Name: Procedimientos de Operación del Electroquimioterapia para el tratamiento de un tumor en perros y gatos (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-24T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 32 s
Description: Aprenda el procedimiento de electroquimioterapia para tratar tumores sólidos en perros y gatos usando bleomicina y cisplatino con electroporación. Este método mejora la acumulación intracelular de fármacos con mínimos efectos secundarios sistémicos.

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Los autores reconocen el apoyo financiero recibido del presupuesto estatal por la Agencia Eslovena de Investigación (programa nº P3-0003, proyecto nº J3-6796). La investigación se llevó a cabo en el ámbito del Laboratorio Europeo Asociado (LEA) de la EBAM. Este manuscrito es el resultado de los esfuerzos de trabajo en red de la Acción COST TD1104. Queremos agradecer a Alenka Seliskar, Mojca Juvan (Facultad de Veterinaria, Clínica de Cirugía y Pequeños Animales) y Jakob Konda (Instituto de Oncología, Liubliana, Liubliana, Eslovenia) por toda su valiosa ayuda.

Este protocolo fue aprobado por el Comité Ético del Ministerio de Agricultura, Bosques y Alimentación y de conformidad con sus directrices. El protocolo fue validado en más de 80 perros y 20 gatos. NOTA: tratamiento de TEC consiste en la administración de cisplatino o bleomicina y la exposición de los nódulos tumorales a impulsos eléctricos. 1. Selección de los pacientes NOTA: La selección del paciente permite al practicante determinar si el paciente es adecuado o no de beneficiarse de este tratamiento. <ol><li> Evaluar el historial del paciente (datos generales acerca de la edad, la raza, el sexo y la presencia de cualquier enfermedad concurrente, el tipo de tumor, la evolución del tumor con el tiempo, los tratamientos anteriores y sus resultados, la recurrencia y la velocidad de recurrencia, las expectativas del propietario sobre el successfulness de la terapia). </li><li> Realizar un examen físico del paciente <ol><li> Evaluar el tumor en detalle con el fin de maga un posible diagnóstico diferencial clínico y realizar una aspiración con aguja fina para la evaluación citológica, y posible biopsia de tejido para la evaluación de la histología con el fin de determinar el área de tratamiento: si se presenta un tumor potencialmente invasoras tratar a los amplios márgenes (tomar la decisión sobre el tamaño de la márgenes tratados de acuerdo con las recomendaciones para cualquier otro tratamiento para el mismo tipo de tumor, por ejemplo, tumor de células cebadas 2r ≤ 1 cm, 1 cm de margen debe ser tratado; r - radio). </li><li> Evaluar el número y tamaño de los nódulos con el fin de preparar un enfoque de tratamiento. </li></ol></li><li> El examen general <ol><li> Implementar un examen general completo con el fin de realizar la estadificación de la enfermedad y comprobar: <ol><li> Si no hay otra enfermedad concurrente que podría excluye el tratamiento, si el paciente tiene una historia de cualquier infección crónica (de acuerdo con la epidemiología en un área determinada) o enfermedad que podría alterar hematológica o coagulat inmune mediadacambios de iones (realizar las pruebas específicas), si el animal es capaz de soportar una serie de sedaciones profundas y / o anestesia general, si el paciente tiene una sensibilidad al cisplatino (dosis estándar es de 60 a 70 mg / m 2 de superficie corporal / 21 d) o bleomicina o que ya ha recibido una dosis acumulada de bleomicina superior a 400.000 UI / m2. </li></ol></li><li> Utilizar técnicas de diagnóstico por la imagen (radiografía de tórax y ecografía del abdomen) con el fin de comprobar cualquier metástasis posibles según el tipo de tumor. </li></ol></li></ol> 2. Análisis de laboratorio <ol><li> Análisis de sangre <ol><li> Realizar hematología completa análisis con un panel de bioquímica de nitrógeno ureico en sangre (BUN), creatinina, alanina-aminotransferasa (ALT), fosfatasa alcalina (FA) y calcio para excluir enfermedades renales y hepáticas crónicas avanzadas y posibles síndromes paraneoplásicos más frecuentes con el fin de determinar la etapa clínica que puede tener un effect en el pronóstico. </li><li> Hacer un análisis de sangre específico adicional: <ol><li> Si se le da al paciente ningún medicamento que potencialmente podría alterar los cambios en la capacidad de coagulación, comprobar el perfil de coagulación. </li><li> Si se utiliza un tratamiento invasivo (electrodos de aguja), compruebe el número de plaquetas; el número de plaquetas debe ser&gt; 100 o en caso de que sea &lt;100, el perfil de coagulación (PT, APTT, fibrinógeno, dímero D) debe ser normal. </li><li> En casos específicos de acuerdo con la enfermedad neoplásica y el estado clínico del paciente comprobar las proteínas totales, albúmina, fósforos, sodio (Na), potasio (K), cloruro (Cl) y la concentración de lipasa. </li></ol></li></ol></li><li> Tumor (s) análisis histológico <ol><li> análisis de la histología no es necesario si el diagnóstico citológico se realizó con anterioridad. En el caso de ciertos tipos de tumores en el que el grado histológico es un factor pronóstico importante (por ejemplo, tumores de mastocitos) realizar hematoxilina y eosina stacaniza 16. NOTA: La biopsia (incisional o &quot;golpe&quot;) se pueden hacer antes del procedimiento durante la misma visita. En cualquier caso, es una buena práctica clínica para diagnosticar el tipo de tumor. NOTA: Después de que el caso está totalmente evaluó una minuciosa discusión y aclaración es necesaria con el dueño del animal. Explicar al propietario lo que la TEC es y lo que podría esperarse de la TEC en términos de resultados clínicos. Discutir con el dueño del ciclo de tratamiento: el número de sesiones de TEC bajo anestesia general o sedación profunda, la duración total del tratamiento, el costo del tratamiento, las