Name: In Vitro de grabación de la actividad nerviosa aferente mesentérica en ratón yeyunal y segmentos del colon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 32 s
Description: Aprende a registrar la actividad nerviosa aferente mesentérica in vitro en segmentos yeyunales y colónicos de ratón. Este método permite cuantificar la respuesta de los nervios a distensiones y compuestos sin interferencia del sistema nervioso central.

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SN realizó los experimentos descritos anteriormente, realizó el análisis de datos y redactó el manuscrito. AD y JDM implementaron la técnica en nuestras instalaciones de investigación y ayudaron en el análisis de datos. HC ayudó en la realización de los experimentos. WJ, CK y DG ayudaron en la implementación de la técnica de medición aferente en nuestro laboratorio, el análisis de datos y la interpretación de los resultados. SF, JDM y BDW diseñaron el estudio. Todos los autores leyeron críticamente y aprobaron el manuscrito final. SN es aspirante al Fondo para la Investigación Científica (FWO), Flandes (11G7415N). Este trabajo contó con el apoyo financiero de la FWO (G028615N y G034113N).

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</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

El protocolo en este documento se describe una técnica de laboratorio reproducible para estudiar la actividad del nervio aferente mesentérica en roedores y usadas por nuestro grupo y otros 3,4,7,8,12,20,21,31. Los pasos críticos en el protocolo incluyen el aislamiento rápido del tejido, la aspiración de la hebra de nervio en el electrodo de succión y el &quot;sellado&quot; adecuada del capilar de vidrio desde el baño de órganos mediante la aspiración de tejido adiposo que rodea en el capilar. La abertura del ...

