Name: Un método para extraer pigmentos de calamar Pealeii Doryteuthis (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-09T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 3 s
Description: Aprende a extraer pigmentos de cromatóforos de calamar Doryteuthis pealeii mediante digestión enzimática y homogeneización. Este método permite estudiar los mecanismos nanométricos del cambio de color en cefalópodos.

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Los autores agradecen el uso de las instalaciones de la Universidad de New Hampshire, incluido el Centro de Instrumentación de la Universidad. Este trabajo contó con el apoyo del Departamento de Química de la Universidad de New Hampshire.

los estudios en animales invertebrados realizadas en este documento no están regulados en los Estados Unidos; Por lo tanto, el Comité de Cuidado y Uso de Animales institucional no tiene autoridad para la revisión de dichos protocolos. En lugar de estos no cae bajo la jurisdicción de la regulación en los Estados Unidos, los autores declaran que estos estudios fueron realizados con un esfuerzo sincero hacia el uso ético, el cuidado y el tratamiento de estos animales, se redujo al mínimo el número de individuos y estos esfuerzos son consistentes con la Declaración de Basilea y el Consejo Internacional para la Ciencia Animal de Laboratorio (ICLAS) las directrices éticas. 1. Doryteuthis pealeii (pealeii D.) La disección <ol><li> Compra de calamar decapitado D. pealeii del Departamento de Recursos Marinos en el Laboratorio de Biología Marina en Woods Hole, MA o de cualquier mercado de pescado fresco. No utilice muestras que han sido previamente fileteados o alterados con el fin de aplicar este procedimiento. Específicamente, el cromacapa tophore todavía debe estar intacto en la muestra. <ol><li> Si los animales no se utilizan inmediatamente, almacenar a -20 ° C hasta su uso. Para descongelar las muestras, colocarlos en agua a temperatura ambiente durante 1 hora antes de la disección. </li></ol></li><li> El uso de acero inoxidable tijeras de disección de punta fina rectas, cortadas a lo largo de la parte posterior del animal. Comience en la base del manto ventral, y terminará en la región de la aleta. </li><li> Eliminar todos los órganos internos (estómago, las branquias, glándula de tinta, órganos reproductivos, corazón sistémico, y el corazón braquial) levantándolas con pinzas de disección y la ruptura de su tejido conjuntivo con tijeras de disección. Desechar los órganos en una bolsa de muestras. </li><li> Utilice la disección de T-alfileres para fijar el manto (lado de las aletas hacia arriba) en un estándar de 11-1 / 2 &quot;x 7-1 / 2&quot; x 1-1 / 2 &quot;pan disección de aluminio que contiene una almohadilla de disección flexible. Sumergir el tejido en 250 ml de agua de mar que se ha filtrado a través de un sistema de filtración a vacío desechable de poliestirenoque contiene 0,2 micras tamaños de poro. </li><li> Retirar con cuidado la capa epidérmica de la piel (color opaco) con pinza de disección, manteniendo intacta la capa de piel que contiene chromatophore. Una vez que se retira la capa epidérmica, desprenderse de ella en una bolsa de muestras. </li><li> Diseccionar pequeños (1 cm x 1 cm) de las secciones de la capa de chromatophore con unas pinzas y tijeras de disección. Recoger muestras en tubos de 1,5 ml de microcentrífuga (llene la mitad de cada tubo de vacío con el tejido diseccionado). </li><li> Añadir 500 l de agua de mar filtrada al tejido que contiene tubos. Las muestras se pueden almacenar durante la noche a 4 ° C. </li></ol> 2. Aislamiento de chromatophore pigmento gránulos <ol><li> La digestión del tejido <ol><li> Preparación de papaína / colagenasa <ol><li> Pesar 30 mg de colagenasa y 5 mg de papaína utilizando una &quot;x 4&quot; bajo nitrógeno 4 Documento de pesar. Transferirlas a un tubo de centrífuga de polipropileno de 50 ml con tapón de rosca. </li><li> Medir 10 ml de deionized agua usando una pipeta graduada. Añadir directamente al vial que contiene papaína / colagenasa. Vórtice a la máxima temperatura hasta que la solución es clara. </li></ol></li><li> La eliminación de tejido extracelular <ol><li> Centrifugar el tejido chromatophore recogido de la etapa 1.7 durante 5 minutos a 14.000 x g. Desechar la capa superior de agua de mar en un cubo de residuos plásticos. </li><li> Añadir 500 l de la solución de papaína / colagenasa al tejido usando una micropipeta de volumen variable solo canal P1000. Vortex cada muestra durante 1-2 minutos en la posición más alta. </li><li> Sonicar las muestras durante 5 min a una frecuencia de 40 kHz para disociar las células del tejido circundante. </li><li> Centrifugar durante 5 min a 14.000 x g. Descartar el sobrenadante en un cubo de residuos plásticos. </li><li> Centrifugar el tejido chromatophore recogido durante 5 min a 14.000 x g. Desechar la capa superior de agua de mar en un cubo de residuos plásticos. Repetir una vez más. </li><li> quitar