posibilidades de recurrencia. Obtener el consentimiento por escrito del propietario en el caso de inclusión de los pacientes en un ensayo clínico de terapia electroconvulsiva, si el paciente es en realidad elegible. </li></ol></li></ol> 3. Elección de Tratamiento de modalidad NOTA: Para la TEC en los perros utilizan cisplatino y bleomicina. Para utilizar la TEC en los gatos bleomicina solamente, como el cisplatino está contraindicado en los gatos. <ol><li&gt; Tratar cada tumor por separado. Determinar la localización y tamaño de cada nódulo y el número de nódulos para delinear el protocolo de tratamiento. </li><li> Calcular el volumen de los nódulos tumorales mediante la fórmula V = ab²π / 6 ( &quot;a&quot; es el diámetro más grande del nódulo tumoral y &quot;b&quot; el diámetro del nódulo tumoral perpendicular a &quot;a&quot;) o V = abcπ / 6 ( &quot; a &quot;,&quot; b &quot;y&quot; c &quot;son tres diámetros perpendiculares del nódulo tumoral). </li></ol> 4. elección de la modalidad de funcionamiento <ol><li> Selección de los electrodos NOTA: Es importante elegir el tipo de electrodo óptima configuración de electrodos como afecta la distribución del campo eléctrico en el tejido. Se utilizan dos tipos de electrodos: electrodos de placa y la aguja. electrodos de placa tienen placas de acero inoxidable paralelos: la distancia interior entre los electrodos depende del tamaño del tumor y de la capacidad del generador de pulsos eléctricos. Por lo general, la distancia seainterpolar los electrodos es de 6-8 mm. electrodos de aguja pueden estar dispuestos en filas (array paralelo) o en la geometría hexagonal. El electrodo hexagonal tiene una aguja central y 6 agujas en una matriz circular. Los pulsos se aplican entre los electrodos en la matriz circular y entre ellos y el central. Los pulsos se aplican en ambas direcciones entre cada par de electrodos. Elija el tipo de electrodo de acuerdo con la profundidad del nódulo tumoral y proporcionar electroporación apropiado en el conjunto deseado zona tratada. Elegir los electrodos de acuerdo con el tejido diana particular. En general, ambos tipos de electrodos se pueden usar para el tratamiento. </li><li> Selección y preparación de cisplatino o bleomicina NOTA: ECT consiste en la administración intratumoral de cisplatino o bleomicina o la administración intravenosa de bleomicina y la exposición de los nódulos tumorales a impulsos eléctricos. <ol><li> Seleccione un citostático adecuado y la ruta de su administración. </li><li> disolver cisplatin (cis-diaminodicloroplatino II), si se obtiene en forma de polvo, en agua destilada a una concentración de 1 mg / ml (de lo contrario farmacéuticamente soluciones preparadas se podrían utilizar). Dar cisplatino por vía intratumoral. </li><li> Disolver bleomicina en una solución salina fisiológica a una concentración de 3 mg / ml y dar por vía intratumoral o por vía intravenosa. </li></ol></li><li> Anestesia NOTA: En función de la modalidad de funcionamiento (Tabla 1) sedación profunda o anestesia general pueden ser utilizados. <ol><li> Evaluar al paciente según la Sociedad Americana de Anestesiología &#39;(ASA) clasificación del estado físico y de acuerdo con el tipo de tumor debido a posibles síndromes paraneoplásicos. </li></ol></li><li> La sedación profunda <ol><li> Utilice medetomidina (0,08 mg / kg) o medetomidina doble combinación (0,025 mg / kg) con tartrato de butorfanol (0,1 mg / kg) en perros o seguir los procedimientos estándar para la sedación profunda en el hospital específico. </li></ol></li><li> Anestesia general <ol> &lt;li&gt; premedicación con acepromazina (0,02 mg / kg) y la metadona (2 mg / kg). </li><li> Treinta minutos más tarde inducir la anestesia general con tiopental (5 mg / kg) o propofol (1 mg / kg). </li><li> Coloque el tubo endotraqueal y mantener la anestesia con isoflurano en oxígeno suministrado a través de un circuito anestésico pieza en T. </li><li> Durante la anestesia utilizan tratamiento de soporte de fluido con la solución de Hartmann a una velocidad de 10 ml / kg / hr y analgesia con una sola dosis de un fármaco analgésico no esteroideo (por ejemplo, carprofeno 2-4 mg / kg). </li><li> Utilice ungüento para los ojos para evitar la sequedad, mientras que bajo anestesia. Después del tratamiento, supervisar al paciente hasta que recupere la conciencia suficiente para decúbito esternal. Mantener al paciente en la clínica durante aproximadamente 2 a 4 horas. NOTA: Los procedimientos estándar para la anestesia general en el hospital específico también puede ser seguido. </li></ol></li><li> Entorno operativo NOTA: haya personal entrenado operadores de ECT (DVM), anestesistas y asistentes. <ol><li&gt; Utilice cualquier habitación de la ambulancia cuando está bajo sedación profunda se lleva a cabo la TEC o cualquier sala de cirugía donde se permite la anestesia general. </li><li> Para la sedación y / o anestesia general todo el equipo necesario de acuerdo con los procedimientos para la anestesia. </li><li> Para el procedimiento de la TEC ver todos los materiales requeridos en la Lista de materiales. </li></ol></li><li> Operador y personal de protección que rodean NOTA: La exposición de la gotita de la piel a los fármacos antineoplásicos rara vez causa problemas agudos. El cisplatino y bleomicina no se absorben a través de la piel intacta. El cisplatino puede causar irritación única. Cisplatino y bleomicina fuga podría ocurrir cuando la inyección de nódulos firmes o tumores. En caso de lesión por pinchazo de aguja, lavar con abundante agua y cuidar de la herida de acuerdo con la práctica médica habitual. <ol><li> Proteger al operador y ayudantes de los alrededores con mascarillas y guantes. En caso de exposición de la piel al cisplatino o solución de bleomicina, lávense inmediata y abundantemente con agua. </li&gt; <li> Establecer medidas de bioseguridad de acuerdo con