La fusión mediada por SNARE de proteoliposomas individual con bicapas soportadas atados en una celda de flujo de microfluidos supervisado por microscopía TIRF polarizada

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24 de agosto de 2016

10.3791/54349-v

24 de agosto de 2016

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Joerg Nikolaus¹^,² , Erdem Karatekin¹^,²^,³^,⁴

¹Department of Cellular and Molecular Physiology, Yale University School of Medicine, ²Nanobiology Institute, Yale University, ³Department of Molecular Biophysics and Biochemistry, Yale University, ⁴Laboratoire de Neurophotonique, Université Paris Descartes, Faculté des Sciences Fondamentales et Biomédicales, Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)

A continuación, se presenta un protocolo para detectar eventos individuales, SNARE mediada por liposomas y de fusión entre bicapas soportadas en los canales de microfluidos utilizando TIRFM polarizado, con sensibilidad única molécula y ~ 15 ms tiempo de resolución. Lípidos y liberación de carga solubles se pueden detectar de forma simultánea. tamaño de los liposomas, de difusividad de los lípidos, y poro de fusión propiedades se miden.