manualmente cualquier tejido seg gran restantelas que no digieren en este proceso con unas pinzas antes de proceder al siguiente paso. </li></ol></li></ol></li><li> El aislamiento del pigmento gránulos <ol><li> Preparación de tampón de homogeneización <ol><li> Pesar 2,38 g de (4- (2-hidroxietil) -1-piperazinetanosulfónico) (HEPES, 100 mM), 0,095 g de cloruro de magnesio (10 mM), 0,856 g de potasio-aspartato (50 mM), y 0,015 g de ditiotreitol (1 mM). Transferir a un recipiente de poliestireno 150 ml con un tapón de rosca. Añadir un inhibidor de la proteasa de mini tableta comercial. </li><li> Medir 100 ml de agua desionizada usando un cilindro graduado. Añadir directamente al recipiente que contiene las sales de homogeneización. Vortex hasta que la solución es clara. </li></ol></li><li> La homogeneización de gránulos de pigmento <ol><li> Centrifugar cada muestra de la etapa 2.1 a 14.000 xg durante 5 min. Descartar el sobrenadante en un cubo de residuos plásticos. Esta muestra debe ser nula de tejido extracelular. </li><li> Añadir 500 y# 181; l de tampón de homogeneización a cada tubo y agitar durante 1-2 minutos cada uno para mezclar bien las muestras. Sonicar las muestras para 30 min (~ 40 kHz) y seguir con 5 min de centrifugación a 14.000 x g. </li><li> Descartar el sobrenadante en un cubo de residuos de plástico, y repetir el paso anterior 2-3 veces para asegurar la digestión completa de las correas de sujeción sáculo chromatophore y proteínas. La solución restante debe contener un sobrenadante de color amarillo claro y un sedimento de color rojo que contiene los gránulos de pigmento aisladas. </li></ol></li></ol></li></ol> 3. Pigmento Extracción <ol><li> Preparación de metanol ácido (HCl-MeOH) <ol><li> Añadir cuidadosamente 25 l de concentrado (36,5 a 38% (w / w)) de ácido clorhídrico (HCl) a 5 ml de metanol (MeOH). Almacenar la solución de HCl-MeOH en un vial de muestra de vidrio tapón de rosca. Agitar suavemente para mezclar uniformemente la solución. NOTA: La más ácida la solución, la más pigmento se extrajo durante la fiextracción de primera. </li></ol></li><li> Extracción de Pigmento <ol><li> Centrifugar la suspensión de gránulos de pigmento (de 2.2.2) durante 5 min a 14.000 xg y descartar el sobrenadante en un cubo de residuos de plástico. </li><li> Añadir 500 l de la solución de HCl-MeOH y agitar cada muestra para ~ 3-4 min. Sonicar las muestras para 10 min (~ 40 kHz), centrifugar durante 5 min a 14.000 x g. </li><li> Usando una pipeta de transferencia, recoger el sobrenadante en un vial de vidrio con tapa de rosca 1 dram. El sobrenadante debería ser de color rojo oscuro. </li><li> 3.2.2 Repetir la etapa de extracción hasta que ya no se extrae el color (~ 4-5 lavados). NOTA: Cada extracción producirá ~ 1,5 ml de pigmento. El sedimento restante es incoloro los gránulos de pigmento extraído. NOTA: Los dos gránulos incoloros y pigmentos extraídos se pueden almacenar en agua a 4 ° C hasta su uso posterior. </li></ol></li></ol> 4. Caracterización largo proceso de extracción <ol><li> El Escaneoectron Microscopía <ol><li> La imagen de gránulos (sin reaccionar de la etapa 2.2.1 y pigmento extraído de la etapa 3.2.3) usando microscopía electrónica de barrido (SEM) para verificar la pureza del proceso de extracción. </li><li> Para preparar las muestras de los gránulos para formación de imágenes, primero centrífuga tanto gránulos que no han reaccionado y los gránulos de pigmento se extrajo durante 5 minutos a 14.000 xg, y descartar el sobrenadante en un cubo de residuos de plástico. Vuelva a suspender estos en 1 ml de etanol, y depósito de 2-3 gotas de la suspensión de gránulos Onto trozos de aluminio SEM utilizando una pipeta de transferencia. </li><li> Después de secar las muestras durante la noche, revestir con recubrimiento de oro-platino durante 3 minutos para lograr un revestimiento de 15 nm. </li><li> Imagen utilizando un SEM con un emisor Schottky y un detector de electrones secundarios. Utilice un voltaje del haz de 5-7 kV y una distancia de trabajo entre 8 y 9 mm a imagen de estos materiales. </li></ol></li><li> Las mediciones espectrofotométricas ultravioleta-visible (UV-VIS) <ol><li> Supervisar el pro absorbanciaarchivos para las 3 condiciones (gránulo sin reaccionar de 2.2.2, 3.2.3 pigmento extraído de, y pigmentos extraídos de gránulos 3.2.4) utilizando un espectrofotómetro de doble haz de 200-800 nm. </li><li> Se recoge una medida en blanco usando agua desionizada en una cubeta de 1 ml para los gránulos sin reaccionar y los gránulos de pigmento extraído. Recoger los espectros de absorción UV-Vis para ambas muestras. </li><li> Se recoge una medida en blanco utilizando la solución de metanol ácido en una cubeta de 1 ml para el pigmento extraído. Recoger espectro de absorción UV-Vis para la muestra. </li><li> Determinar la máxima longitud de onda de cada muestra mediante la identificación de la longitud de onda a la que el pico de absorbancia alcanza su altura máxima relativa. </li></ol></li></ol>