un programa de seguro de calidad que se ajuste a la normativa local sobre el uso del medicamento contra el cáncer, en su caso. </li></ol></li><li> Generadores de impulsos eléctricos NOTA: Las aplicaciones de impulsos eléctricos puede llevarse a cabo con el generador de impulsos eléctricos. Comúnmente, el aparato es un generador de impulsos de onda cuadrada con un software integrado y una interfaz de pantalla táctil para seleccionar impulsos eléctricos pre-diseñadas. Está equipado con un soporte de electrodo de mano con un botón de impulso de activación unido al generador por medio de un cable. La entrega de pulsos eléctricos puede ser controlado por un interruptor de pie. El generador de impulsos eléctricos deben cumplir con las normas de la Unión Europea: 2006/95 / CE relativa a los materiales de 12/12/2006 electrónico utilizado en determinados límites de tensión 2004/108 / CE de 12/15/2004 relativa a la compatibilidad electromagnética y debe ser compatible con las regulaciones de la FDA. </li><li> Procedimiento de aplicación de impulsos eléctricos NOTA: Japlicación de correo de pulsos eléctricos sigue la administración intratumoral de cisplatino o bleomicina, o administración intravenosa de bleomicina. Cuando se administra por vía intratumoral citostático se debe aplicar lentamente para evitar fugas. Por vía intravenosa citostáticos de administración deben aplicarse en un bolo con una duración aproximada de 30 segundos. Un gel a base de agua se utiliza para conseguir un buen contacto entre la piel y los electrodos, ya sea de placa o de la aguja, y para lograr una distribución de campo eléctrico menos heterogénea. La conductividad de geles debe estar entre 0,5 y 1 m / S 17,18. La conductividad eléctrica del gel usado era 0,5 S / m. Los electrodos de placa se debe colocar de tal manera que el tumor es abarcado entre ellos. Además, para lograr una mejor distribución del campo eléctrico de la aplicación de pulsos eléctricos debe realizarse dos veces en una dirección perpendicular. Si el tumor es mayor que la distancia entre los electrodos, la aplicación de los electrodos debe estrellat de los márgenes del tumor (incluyendo el margen de seguridad) y el progreso hacia el centro del tumor. En el caso de electrodos de aguja, se debe tener cuidado de que todas las agujas se insertan en el tejido para conseguir la distribución apropiada del campo eléctrico. No se necesita la aplicación de un gel. De lo contrario, el procedimiento es el mismo que en el caso de electrodos de placa. <ol><li> Depilar la piel en la zona de aplicación de pulsos eléctricos </li><li> Administrar cisplatino o bleomicina. Si se administra por vía intravenosa citostático esperar a 8 min y el intervalo de tiempo para la entrega de pulsos eléctricos es 20 min. Si citostático se administra por vía intratumoral comenzar con la aplicación de pulsos eléctricos inmediatamente (dentro de 1 min después de la inyección). </li><li> Antes de la aplicación de pulsos eléctricos aplicar un gel a base de agua sobre la piel depilada. </li><li> Para electrodos de placa utilizan estos parámetros del pulso: duración de pulso de 100 microsegundos, amplitud al electrodo Relación de distancia de 1,300 V /cm, frecuencia 1 Hz o 5 kHz. Entregar cada corrida de 8 impulsos eléctricos unipolares de dos trenes de cuatro pulsos, con intervalo de 1 seg, en dos direcciones perpendiculares. </li><li> Para electrodos de aguja con filas utilizar los parámetros del pulso: duración de pulso de 100 microsegundos, amplitud al electrodo Relación de distancia de 1,000 V / cm, frecuencia 1 ó 5 kHz. Cada ejecución de pulsos eléctricos unipolares consta de ocho pulsos. </li><li> Para electrodos de aguja, disponer en un hexagonales parámetros de configuración y uso de pulsos: duración de pulso de 100 microsegundos; el electrodo hexagonal tiene un voltaje fijo de 730 V (si la distancia entre los electrodos es de 7 mm; 1.040 V / cm), con una frecuencia de 5 kHz y el número de impulsos depende del número de agujas. En el caso de agujas 7 se aplican 24 pulsos </li></ol></li><li> La eliminación de material contaminado. <ol><li> Al desechar los materiales contaminados (jeringuillas, agujas, viales, gasas, guantes) en un recipiente destinado a la incineración. </li></ol></li></ol> NOTA: En cada visita, los nódulos tumorales se miden con un pie de rey y fotografiada. Estas visitas también sirven con el fin de evaluar los posibles efectos secundarios locales y sistémicos. Respuesta al tratamiento se obtuvo después de 4 semanas a partir de los criterios de &quot;criterios de evaluación de respuesta en tumores sólidos&quot; (RECIST) 19 como una respuesta completa (RC) - desaparición del nódulo, respuesta parcial (PR) - por lo menos un 30% disminución de la suma de los diámetros de la lesión diana, tomando como referencia los diámetros basales de suma, enfermedad progresiva (PD) - al menos un aumento del 20% en la suma de los diámetros de las lesiones diana, tomando como referencia la más pequeña siendo estudiado suma, enfermedad estable (SD) - ni una contracción suficiente para calificar para PR, ni un aumento suficiente para calificar para el PD, tomado como referencia los diámetros de suma más pequeña. Para todas las definiciones de respuesta se requiere una duración mínima de 4 semanas para qualifying cada tipo de respuesta. El tiempo de observación se calcula como el intervalo entre la fecha de la primera tratamiento y la fecha de la última exploración del paciente. Los posibles efectos secundarios se determinan de acuerdo a la escala de toxicidad Cooperative Oncology Group Veterinaria (VCOG - CTCAE) 20 en cada examen de seguimiento. <ol><li> Programar una cita 1 semana después de la terapia. Programar una cita 2 semanas después de la terapia. Programar una cita 4 semanas después de la terapia. Después de 4 semanas programar una cita una vez al mes. </li></ol>