la señalización sensorial y la percepción del dolor es un proceso complejo que resulta de una compleja interacción entre los nervios aferentes, neuronas espinales, ascendientes y descendientes vías facilitadoras e inhibidoras y varias regiones cerebrales diferentes. Como tal, los cambios en uno o más de estos niveles pueden resultar en la señalización sensorial alterada y dolor visceral en estados de enfermedad. Para el estudio de todos estos diferentes aspectos de la señalización sensorial múltiples se han desarrollado técnicas que van desde los experimentos de células individuales (por ejemplo, imágenes de calcio en las neuronas) para modelos animales enteros (por ejemplo, las respuestas de comportamiento, tales como la respuesta visceromotor). La técnica descrita en este documento permite a los investigadores para evaluar específicamente la actividad del nervio aferente in vitro a partir de un segmento aislado de intestino delgado o el colon en roedores. En resumen, un segmento gastrointestinal aislado (por lo general yeyuno o colon) está montado en una cámara de registro perfundida propósito construido con una K fisiológicosolución rebotes. El nervio esplácnico se diseca y se conecta a un electrodo permitir el registro de la actividad neuronal aferente en los nervios aferentes viscerales o pélvicos. La actividad del nervio puede ser grabada, basales o en respuesta a las crecientes presiones intraluminales y / o compuestos farmacológicos que se pueden aplicar ya sea directamente en la cámara de grabación (serosally), oa través de la perfusión intraluminal (la mucosa) para evaluar su efecto sobre la descarga aferente 1-6 . Es de destacar que los nervios esplácnicos también contienen fibras aferentes y eferentes viscerofugal, además de los aferentes sensoriales. Una de las principales ventajas de la grabación nervio esplácnico ex vivo es el hecho de que los investigadores pueden cuantificar la actividad del nervio sin modulación o de entrada desde el sistema nervioso central, que permite una para estudiar el efecto directo de los compuestos aplicados de forma local en la actividad nerviosa. Además, el seguimiento de los parámetros vitales, como es necesario utilizar el enfoque in vivo (ver más abajo), es no Ya no es importante. In vitro grabación esplácnica es finalmente mucho menos tiempo que su contraparte in vivo. actividad neuronal aferente en respuesta a otros estímulos, como frotación de la mucosa, de sondeo usando filamentos de von Frey o estiramiento del segmento, se puede estudiar en una configuración experimental modificado en el que se fija el tejido intestinal y abrió longitudinalmente (que está en contraste con nuestra configuración utilizando un segmento intacto), como se ha descrito en un número anterior 7,8. Además, sólo recientemente, una técnica fue descrita para estudiar la activación del nervio aferente del colon en la pared del colon en sí a través de imágenes de calcio, de nuevo utilizando un inmovilizada, longitudinalmente abierto segmento 9. Una versión alternativa de esta técnica in vivo consiste de medir la activación neuronal cerca de la entrada del aferente en la médula espinal. En resumen, el animal sedado se coloca en la posición prona, exposing la médula espinal lumbosacra a la que el nervio aferente de los proyectos de interés por medio de la laminectomía, la construcción de una parafina lleno bien con la piel de la incisión y drapeado la rootlet dorsal sobre un electrodo de platino bipolar 10,11. Esta técnica permite además a los investigadores caracterizar las fibras en base a su velocidad de conducción, y distinguen las fibras C no mielinizadas de Aδ fibras finas mielinizadas. Además, raicillas dorsal contienen exclusivamente fibras aferentes sensoriales, en contraste con los aferentes y eferentes nervios esplácnicos mixtos mencionados anteriormente. Grabación de descarga del nervio aferente in vitro a partir de segmentos intestinales aislados también se puede hacer uso de muestras humanas, como dos grupos de investigación publicados de forma independiente manuscritos primeros-en-hombre registro de la actividad del nervio aferente del colon en la resección especímenes humanos 12,13. La aplicación de esta técnica podría resultar en una mayor facilidad translatien los datos murinos al estado humano, y podría permitir a los investigadores a identificar fácilmente las drogas dirigidas a los nervios sensoriales sensibilizado. La importancia clínica de la caracterización de la actividad aferente del nervio, así como el descubrimiento de nuevos reactivos terapéuticos que se dirigen a la actividad del nervio aferente exorbitante, se ha discutido detalladamente por muchos expertos en el campo de 14 a 19. La mencionada técnica in vitro complementa el más comúnmente conocidos en la medición in vivo de la actividad aferente del nervio. Durante la medición de la actividad neuronal in vivo, la actividad del nervio se puede medir directamente en el animal sedado durante el cual se identifica el segmento de interés y posteriormente intubado, y una parafina llenas de líquido también se construye utilizando la pared abdominal y la piel del roedor 20. a continuación, se identificó el nervio aferente de interés, se seccionaron y se coloca sobre un electrodo de platino bipolar, lo que permite MEDICIÓN actividad neuronalt. Esta técnica permite al investigador para modular la actividad del nervio aferente en vivir aunque los animales sedados; como tal, se puede estudiar la actividad neuronal en respuesta a las interferencias, tales como distensión luminal o la administración intravenosa de un compuesto. La investigación traslacional se centra hoy en día principalmente en la aplicación de los sobrenadantes de origen humano (por ejemplo., A partir de biopsias de colon, células mononucleares de sangre periférica cultivadas, etc.) en yeyuno y / o del colon aferentes de ratón 21,22. Los investigadores pueden aplicar directamente sobrenadantes ya sea en el baño de órganos o en la solución intraluminal que perfunde el segmento de intestino, de modo que los efectos diferenciales de la serosa frente a la aplicación de la mucosa se pueden estudiar en la descarga del nervio aferente. Como tal, se demostró que supernatans biopsia de la mucosa del colon de pacientes con síndrome del intestino irritable pueden causar hipersensibilidad en los aferentes de colon de ratón, conejillo de indias neuronas submucosas y de la raíz dorsal de ratónneuronas ganglionares 21,23,24. Por último, el registro de actividad neuronal no se limita a la mesentérica y / o las neuronas de la pelvis que inervan el tracto gastrointestinal. Otros han demostrado que las grabaciones de los nervios se pueden realizar en los aferentes suministro de la articulación de rodilla 25, mientras que otros han caracterizado la actividad aferente del nervio vejiga, así 26-28, y ha demostrado que los aferentes de la pelvis de la vejiga, así el tracto gastrointestinal convergen, resultando posiblemente en neuronal 29 diafonía.