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</ol>

No tenemos nada que revelar.

Hemos demostrado un método para extraer pigmentos de gránulos cromatóforos calamar. Al dirigirse específicamente a los gránulos, nuestro objetivo es determinar su papel en la mediación de la coloración de adaptación. Este método difiere de informes anteriores diseñados para caracterizar los pigmentos de cefalópodos usando muestras de tejido a granel 14 o liofilizado piel 15. Mientras que este protocolo es eficaz en la extracción de pigmentos cromatóforos, se limita a la...

Cefalópodos como el calamar, la sepia, el pulpo y tienen la capacidad de alterar su apariencia dinámica para camuflar y señalización. 1-6 Esta capacidad es apoyado en parte por la expansión de área selectiva de órganos pigmentadas conocidas como cromatóforos. 4,7-9 Cromatóforos son actuadores blandos que contienen una red de gránulos de pigmento nanoestructurados confinados dentro de un sáculo cytoelastic que está anclado radialmente por las fibras musculares. 1,3 a medida que se accionan, cromatóforos expanden por 500% de la superficie presentado la distribución de los gránulos de todo el órgano. 3,7 10,11 Cuando esta acción es concertada a través de una serie de cromatóforos, se cambia la coloración general del animal. Aunque se sabe que los gránulos de pigmento contribuyen a este cambio de color, su composición sigue siendo desconocido. Se describe un procedimiento para aislar y purificar los pigmentos cromatóforos que pueden ser adaptados para futuros estudios de composición. 3,12 chromatophore tejido que contiene se cosecha a través de la extirpación cuidado del cefalópodo. Un proceso de la digestión y la homogeneización se utiliza a continuación para disociar el tejido circundante y separar las células cromatóforos. Los gránulos nanoestructurados son entonces aislado y purificado a partir de los restantes cromatóforos utilizando sonicación y centrifugación repetidas. Tras la purificación, los pigmentos se extraen de los gránulos en un proceso que es una adaptación de la extracción de color visible de alas de mariposa usando soluciones de metanol ácidos. Microscopía electrónica 13 de barrido (SEM) y espectrofotometría se utilizan para confirmar que los pigmentos cromatóforos se extraen con éxito utilizando este proceso. Este método describe el aislamiento de gránulos cromatóforos que se utiliza para explorar las contribuciones moleculares acoloration en cefalópodos. 12 extracciones de moléculas de animales enteros a menudo puede ser un proceso largo y tedioso. El objetivo es informar a los futuros investigadores de un protocolo eficaz y fácil para la adquisición de los pigmentos de los gránulos nanoestructurados en los cefalópodos.