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<li>Soden, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+application+of+targeted+electrochemotherapy+using+novel+flexible+electrodes+and+low+dose+bleomycin+to+solid+tumours%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Successful application of targeted electrochemotherapy using novel flexible electrodes and low dose bleomycin to solid tumours.</a> Cancer Lett. 232 (2), 300-310 (2006).</li>
<li>Cemazar, M., Avgustin Ambrozic, J., Pavlin, D., Sersa, G., Poli, A., Krhac Levacic, A., Tesic, N., Lampreht Tratar, U., Rak, M., Tozon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+and+safety+of+electrochemotherapy+combined+with+peritumoral+IL-12+gene+electrotransfer+of+canine+mast+cell+tumours%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Comp+Oncol%22%5BJournal%5D)">Efficacy and safety of electrochemotherapy combined with peritumoral IL-12 gene electrotransfer of canine mast cell tumours.</a> Vet Comp Oncol. , (2016).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Electroquimioterapia ha demostrado ser muy eficaz contra diferentes tumores primarios o metástasis en perros y gatos. La electroquimioterapia se puede utilizar con intención curativa de los nódulos tumorales cutánea o subcutánea solitarias o múltiples o como un tratamiento adyuvante a la cirugía. El tratamiento estándar de elección para varios tumores en perros, incluyendo los tumores de células cebadas, es la extirpación quirúrgica del tumor. Un estudio que compara la cirugía como tratamiento estándar de ECT en el tratamiento de tumores de mastocitos en perros demostró que el tratamiento con TEC resultó en 70% de respuestas completas mientras que la cirugía resultó en 50% de respuestas completas 11 demuestra que la TEC es un tratamiento equivalente a la cirugía. Para la eficacia antitumoral pronunciada de la TEC dos condiciones tienen que cumplirse, que son pasos críticos en el protocolo. La primera de ellas es la administración de citostáticos. La presencia del fármaco en los tejidos diana determina la eficiencia ECTque el medicamento tiene que estar presente dentro de las células con el fin de matarlos. Al inyectar el medicamento por vía intratumoral, el signo de una buena retención de tejido es el blanqueamiento de los tejidos. Además, algunos fuga de solución después de la administración podría ocurrir a través de los agujeros producidos por la aguja en el tumor o en necrotizante tejidos durante más sesiones de ECT. Por lo tanto, llegando a 1 mg / cm 3 (cisplatino) o 3000 UI / cm 3 (bleomicina) las concentraciones podrían entonces ser puramente teórico en esos casos, sin embargo, el objetivo es tratar de retener la mayor cantidad posible de solución en los tejidos diana. Además, los impulsos eléctricos deben aplicarse lo más rápidamente posible con el fin de obtener un efecto vasoconstrictor que contribuye a la retención de solución. Dos vías de administración pueden ser utilizados con la TEC: intratumoral e intravenosa. La eficacia antitumoral de ECT con cisplatino intratumoral o bleomicina o con bleomicina por vía intravenosa es comparable 21 mientras que electrochemotherapy con la aplicación intravenosa de cisplatino es menos eficaz, por tanto, cisplatino 22 sólo se utiliza en la administración intratumoral. Otra característica importante de la droga cisplatino es que su uso en los gatos está contraindicado como cisplatino ha demostrado ser altamente tóxicos en los gatos 23. Si el paciente tiene uno o sólo unos nódulos, a continuación, se recomienda una vía intratumoral. Si el número de nódulos excede ~ 5 nódulos, a continuación, se recomienda una ruta intravenosa. La inyección intratumoral de cisplatino tiene cierta eficacia antitumoral incluso sin la aplicación de pulsos eléctricos, mientras que la bleomicina, debido a su alto carácter hidrófilo, no lo hace. Por lo tanto, el cisplatino es el primer fármaco de elección si la aplicación intratumoral es posible en los perros. Esto es importante debido a la segunda condición que debe cumplirse para que la acción antitumoral efectiva de la TEC y que es la cobertura de todo el tumor con un nivel suficientemente alto campo eléctrico. Para obtener el aumento de la célulapermeabilización de la membrana, el campo eléctrico inducido en el tejido debe ser superior a un determinado umbral. La distribución del campo eléctrico en el tejido depende de los electrodos, por lo tanto, es importante qué tipo de electrodos se utilizan. Placa o electrodos de matriz paralelas pueden utilizarse con seguridad para los pequeños tumores superficiales 24. Si los tumores son más gruesas y más grande, electrodos hexagonales son más adecuados. Un hecho importante es que la aplicación de los impulsos eléctricos se puede repetir, de manera que toda el área del tumor está cubierto, incluyendo los márgenes de seguridad. Desde impulsos eléctricos causan bloqueo vascular, su aplicación debe comenzar desde el borde del tumor, hacia su centro. Actualmente, la limitación de la técnica es la disponibilidad de los electrodos que impide el tratamiento de tumores profundamente asentados. Sin embargo, la configuración de los electrodos es una función tecnológica que se está desarrollando rápidamente y ahora diferentes conjuntos de electrodos se utilizan fo administraciones específicas de larga aguja de electrodos individuales para las metástasis de los tumores de colon en el hígado 25, metástasis óseas 7, sarcoma de tejidos blandos 26, electrodos endoluminales para colorrectal, gástrico y tumores de esófago 27 y &#39;&#39; electrodos del tipo &quot;globales&quot; expandibles para los tumores cerebrales 8 . ECT puede ser eficaz, ya que sólo un tratamiento de una sola vez, pero en el caso de fallo o respuesta parcial del tumor se puede repetir varias veces con una eficacia mejorada. La TEC es un tratamiento ablativo local. Su eficacia local es de hasta 80% de control local del tumor pero sin un efecto notable en metástasis a distancia 7, que es otra limitación de la terapia. Por lo tanto, para lograr una respuesta sistémica, ECT se podría combinar con otras terapias. Recientemente, hemos propuesto la combinación de TEC con otra aplicación biomédica de la electroporación, es decir, la electrotransferencia gen de la Molec inmunomoduladorule interleucina-12 (IL-12), que es conocida por su actividad antitumoral. Combinación de ECT y electrotransferencia gen con IL-12 ya ha demostrado ser una terapia combinada seguro y sin efectos secundarios y buena local del tumor con alta tasa de respuesta completa 28, que también previno la recurrencia de metástasis a distancia. En conclusión, las ventajas de electroquimioterapia son su simplicidad, la corta duración de las sesiones de tratamiento, las dosis bajas citostáticos y efectos secundarios insignificantes. Además, se realiza de forma ambulatoria, por lo tanto, los pacientes no tienen que permanecer en el hospital. Hoy en día, la disponibilidad de los distintos generadores de impulsos eléctricos en el mercado es cada vez mayor, lo que lleva también a la reducción del precio de los generadores sin pérdida de fiabilidad y de ese modo hacer Electroquimioterapia aún más asequible. Todos ellos deben dar lugar a un mayor uso de esta terapia en la medicina veterinaria.