<table><tbody><tr><td>cloruro de sodio (NaCl)</td><td>VWR Chemicals</td><td>27.810.295</td><td>compuesto Solución de Krebs</td></tr><tr><td>cloruro de potasio (KCl)</td><td>Acros compuestos orgánicos</td><td>196770010</td><td>solución de Krebs</td></tr><tr><td>dihidrógeno fosfato de sodio (NaH2PO4)</td><td>VWR Chemicals</td><td>1.063.461.000</td><td>compuesto Solución de Krebs</td></tr><tr><td>bicarbonato de sodio (NaHCO3)</td><td>Merck</td><td>1.063.291.000</td><td>solución compuesta de Krebs</td></tr><tr><td>sulfato de magnesio (MgSO4)</td><td>Merck</td><td>1.058.861.000</td><td>solución compuesta de Krebs</td></tr><tr><td>cloruro de calcio (CaCl2)</td><td>Merck</td><td>23.811.000</td><td>solución de Krebs compuesta</td></tr><tr><td>D-glucosa</td><td>VWR Chemicals</td><td>1011175P</td> solución compuesta de <td>Krebs</td></tr><tr><td>Compuesto de agua</td><td></td><td></td> destilada <td>Solución de Krebs</td></tr><tr><td>Tubería de PVC</td><td>Suministros</td><td></td> de laboratorio científico <td>El segmento intestinal debe montarse sobre tubería de PVC</td></tr><tr><td>Tubería de silicona</td><td>Suministros</td><td></td> de laboratorio científico <td>El resto de la tubería, idealmente a base de silicona, es más fácil de desprender los residuos en la tubería</td></tr><tr><td>Hilo de seda</td><td>Pearsall Limited</td><td>10B15S220</td><td>Fijación del segmento sobre el tubo de PVC</td></tr><tr><td>Controlador de jeringa</td><td>Harvard Apparatus</td><td>55-2222</td><td>Infusión intraluminal de Krebs</td></tr><tr><td>Binocular - incluyendo aumento de 10X en oculair</td><td>Zeiss STEMI 2000</td><td></td><td>Visualización óptima para la disección del nervio aferente</td></tr><tr><td>Manta homeotérmica Unidad de control</td> Harvard <td>Apparatus 507214</td><td></td><td>Calentamiento de la cámara</td></tr> <tr><td>del órganoBaño de órgano hecho a medida con fondo</td><td></td><td></td><td></td>cubierto Sylgard</tr><tr><td>Software</td><td></td><td></td> Spike2 <td>Registro y análisis de los datos</td></tr><tr><td>Alfileres de insectos, 500 piezas, acero inoxidable, diámetro 0,2 mm</td><td>Austerlitz alfileres de insectos minutiens</td><td></td><td>Disección del nervio aferente</td></tr><tr><td>Pinza Dumont #5 inox 11 cm</td><td>Instrumento de precisión mundial</td><td>500341</td><td>Disección del nervio</td></tr> <tr><td>aferenteTijeras, resorte, 14 cm</td><td>World Precision Instrument</td><td>15905</td><td>Disección del nervio aferente</td></tr><tr><td>DB digitimer&nbsp;</td><td>NL 108T2/10</td><td></td><td>transductor de presión</td></tr><tr><td>Micromanipulador</td><td>Narishige</td><td>M-3333</td><td>Manipulación 3D del electrodo de succión</td></tr><tr><td>Micromanipulador</td><td>X-4 bloque</td><td></td> giratorio <td>Manipulación 3D del electrodo de succión</td></tr><tr><td>Micromanipulador</td><td>GJ-8 soporte magnético Manipulación</td><td></td><td>3D del electrodo de succión</td></tr><tr><td>LightSource</td><td>Euromex Microscopes Holland EK-1</td><td></td><td>Visualización óptima para la disección del nervio aferente</td></tr><tr><td>CED 1401 Aparato</td><td></td><td></td><td>de registro Registro de la actividad del nervio aferente</td></tr><tr><td>Humbug 50/60 Hz Eliminador de ruido</td><td>Quest Scientific Instruments</td><td></td><td>Eliminación del ruido de fondo</td></tr><tr><td>Bomba de infusión</td><td>Gibson Minipuls 2</td><td></td><td>Infusión de la cámara del órgano en la que se monta</td></tr> <tr><td>el segmentoSoporte de microelectrodo Medias celdas 1,5 mm</td><td>Instrumento de precisión mundial</td><td>MEH2SW</td><td>Electrodo de succión para el aislamiento de la fibra aferente</td></tr><tr><td>Capilares de vidrio de borosilicato, 300 uds.; 1.5/0.84 OD/ID</td><td>Instrumento de precisión mundial</td><td>1B150-4</td><td>Capilar para el aislamiento del nervio aferente</td></tr></tbody></table>

in vitro de grabación de la actividad nerviosa aferente mesentérica en ratón yeyunal y segmentos del colon

