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DOI: 10.3791/54345-v
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Este protocolo proporciona pautas paso a paso para establecer experimentos competitivos de trasplante de médula ósea de ratón para estudiar la función de las células madre/progenitoras hematopoyéticas sin purificación previa de las células madre mediante clasificación de células.
El objetivo general de este experimento es determinar la aptitud de las células madre hematopoyéticas de la médula ósea in vivo utilizando un ensayo de trasplante competitivo. Por lo tanto, este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la biología de las células madre y el trasplante de células hematopoyéticas sobre el impacto de diversas manipulaciones en la autorrenovación de las células madre después del trasplante. Las principales ventajas de esta técnica son que requiere un número limitado de animales y que no implica la clasificación de células.
Aunque este método puede proporcionar información sobre la función de las células madre, también puede ser útil en otros campos como la inmunología, mediante el uso de quimeras mixtas de médula ósea. El desarrollo inicial de esta técnica en la década de 1960 allanó el camino para que los investigadores en el campo de la biología de las células madre exploraran la identidad y la función de las células madre hematopoyéticas en humanos y ratones. Los encargados de demostrar el procedimiento serán Roxanne Hetu-Arbour, estudiante de maestría en el laboratorio, y Edward Owusu Kwarteng, estudiante de doctorado.
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