ECT es una técnica de ablación local para el tratamiento de tumores de diferentes histologías. resultados de ablación de la muerte celular inducida por fármacos, que es un resultado del aumento de la acumulación del fármaco en las células debido a cambio de permeabilidad de la membrana celular inducida por la entrega directa de impulsos eléctricos en la piel alrededor del tumor después de la inyección intratumoral o intravenosa del fármaco. El principal mecanismo de la TEC es mejorar la eficacia de los fármacos citostáticos por aumento de la acumulación intracelular de los fármacos, por electropermeabilization membrana celular (electroporación) 1,2. La electroporación provoca un aumento de la captación del fármaco de dos citostáticos: bleomicina y cisplatino, que son fármacos hidrófilos con baja permeabilidad de la membrana. Debido al aumento de la citotoxicidad de la bleomicina y cisplatino en el sitio de aplicación del impulso eléctrico, se necesitan dosis bajas de medicamentos para la buena eficacia antitumoral y, en consecuencia mínimos o nulos efectos secundarios sistémicos de los fármacos son observed 3. Otra característica de la TEC es un efecto antivascular tumor que resulta en primer lugar en la cerradura vascular, es decir., Disminución del flujo sanguíneo dentro del tumor, y por lo tanto la retención de citostáticos dentro de ella y en segundo lugar en un vascular interrumpir la acción, es decir., Muerte directa de las células endoteliales de los vasos sanguíneos pequeños que conduce a la muerte de las células tumorales secundaria 4-6. El tercer mecanismo de ECT eficacia antitumoral es la activación del sistema inmune como ECT provoca una respuesta inmune por el antígeno tumor vertimiento en los alrededores del tumor. La participación del sistema inmune es crucial para la erradicación completa del tumor 7. ECT ha mostrado un gran potencial en oncología humano, donde ECT ya se utiliza como un tratamiento estándar de los tumores cutáneos y subcutáneos, ya que presenta hasta un 80% de respuestas objetivas 3. Además, la terapia electroconvulsiva se utiliza en varios estudios clínicos que tratan las metástasis tumorales en el cerebro <shasta&gt; 8, 9 ósea y el hígado 10. Los estudios clínicos en oncología veterinaria ya han demostrado que el tratamiento con TEC en hasta un 80% respuestas objetivas de larga duración en el tratamiento de tumores cutáneos y subcutáneos en los perros 11, 12, 13 gatos y caballos 14. La eficacia antitumoral depende del tamaño del tumor y tumores menores de 2 cm 3 responden mejor que los tumores más grandes 15. Además, un estudio que compara la cirugía con ECT en el tratamiento de tumores de mastocitos en perros demostró que el tratamiento con TEC resultó en 70% de respuestas completas mientras que la cirugía resultó en 50% de respuestas completas 11 demuestra que la TEC es un tratamiento equivalente a la cirugía. Además, ECT representa un método alternativo para el tratamiento de tumores sólidos para tratamiento quirúrgico, concretamente en aquellos casos en que los propietarios no consienten a la cirugía o si los tumores son difíciles de impuestos especiales con márgenes claros sobre todo debido a suubicación (por ejemplo, la infiltración de los vasos, tumores de la cabeza o de la pierna, en la región anal, etc.). El objetivo de este trabajo es definir los procedimientos de operación de la TEC dando instrucciones para el uso de cisplatino y bleomicina en combinación con la aplicación de pulsos eléctricos con el fin de tratar con seguridad y de manera apropiada los tumores cutáneos y subcutáneos en perros y gatos.