<table><tbody><tr><td>Colagenasa</td><td>Alfa Aesar</td><td>9001-12-1</td><td>Sin peligro</td></tr><tr><td>Dithiothreitol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>3482-12-3</td><td>Irritante, toxicidad aguda</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>7365-45-9</td><td>Irritante leve</td></tr><tr><td>Ácido clorhídrico</td><td>EMD Chemicals</td><td>7647-01-0</td><td></td></tr><tr><td>K-Aspartato</td> corrosivo <td>Sigma-Aldrich</td><td>1115-63-5</td><td>Reacciona violentamente con oxidantes</td></tr><tr><td>Cloruro de magnesio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>7786-30-3</td><td>Irritante ocular leve</td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Pharmco-AAPER</td><td>67-56-1</td><td>Altamente inflamable</td></tr><tr><td>Mini comprimido inhibidor de la prtoeasea</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>469315-90-01</td><td>Corrosivo para el metal y la piel</td></tr><tr><td>Papaína</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9001-73-4</td><td>Irritante&nbsp;</td></tr></tbody></table>

un método para extraer pigmentos de calamar<em&gt; pealeii doryteuthis</em

A Method for Extracting Pigments from Squid Doryteuthis pealeii

Los cefalópodos pueden experimentar cambios rápidos y adaptativos en la coloración dérmica con fines de detección, comunicación, defensa y reproducción. Estas capacidades están respaldadas en parte por la expansión y retracción de área de órganos pigmentados conocidos como cromatóforos. Si bien se sabe que los cromatóforos contienen una red anclada de gránulos pigmentados, sus propiedades de estructura y función no se han detallado completamente. Describimos un método para aislar los gránulos nanoestructurados en cromatóforos de calamar Doryteuthis pealeii y demostramos cómo sus pigmentos asociados pueden extraerse en disolventes ácidos. Para ello, la capa dérmica que contiene el cromatóforo se aísla primero manualmente mediante una disección superficial, y los gránulos de pigmento se eliminan mediante ciclos de sonicación, centrifugación y lavado. Los pigmentos confinados dentro de los gránulos purificados se extraen a través de soluciones ácidas de metanol, dejando nanoestructuras con diámetros más pequeños que carecen de color visible. Este procedimiento de extracción produce un rendimiento del 58% de pigmentos solubles aislados de gránulos. Con este método, se puede determinar la composición de los pigmentos del cromatóforo y utilizarla para proporcionar información sobre el mecanismo de la coloración adaptativa en los cefalópodos.

Cromatóforos se disecan de la D. pealeii dorsal manto (Figura 1A, 1B). Una vez que se quitan, cromatóforos se lisan y se purificaron usando los ciclos de centrifugación y lavado para aislar los gránulos pigmentados (Figuras 2A, 2B). Soluciones de metanol ácido (HCl-MeOH) se utilizan para extraer el pigmento de los gránulos (Figura 2C), produciendo un extracto de pigmento soluble y gránulos de pi...

Se presenta un protocolo para la extracción de pigmentos a partir de los gránulos nanoestructurados en Doryteuthis pealeii cromatóforos calamar.

Un método para extraer pigmentos de calamar<em&gt; Pealeii Doryteuthis</em

Cephalopods can undergo rapid and adaptive changes in dermal coloration for sensing, communication, defense, and reproduction purposes. These capabilities ...