In Vitro Recording of Mesenteric Afferent Nerve Activity in Mouse Jejunal and Colonic Segments

nervios aferentes no sólo transmiten información relativa a la fisiología normal, sino también la señal homeostasis perturbado y procesos fisiopatológicos de los diferentes sistemas de órganos de la periferia hacia el sistema nervioso central. Como tal, el aumento de la actividad o &quot;sensibilización &#39;de los nervios aferentes mesentéricos se ha asignado un papel importante en la fisiopatología de la hipersensibilidad visceral y síndromes de dolor abdominal. La actividad del nervio aferente mesentérica se puede medir in vitro en un segmento intestinal aislado que se monta en un baño de órganos propósito construido y de la que se aísla el nervio esplácnico, permitiendo a los investigadores para evaluar directamente la actividad del nervio adyacente al segmento gastrointestinal. La actividad puede ser registrado en la línea de base en condiciones estandarizadas, durante la distensión del segmento o después de la adición de compuestos farmacológicos entregados intraluminal o serosally. Esta técnica permiteel investigador para estudiar fácilmente el efecto de fármacos que se dirigen al sistema nervioso periférico en las muestras de control; Además, proporciona información crucial sobre cómo la actividad neuronal se altera durante la enfermedad. Cabe señalar sin embargo, que la medición de la actividad de la descarga neuronal aferente solo constituye una estación de relevo en el complejo neuronal cascada de señalización, y los investigadores deben tener en cuenta no pasar por alto la actividad neuronal en otros niveles (por ejemplo, los ganglios de la raíz dorsal, médula espinal o el sistema nervioso central; ) con el fin de dilucidar plenamente la fisiología neuronal compleja en la salud y la enfermedad. aplicaciones utilizadas comúnmente incluyen el estudio de la actividad neuronal en respuesta a la administración de lipopolisacárido, y el estudio de la actividad del nervio aferente en modelos animales de síndrome del intestino irritable. En un enfoque más de traslación, el segmento intestinal de ratón aislado puede estar expuesto a sobrenadantes del colon de los pacientes con SII. Además, una modificaciónde esta técnica ha sido recientemente demostrado ser aplicable en especímenes de colon humano.

la actividad del nervio aferente yeyunal se midió al inicio del estudio y en respuesta a la distensión en la rampa 9 de ocho semanas de edad de sexo masculino DE-1 ratones. Los animales fueron alojados en grupos en condiciones estandarizadas (6 animales por jaula, 20 - 22 ° C, humedad 40 - 50%, 12 ciclo luz-oscuridad h) con acceso ilimitado al agua del grifo y Chow regular. segmentos de yeyuno de ratones muestran la descarga del nervio aferente espontánea irregular al inicio del estudio ...

Los nervios aferentes mesentéricos transmiten información desde el tracto gastrointestinal hacia el cerebro con respecto a la homeostasis normal, así como a la fisiopatología. La actividad del nervio aferente gastrointestinal se puede evaluar mediante el montaje de segmentos intestinales aislados con nervios aferentes adjuntos en un baño de órganos, aislando el nervio y evaluando la actividad basal y estimulada.

In Vitro de grabación de la actividad nerviosa aferente mesentérica en ratón yeyunal y segmentos del colon

Afferent nerves not only convey information concerning normal physiology, but also signal disturbed homeostasis and pathophysiological processes of the ...