<table><tbody><tr><td>Cisplatino Kobi</td><td>Fresenius Kobi Oncología, Hampshire, Gran Bretaña</td><td></td><td>medicamento citostático</td></tr><tr><td>Bleomycin PCH</td><td>Pharmachemie B.V., Haarlem,</td><td>medicamento citostático</td>holandés <td></td></tr><tr><td>AquaUltra</td><td>Basic Ultragel, Budapest, Hungría</td><td></td><td>gel a base de agua&nbsp;</td></tr><tr><td>Electropulsador ELECTROvetS13&nbsp;</td><td>Leroy biotech, Toulouse, Francia</td><td></td><td>Generador de pulsos de onda cuadrada</td></tr></tbody></table>

procedimientos de operación del electroquimioterapia para el tratamiento de un tumor en perros y gatos

Operating Procedures of the Electrochemotherapy for Treatment of Tumor in Dogs and Cats

Electroquimioterapia (ECT) es un enfoque local que se utiliza para el tratamiento de tumores sólidos de diferentes histologías. Su mecanismo se basa en la permeabilización de la membrana celular por medio de &quot;electroporación&quot;. Para lograr el &quot;electroporación&quot; de las células, pulsos eléctricos son generados por un generador y se entregan al tejido diana por el uso de electrodos. La electroporación es un método físico que se utiliza para introducir moléculas, como citostáticos, en las células que no podía pasar la membrana celular por su cuenta. En Electroquimioterapia, en la actualidad, se utilizan clínicamente cisplatino y bleomicina. Eficacia antitumoral Electroquimioterapia es alta, por ejemplo de hasta 100% de respuesta completa de los mastocitos caninos tumores se logró más pequeño que 2 cm 3. Además, electroquimioterapia se puede utilizar para el tratamiento de tumores inoperables. Una de las características importantes de electroquimioterapia es que puede ser eficaz como un tratamiento de una sola vezsolamente. Sin embargo, en el caso de fracaso o la respuesta parcial del tumor se puede repetir varias veces con igual o mayor eficacia. Electroquimioterapia ya es un tratamiento estándar para los tumores cutáneos y subcutáneos de diversas histologías en oncología humana y veterinaria. Por otra parte, varios estudios clínicos que explotan Electroquimioterapia para tumores profundos están en curso.