El objetivo general de este procedimiento es describir cómo extraer los pigmentos ubicados dentro de los gránulos nanoestructurados de los cromatóforos de calamar recién diseccionados, Doryteuthis pealeii. Los cefalópodos son animales marinos complejos que experimentan cambios rápidos y adaptativos en su coloración dérmica.Sin embargo, aún se desconoce mucho sobre cómo funcionan estos sistemas. La principal ventaja de esta técnica es que se dirige específicamente a los gránulos nanoestructurados en el órgano cromatóforo. Esto permitirá a los investigadores elucidar el mecanismo del cambio de color que se origina a escala nanométrica.Además de aportar conocimientos sobre la biología de los cefalópodos, este método puede orientar el diseño de sistemas sintéticos construidos para imitar el rango dinámico de color adaptativo exhibido por los cefalópodos mediante nanopartículas pigmentadas preempaquetadas. En general, las personas nuevas en este método tienen dificultades porque recolectar tejido de cromatóforos puro es complicado debido a su proximidad con los tejidos circundantes. Nuestro método está optimizado para reducir estos contaminantes.Para comenzar la disección, vierta primero aproximadamente 250 mililitros de agua de mar filtrada en una bandeja de disección. Coloque un espécimen en la bandeja y, utilizando tijeras finas rectas de acero inoxidable, corte desde la base del manto ventral a lo largo del lado posterior del animal, terminando en la región de la aleta. Retire todos los órganos internos levantándolos suavemente con pinzas de disección y corte los tejidos conectivos usando las tijeras.Deseche los órganos en una bolsa para muestras. Utilizando alfileres T para disección, clave el manto con la aleta hacia arriba en la almohadilla de disección. Con pinzas, retire cuidadosamente la capa opaca de la piel epidermal, manteniendo intacta la capa de piel que contiene los cromatóforos.Deseche la capa epidérmica en una bolsa para muestras. A continuación, retire la capa de cromatóforos. Corte el tejido de cromatóforos en secciones pequeñas de un centímetro por un centímetro.Coloque las secciones en un tubo microcentrífugo de 1,5 mililitros, llenando cada tubo hasta la mitad con el tejido diseccionado. Finalmente, agregue 500 microlitros de agua de mar filtrada a los tubos. Para aislar los gránulos de pigmento, primero centrifugue las secciones de tejido de cromatóforos durante cinco minutos a 14,000 × g.Deseche la capa superior de agua de mar. Añada 500 microlitros de solución de colagenasa papaina a las muestras y vortexee durante uno o dos minutos al máximo nivel. A continuación, someta las muestras a sonicación durante cinco minutos a 40 kHz para disociar las células del tejido circundante.Centrifugar durante cinco minutos adicionales a 14.000 x g y luego desechar el sobrenadante. Repetir la centrifugación otras dos veces, desechar el sobrenadante cada vez. A continuación, agregar la re-suspensión en colagenasa.Utilice pinzas para eliminar manualmente cualquier sección de tejido grande que no se haya digerido antes de continuar. La pureza de la solución inicial de gránulos influye en la extracción de pigmento. Por lo tanto, es importante asegurarse de que los materiales iniciales de cromatóforos se hayan digerido completamente.Descubrimos que las secciones de tejido de aproximadamente un centímetro son óptimas para recolectar la población más pura de gránulos. Prepare el tampón de homogenización tomando un tubo de tapón roscado de 150 mililitros y agregando la cantidad adecuada de HEPES, cloruro de magnesio, aspartato de potasio y dithiotreitol. Añada una tableta mini comercial de inhibidor de proteasas.Utilizando un cilindro graduado, mida 100 ml de agua desionizada y añádalos al tubo que contiene las sales de homogenización. Vortexe el tubo para mezclar hasta que la solución se vuelva clara. Centrifugue las muestras de tejido y luego deseche el sobrenadante.Añada 500 microlitros de tampón de homogenización a cada tubo y vortexee durante 2 minutos para mezclar completamente. Sone los muestras durante 30 minutos a 40 kHz. Y luego, centrifúgelos nuevamente.Después de desechar el sobrenadante, repita la adición de homogenización, la sonicación y la centrifugación dos o tres