamientos repetitivos de orden superior en ratones. Este ensayo puede ayudar a validar posibles modelos de ratón y comportamientos similares a los autistas, como la cepa endogámica de ratones C 58 J. Las principales ventajas de esta técnica es que no requiere ningún entrenamiento del ratón y no es particularmente provocadora de ansiedad.

Comienza llenando el campo de pruebas. Una jaula rectangular de plástico transparente con media pulgada de lecho de mazorca de maíz. Selecciona cuatro objetos novedosos que sean diferentes en forma y color.

Por ejemplo, un ladrillo de juguete rosa, un mono rojo, una baldosa blanca con escritura azul y un dado blanco estándar. Asegúrese de que estos objetos sean aproximadamente del mismo tamaño y estén construidos con plástico de alta densidad para facilitar la limpieza y resistir la masticación. En la arena rectangular, coloque estos objetos a tres centímetros de las esquinas en un orden aleatorio y contraequilibrado a lo largo de la prueba.

Registre la ubicación de cada objeto como un número diferente del uno al cuatro. Finalmente, coloque una cámara directamente sobre las arenas de prueba para que toda la arena quede grabada durante los períodos de aclimatación y descanso. Comience la prueba al comienzo del ciclo de luz en una habitación iluminada con iluminación fluorescente a aproximadamente 100 lux.

Asegúrese de que la iluminación sea uniforme en todo el campo de pruebas para estandarizar la apariencia durante la grabación de video. Luego, coloque una tarjeta de notas de dimensiones conocidas en la parte inferior del campo de prueba para su uso posterior como estándar de calibración. Y presione el botón de grabación en la cámara de video.

A continuación, transfiera un mouse de prueba a la arena de prueba vacía durante 10 minutos para que sirva como período de aclimatación y continúe grabando. Después del período de aclimatación, deje el ratón en la arena y agregue rápidamente los cuatro objetos novedosos a la arena. Registre el comportamiento del mouse durante 10 minutos adicionales durante este período de prueba.

Finalmente, una vez finalizado el período de prueba, devuelva el ratón de prueba a su jaula de origen. Limpie y seque los objetos novedosos, así como el campo de pruebas, con agua y jabón para platos sin perfume. Comience por configurar el esquema de codificación del proyecto en el software de registro de comportamiento.

Dentro del cuadro de configuración del proyecto, establezca la adquisición de datos en observación fuera de línea, fuera de línea. Dentro del cuadro de codificación de comportamiento, programe el scrabble, la excavación, la cría, el acicalamiento y el olfato de los objetos uno, dos, tres y cuatro como eventos de estado. Programa el salto como un evento de puntos.

Para programar el teclado secundario, abra el software del teclado, haga clic en el botón del teclado secundario que se muestra en la pantalla, escriba la combinación de teclas adecuada y haga clic en Aceptar. Una vez que se haya programado el teclado secundario, cierre el software y deje que el programa se ejecute en segundo plano de la computadora. Una vez que el proyecto se haya configurado en el software, prepárese para puntuar el número y la duración de cada uno de los siguientes comportamientos repetitivos.

Encabrita, cava, se acicala y salta. Para puntuar un vídeo, haga clic en archivo, abrir proyecto, observar, observación y nuevo. Elija un nombre para el nuevo archivo y, a continuación, seleccione el archivo multimedia de vídeo que desea puntuar.

Comience a anotar los comportamientos repetitivos haciendo clic en el botón comenzar observación. Utilice dos pulsaciones de teclas para todos los eventos de estado. Uno para significar la iniciación y el otro para el final de la conducta.

Y use solo una pulsación de tecla para eventos de punto. A continuación, utilice el software para anotar el número de veces y la duración de la pulsación del ratón por cada objeto, que se define como cualquier vez que un ratón mueve la nariz a menos de 0,5 centímetros de un objeto. Cada vez que un ratón olfatea un objeto, registre el número de posición correspondiente del objeto y registre manualmente la cadena de números de posición hasta el final del período de prueba de 10 minutos.

Cuente una posición dos veces si un ratón olfatea un objeto, mira hacia otro lado y luego vuelve a olfatear el objeto. Después de que se haya calificado el video de prueba de 10 minutos para olfateos, visualice los datos haciendo clic en analizar, análisis de comportamiento y nuevo. Luego, una vez que los datos aparezcan en la pantalla, expórtelos a una hoja de cálculo separada.

A continuación, registre la distancia total que recorrió el mouse dentro de la arena durante la prueba. Para hacer esto, use la tarjeta de notas para calibrar cada video configurando una línea de calibración a lo largo de cada extremo de la tarjeta de notas e ingresando la longitud adecuada dentro de la pantalla de calibración del software. Una vez dibujadas las líneas, introduzca la longitud y la anchura conocidas de la tarjeta de notas que corresponden a cada línea.

A continuación, dentro de la configuración de la arena, seleccione toda la arena. Dentro de la configuración de control de rutas, selecciona una duración de 10 minutos. Y en la configuración de detección, elija un objeto oscuro sobre un fondo claro.

Una vez que se hayan programado estos ajustes, puntúe los videos haciendo clic en adquisición y abrir adquisición. En el cuadro de control de adquisición, haga clic en nueva versión de prueba. Y luego comenzar las pruebas.

Una vez transcurridos 10 minutos, detenga el programa y observe los datos. Por último, haga clic en analizar y calcular estadísticas. Una vez que los datos aparezcan en la pantalla, expórtelos a una hoja de cálculo separada.

El porcentaje del número de veces que se repitieron las tres secuencias de patrones más comunes se observó en tres cepas diferentes de ratones endogámicos. Las hembras C 58 mostraron una fuerte adherencia a sus patrones preferidos en la arena redonda, pero no en la arena rectangular. Mientras que los ratones machos no diferían entre sí en ninguno de los dos ámbitos.

Además, los ratones C 58 machos y hembras en la arena redonda mostraron una mayor preferencia por su objeto preferido que las otras dos cepas. Mientras que no se mostraron diferencias en la preferencia de objetos en la arena rectangular. Una vez dominada, esta técnica se puede completar en menos de una hora, con 15 minutos necesarios para la adquisición de datos y 20 minutos para la puntuación del comportamiento.

Al intentar este procedimiento, es importante recordar que los ratones son muy sensibles a los cambios en su entorno. Asegúrese de que el entorno de prueba permanezca coherente durante todo el experimento. Siguiendo este procedimiento, se pueden utilizar otros métodos como el Laberinto de Barnes o el Laberinto de Equipo para validar aún más la presencia de comportamientos repetitivos de orden superior.

Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo usar la exploración de objetos novedosos para identificar la presencia de comportamientos repetitivos de orden superior en ratones.