El caso presenta un tumor de células mástil situado en el párpado de un perro. El paciente fue tratado con cisplatino se inyecta por vía intratumoral y la aplicación de los 8 pulsos eléctricos que utilizan electrodos de placa. El tamaño del tumor era de 5 mm. Debido a la zona sensible de la anestesia general la ubicación del tumor se utilizó. De acuerdo con el tamaño del tumor 0,5 ml (0,5 mg) de cisplatino se inyectó por vía intratumoral. Una min después de la inyección se aplicaron pulsos eléctricos usando un electrodo de placa 8 mm. se aplicó sólo una carrera de pulsos eléctricos. Después del tratamiento fue supervisado el paciente hasta que recobró el conocimiento suficiente. El paciente fue liberado después de dos horas. Después de una semana, la paciente acudió para un chequeo de rutina. El tumor ulcerado y el área alrededor del tumor fue ligeramente hinchada. El tumor se midió por Nonio y fotografiada. Un mes después de las treatment se observó ninguna evidencia adicional del tumor. La herida se cerró y cicatriz con alopecia fue visto en el sitio de tratamiento. Después del tratamiento el perro no mostró ningún signo de dolor, la función del párpado se ha conservado durante todo el período de curación y los efectos cosméticos después del tratamiento son excelentes. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/54760/54760fig1.jpg" /> Figura 1. Tratamiento Electroquimioterapia. La figura que muestra el perro antes del tratamiento (A), una semana (B), un mes (C) y tres meses después del tratamiento (D). Tumor de células (A) del mástil en el párpado inferior. El perro boxeador alemán de 2,5 años de edad con un tamaño del tumor de 5 mm antes de la terapia. (B) después de la terapia del tumor comenzó a ulcerarse y el tejido que rodea la zona a electroporación se volvió ligeramente hinchada. dos noseks después de la terapia de una costra formada en el sitio del tumor y se cayó (no mostrado). (C) Un mes después de electroquimioterapia se observó ninguna evidencia de tumor y cicatriz con alopecia fue visto en el sitio del tumor. (D) Tres meses después de Electroquimioterapia reepitelización total se presentó en el sitio del tumor. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54760/54760fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td><td colspan="2"> modalidad de operación (OM) </td></tr><tr><td> Número, volumen y la ubicación de los nódulos tumorales </td><td> UN </td><td> segundo </td></tr><tr><td> 1 - 3 nódulos &lt;1 cm³ tumores de la piel y orales </td><td> √ </td><td></td></tr><tr><td> &gt; 3 nódulos, toda la piel volumen y tumores orales se dirigen </td><td></td><td> √ </td&gt; </tr><tr><td> cualquier número, cualquier volumen de la piel y tumores orales cabeza </td><td></td><td> √ </td></tr></tbody></table> Tabla 1. La selección de modalidad de funcionamiento se basa en el número de nódulos tumorales y su tamaño sedación profunda = OM A.; La anestesia general = OM B. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Quimioterapéutico / tamaño del tumor </td><td> aplicación intratumoral </td><td> aplicación intravenosa </td></tr><tr><td> Dosis de cisplatino (1 mg / ml) &lt;1 cm 3 </td><td> 1 ml (1 mg) / cm 3 de tumor </td><td></td></tr><tr><td> Dosis de cisplatino (1 mg / ml)&gt; 1 cm 3 </td><td> 0,5-1 ml (0,5-1 mg) / cm 3 de tumor </td><td></td></tr><tr><td> Dosis de bleomicina (3,000 UI / ml) &lt;1 cm 3 </td><td> 0,5 ml (1.500 UI) / cm3 de tumor </td><td> 300 UI / kg </td></tr><tr><td> Dosis de bleomicina (3,000 UI / ml)&gt; 1 cm 3 </td><td> 0,5 - 1 ml (1.500-3.000 UI) / cm 3 de tumor </td><td> 300 UI / kg </td></tr></tbody></table> Tabla 2. El volumen de inyección apropiado de citostáticos de acuerdo con la vía de administración y el tamaño del tumor en los perros. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Quimioterapéutico / tamaño del tumor </td><td> aplicación intratumoral </td><td> aplicación intravenosa </td></tr><tr><td> Dosis de bleomicina (3,000 UI / ml) &lt;1 cm 3 </td><td> 0,5 ml (1.500 UI) / cm 3 de tumor </td><td> 300 UI / kg </td></tr><tr><td> Dosis de bleomicina (3,000 UI / ml)&gt; 1 cm 3 </td><td> 0,5 - 1 ml (1.500 - 3.000 UI) / cm 3 de tumor </td><td> 300 UI / kg </td></tr></tbody></table>Tabla 3. El volumen de inyección apropiada de citostáticos de acuerdo con el tamaño del tumor en los gatos.