El objetivo general de esta técnica consiste en registrar in vitro la actividad del nervio aferente esplácnico a partir de un solo haz nervioso yeyunal o colónico en respuesta a distensiones progresivas y a la aplicación de compuestos. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la neurociencia, como si los nervios aferentes que inervan el tracto gastrointestinal presentan hipersensibilización o desensibilización durante diversos estados patológicos. Las principales ventajas de esta técnica son que permite el registro de la descarga nerviosa in vitro y que permite cuantificar la actividad nerviosa sin la modulación ni las influencias del sistema nervioso central.La implicación de esta técnica se extiende hacia el tratamiento o diagnóstico de varios síndromes de dolor, como el síndrome del intestino irritable, ya que la sensibilización nerviosa desempeña un papel fundamental en la patogénesis. En general, las personas nuevas en este método tendrán dificultades porque la disección de los haces nerviosos y el análisis de unidad individual de la señal registrada requerirán una cantidad considerable de entrenamiento. Para comenzar este procedimiento, coloque el ratón sacrificado en posición supina.Realice una incisión media abdominal a través de la piel y la capa muscular abdominal utilizando un bisturí, extendiéndola desde el apéndice xifoides hasta el hueso púbico. Posteriormente, enjuague la cavidad abdominal con solución de Krebs fría para evitar que los tejidos intraabdominales se sequen. Luego, extirpe rápidamente todo el yeyuno utilizando tijeras afiladas, retirando aproximadamente 20 centímetros del intestino delgado, comenzando inmediatamente desde la flexura duodeno-yeyunal.Tenga cuidado de no dañar las estructuras circundantes y mantenga intacto el mesenterio del intestino delgado, que contiene los vasos sanguíneos y los nervios aferentes yeyunales. A continuación, coloque el yeyuno extirpado en solución de Krebs fría sobre hielo mientras lo oxigena continuamente con Carbigen. Luego, corte el yeyuno en segmentos de aproximadamente tres centímetros de longitud.Localice el haz mesent&eacute;rico que contiene los vasos sangu&iacute;neos y el nervio espl&aacute;cnico cerca del centro del bucle correspondiente para facilitar la colocaci&oacute;n del bucle en la c&aacute;mara de registro. Posteriormente, lave cada segmento con soluci&oacute;n de Krebs utilizando un cat&eacute;ter romo para eliminar los contenidos luminaires y el quimo, ya que contienen enzimas digestivas que acelerar&aacute;n el deterioro de la muestra de tejido in vitro. Despu&eacute;s de eso, seleccione un segmento para medir la actividad del nervio aferente y col&oacute;quelo en la c&aacute;mara de registro codificada con una capa de elast&oacute;mero de silicona.Mantenga la temperatura de Krebs en la cámara de registro a 34 grados Celsius. Luego, coloque el segmento yeyunal en el baño de órganos, de modo que el extremo oral esté conectado al impulsor de jeringa que proporciona el flujo luminal y el extremo aboral se conecte al conducto de salida. Estire ligeramente el segmento, pero tenga cuidado de no ejercer una tensión excesiva.Sujete ambos extremos firmemente usando ligaduras de seda a los puertos de entrada y salida. Posteriormente, conecte el impulsor de jeringa al extremo oral y perfunda el segmento yeyunal intraluminalmente con solución de Krebs a 10 mililitros por hora. Fije el mesenterio del segmento intestinal montado contra la capa inferior de elastómero de silicona para que quede plano.Luego, estire el mesenterio para optimizar la visualización del haz mesentérico. A continuación, realice una prueba de distensión progresiva cerrando el puerto de salida hasta que la presión intraluminal del segmento intestinal alcance 60 milímetros de mercurio, con el fin de verificar que no haya fuga de solución de Krebs intraluminal desde el segmento montado. Observe un aumento progresivo y uniforme de la presión intraluminal sin interrupciones.Se esperan pequeñas contracciones del segmento durante la fase inicial de distensión. Si es necesario, bloquee la actividad peristáltica añadiendo un micromol del bloqueador de los canales de calcio tipo L, nifedipino, a la solución de Krebs. Bajo un microscopio estereoscópico, comience suavemente a separar el tejido adiposo del mesenterio tirando delicadamente de él con dos pinzas pequeñas, teniendo cuidado de no dañar los vasos sanguíneos y el nervio aferente que se encuentran dentro del tejido adiposo.Comience a separar el tejido adiposo a cierta distancia del yeyuno para exponer ambos vasos sanguíneos en el haz mesentérico. Identifique el nervio yeyunal aferente entre ambos vasos como un delgado hilo blanco encapsulado en el tejido adiposo. Luego, diséquelo más proximalmente hacia el yeyuno separando suavemente el tejido adiposo con pinzas.A continuación, diseccione el nervio mesentérico yeyunal del segmento eliminando el tejido adiposo adherido al nervio. Seccione el nervio utilizando tijeras de tejido afiladas. Si es necesario, retire suavemente la grasa restante y el tejido conectivo, así como la vaina epineural, tirando de ella con cuidado.En este procedimiento, utilice un micromanipulador para introducir la punta del electrodo de succión en el baño orgánico. Luego, aspire suavemente algo de solución de Krebs del baño orgánico, de modo que la punta del electrodo quede sumergida en la solución de Krebs. Asegúrese de que la solución de Krebs cubra el electrodo de alambre dentro del electrodo de succión.A continuación, coloque la punta del electrodo de succión inmediatamente junto al filamento nervioso aferente seccionado y aspire el filamento nervioso seccionado dentro de la capilaridad a lo largo de toda su longitud. Dirija la punta del electrodo hacia el tejido adiposo y aspire este tejido dentro de la capilaridad de vidrio mediante el émbolo, logrando así un sellado mecánico del nervio en la capilaridad, aislándolo del contenido del baño orgánico. El sellado adecuado de la capilaridad de vidrio respecto a la cámara de registro, mediante la aspiración de algo del tejido graso circundante dentro de la capilaridad, es fundamental para minimizar el ruido de fondo redundante que finalmente dificultaría el análisis final.Para verificar la grabación de la actividad nerviosa aferente, realice un aumento inducido por distensión progresiva en la descarga aferente cerrando el puerto de salida para provocar un aumento gradual de la presión en el segmento intestinal. Solo realice el protocolo experimental deseado cuando tres distensiones progresivas consecutivas produzcan una descarga multiunitaria reproducible. Tras el aislamiento del nervio, estabilice la preparación durante 15 minutos para obtener una actividad nerviosa aferente espontánea estable antes de realizar los experimentos reales.Se muestra aquí una representación esquemática de diferentes unidades de fibras aferentes según su perfil mecanosensible. Las fibras de umbral bajo muestran predominantemente un aumento en la actividad nerviosa a bajas presiones de distensión, lo que resulta en un porcentaje de LT superior al 55 %. Las unidades de umbral alto, por el contrario, solo muestran un aumento en la frecuencia de disparo a presiones nocivas. Las fibras de rango dinámico amplio muestran un aumento gradual en la actividad nerviosa durante toda la distensión, mientras que las fibras mecanicamente insensibles no responden a presiones crecientes de distensión.Esta figura muestra la descarga del nervio aferente mesent&eacute;rico en ratones de tipo salvaje durante la distensi&oacute;n progresiva. Obs&eacute;rvese que en el perfil de distensi&oacute;n bif&aacute;sico, el aumento inicial de la descarga nerviosa se debe a las fibras de umbral bajo y de rango din&aacute;mico amplio, mientras que las fibras de umbral alto y de rango din&aacute;mico amplio contribuyen al segundo aumento de la descarga. Una vez dominada la t&eacute;cnica, el aislamiento del nervio yeyunal y el registro inicial de la l&iacute;nea base pueden realizarse en menos de una hora si se realiza adecuadamente.Se necesita más tiempo al estudiar el efecto de compuestos administrados en el baño de órganos. Al realizar este procedimiento, es importante recordar mantener un enfoque bien estandarizado, como identificar de forma consistente el mismo segmento en todos los experimentos. Tras seguir este procedimiento, se pueden realizar otros métodos, como el aislamiento de ganglios de la raíz dorsal con posterior imagen de calcio, con el fin de evaluar qué estaciones de relevo en el sistema nervioso gastrointestinal están involucradas en la patogénesis de varias enfermedades.Tras su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la neurociencia exploraran la patogénesis de varios síndromes de dolor en la investigación gastrointestinal. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo aislar nervios aferentes yeyunales del tracto gastrointestinal de ratón y registrar la actividad de estos durante distensiones progresivas.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociencia

Este video muestra un método para registrar la actividad de los nervios aferentes colónicos en un colon de rata ex-vivo, canulado en ambos extremos e infundido con solución salina para aumentar la presión intraluminal. A medida que aumenta la presión, la señal nerviosa aumenta, lo que indica su estimulación.

Registro electrofisiológico de nervios aferentes colónicos en un colon de rata ex vivo

Este video muestra el proceso de registro de señales eléctricas de nervios aferentes mesentéricos en un segmento yeyuno de ratón disecado para estudiar los efectos de la presión tisular y los cambios de movimiento en la actividad de los nervios aferentes.

Registro de la actividad del nervio aferente mesentérico en un segmento de yeyuno de ratón ex vivo

Fuente: Fried, D. E., Gulbransen, B. D. In situ ca2+ Imágenes del sistema nervioso entérico. J. Vis. Exp.  (2015)Este video muestra el calcio imágenes para visualizar y analizar la actividad de las neuronas entéricas y la glía en preparaciones de plexo mientérico colónico de ratón.

Imágenes de calcio de las actividades de las neuronas entéricas y la glía en un plexo mientérico colónico de ratón

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Este video demuestra un protocolo para realizar registros electrofisiológicos de una sola fibra en una preparación in vitro del nervio colorrectal de ratón.

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Aprende a registrar la actividad nerviosa aferente mesentérica in vitro en segmentos yeyunales y colónicos de ratón. Este método permite cuantificar la respuesta de los nervios a distensiones y compuestos sin interferencia del sistema nervioso central.

In Vitro de grabación de la actividad nerviosa aferente mesentérica en ratón yeyunal y segmentos del colon

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