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DOI: 10.3791/54767-v
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This study establishes a mammalian cell-based in vitro culture system for Zika virus (ZIKV) to investigate its replication and facilitate drug development. The detailed protocol aims to enhance understanding of ZIKV pathogenesis and support large-scale virus production for therapeutic purposes.
El virus del Zika (ZIKV), un patógeno emergente, está relacionado con anomalías del desarrollo fetal y microcefalia. El establecimiento de un sistema eficaz de cultivo de células infecciosas es crucial para los estudios de replicación del ZIKV, así como para el desarrollo de vacunas y fármacos. En este estudio, se ilustran y discuten varios ensayos virológicos relacionados con el ZIKV.
El objetivo general de este estudio es establecer un sistema de cultivo infeccioso del virus del Zika basado en células de mamíferos para estudiar la replicación del virus del Zika, así como la utilización de la plataforma in vitro para el desarrollo de fármacos. Este protocolo detallado paso a paso del sistema de cultivo de células infecciosas del virus del Zika puede ayudar a abordar el mecanismo de la patogénesis de la enfermedad mediada por el virus del Zika y la evolución de la virulencia viral. La principal ventaja de esta técnica es que puede permitir la producción a gran escala del virus del Zika para el desarrollo de fármacos y vacunas.
Comience cosechando células Vero al 80% de densidad celular en un matraz de cultivo T75 aspirando el medio del matraz y enjuagando las células con dos mililitros de solución salina tamponada con fosfato. Añadir dos mililitros de tripsina al 0,25% e incubar el matraz a 37 grados centígrados durante cinco minutos. Después de la incubación, agregue ocho mililitros de medio de crecimiento que contenga suero para inactivar la tripsina.
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