La electroquimioterapia es el tratamiento local de los tumores sólidos. El mecanismo principal es la permeabilización mediada por electroporación de la membrana de las células tumorales, lo que permite una mayor internalización de citostáticos como la bleomicina y el cisplatino. Así, la eficacia antitumoral se potencia en el lugar de aplicación de los pulsos eléctricos a los tumores.

Procedimientos de Operación del Electroquimioterapia para el tratamiento de un tumor en perros y gatos

Electrochemotherapy (ECT) is a local approach which is used for treating solid tumors of different histologies. Its mechanism is based on cell membrane ...

El objetivo general de este procedimiento es tratar tumores cutáneos y subcutáneos en perros y gatos mediante el uso de fármacos citostáticos en combinación con la aplicación de pulsos eléctricos. La electroquimioterapia es un enfoque local que se utiliza para tratar tumores sólidos de diferentes histologías. Su mecanismo se basa en la permeabilización de la membrana celular mediante electroporación.El mecanismo principal de la electroquimioterapia consiste en potenciar la eficacia de los fármacos quimioterapéuticos mediante la electropermeabilización, lo que incrementa la acumulación intracelular del fármaco. La electroporación provoca una mayor absorción de dos fármacos quimioterapéuticos, bleomicina y cisplatino, que son compuestos hidrófilos con baja permeabilidad de membrana. El caso presentado muestra el procedimiento de tratamiento en un perro bóxer alemán con un tumor de células mastocíticas diagnosticado en el párpado inferior.Pueden utilizarse dos vías de administración diferentes con la electroquimioterapia: intratumoral e intravenosa. El cisplatino puede administrarse por vía intratumoral, mientras que la bleomicina puede administrarse por vía intratumoral o intravenosa. Las concentraciones de los fármacos son bajas y no presentan efectos secundarios sistémicos.La aplicación de pulsos eléctricos puede realizarse con cualquier generador de pulsos eléctricos que produzca pulsos eléctricos de onda cuadrada con amplitud y duración adecuadas, y con frecuencia suficiente. El generador utilizado para la elaboración de este video cuenta con un software integrado y una interfaz táctil para seleccionar pulsos eléctricos predefinidos. Está equipado con un soporte manual para electrodos que incluye un botón activador de pulsos, conectado al generador mediante un cable.Los pulsos eléctricos se activan mediante un interruptor de pedal. Al inyectar el fármaco intratumoralmente, el indicio de una buena retención en el tejido es el blanqueamiento del tejido. Preste atención a la posible fuga del fármaco que puede ocurrir durante la inyección intratumoral.Los pulsos eléctricos deben aplicarse lo más rápidamente posible para obtener el efecto vasoconstrictor, que contribuye a la retención de la solución del fármaco que se inyecta. Un buen contacto entre los electrodos y la piel es muy esencial, lo cual puede asegurarse mediante la depilación y la aplicación de gel a base de agua cuando se utilizan electrodos de placas. Los pulsos eléctricos se administran a través de electrodos que pueden tener diferentes configuraciones.Se pueden utilizar electrodos de placa o de aguja. Su elección depende de la ubicación, el tamaño y el grosor del tumor. En este caso, se utilizaron electrodos de acero inoxidable no invasivos en forma de placa, con una distancia de siete milímetros entre los electrodos.Los parámetros de los pulsos eléctricos cuadrados se configuran en la pantalla táctil. Otra característica de la electroquimioterapia es la inducción de un bloqueo vascular, o disminución del flujo sanguíneo dentro del tumor, y en consecuencia, la retención de los fármacos quimioterapéuticos en su interior, lo que puede considerarse como una isquemia leve y breve. En consecuencia, debido al efecto disruptivo sobre los vasos sanguíneos, se previene el posible sangrado del tumor tratado.Se recomienda la primera evaluación después de una semana para analizar los posibles efectos secundarios locales y sistémicos. Después de una semana, el tumor se ulceró y la zona alrededor del tumor presentaba una ligera hinchazón. La visita de seguimiento a los treinta días sirve para evaluar la respuesta al tratamiento.La respuesta al tratamiento depende de una diferencia en el volumen del tumor. Por lo tanto, los nódulos tumorales se miden con un calibrador Vernier y se fotografían. Después de cuatro semanas, no se observó ninguna evidencia del tumor.Se cerró la herida y se observó una cicatriz con alopecia en el sitio de tratamiento. Después del tratamiento, el perro no mostró ningún dolor, la función del párpado se ha conservado durante todo el tiempo de cicatrización, y los efectos cosméticos tras el tratamiento son excelentes. La electroquimioterapia puede aplicarse en nódulos tumorales cutáneos o subcutáneos solitarios o múltiples con intención curativa o como tratamiento adyuvante a la cirugía.La electroquimioterapia es efectiva como tratamiento único, pero en caso de fracaso o respuesta tumoral parcial, puede repetirse varias veces con una eficacia mejorada. En conclusión, las ventajas de la electroquimioterapia son su simplicidad, la corta duración de las sesiones de tratamiento, las dosis bajas de quimioterapia y los efectos secundarios insignificantes. Además, se realiza de forma ambulatoria.Por lo tanto, los pacientes no tienen que permanecer en el hospital.

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Investigación

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