veces para asegurar la digestión completa del tejido extracelular. Finalmente, el tubo debe contener un sobrenadante de color amarillo claro y un sedimento de color rojo que consiste en los gránulos de pigmento aislados. Deseche el sobrenadante.Primero, prepare metanol ácido para la extracción en un vial de vidrio con tapón de rosca añadiendo 5 ml de metanol y 25 µL de ácido clorhídrico concentrado. Agite suavemente la solución para mezclar. Aparte un tubo de muestra; este será el tratamiento de gránulos al final de la reacción.Retire el tampón de homogenización de un segundo tubo que contiene gránulos. Añada 500 µL de la solución de metanol ácido a los tubos restantes y vortexee durante tres a cuatro minutos. Somete las muestras a sonicación durante 10 minutos a 40 kHz y luego centrifugue durante cinco minutos a 14000 × g.Mediante una micropipeta, recolecte el sobrenadante en un vial de vidrio con tapa roscada de un dram. Este es el pigmento, y debe presentar un color rojo oscuro. Repita la adición de metanol ácido, la sonicación y las centrifugaciones cuatro o cinco veces, recolectando el sobrenadante hasta que no se extraiga más color.El resto del pellet incoloro son los gránulos con pigmento extraído. Para preparar muestras de gránulos para imágenes, primero centrifugue tanto la alícuota de gránulos sin reaccionar como los gránulos con pigmento extraído durante cinco minutos a 14000 x g, deseche el sobrenadante y luego resuspenda cada pellet en 1 ml de etanol al 95%. Utilizando una pipeta de transferencia, coloque 2-3 gotas de cada suspensión de gránulos sobre un soporte de SEM de aluminio separado.Coloque las muestras en un desecador para que sequen durante la noche bajo vacío. Recubra los portaobjetos con un recubrimiento de oro y platino mediante pulverización catódica durante 3 minutos para obtener un espesor de 15 nanómetros. Observe las muestras utilizando un microscopio electrónico de barrido.A continuación, utilice un espectrofotómetro para obtener los perfiles de absorbancia de los gránulos no reaccionados, los gránulos extraídos y el pigmento extraído. Realice una medición en blanco para las muestras de gránulos añadiendo 1 ml de agua desionizada a una cubeta limpia. Deseche el blanco en un recipiente de desecho.A continuación, agregue la suspensión que contiene los gránulos de pigmento no reaccionados a la cubeta. Recolecte los espectros de absorción UV-vis para la muestra de gránulos. Realice una segunda medición en blanco para el pigmento extraído utilizando 1 mL de metanol ácido y una cubeta limpia.Finalmente, tome el espectro de absorción UV-vis del pigmento y luego determine la longitud de onda máxima de cada muestra. La microscopía electrónica de barrido reveló que el proceso de extracción del pigmento reduce el diámetro promedio de los gránulos. Antes de la extracción, los gránulos tienen un diámetro promedio de 527.3 nm.Después del procedimiento con metanol ácido, este tamaño disminuye significativamente hasta aproximadamente 202,6 nm. Se cree que esta reducción se debe a la extracción del pigmento. Tras la adición del metanol ácido, el color asociado con los gránulos no reaccionados también disminuye visiblemente.Se obtuvo confirmación de esta hipótesis mediante espectrofotometría. Este gráfico muestra un perfil de absorbancia amplio para los gránulos previos a la extracción y un perfil similarmente amplio pero de menor intensidad para los gránulos posteriores a la extracción. En contraste, el pigmento extraído soluble presenta un máximo de lambda alrededor de 500 nm y un hombro definido alrededor de 380 nm.En conjunto, estos datos sugieren la extracción exitosa del color visible a partir de los gránulos. Una vez dominada, esta técnica puede realizarse en aproximadamente cuatro horas desde el inicio hasta el final. Al intentar este procedimiento, es importante recordar eliminar completamente el tejido que contiene placas proteicas reflectantes, las cuales podrían interferir con la extracción y el análisis.El tejido epidérmico también puede interferir con los pasos de homogenización y la extracción de pigmentos. Tras seguir este procedimiento, se pueden utilizar otros métodos como la cromatografía en capa fina y la espectrometría de masas para purificar aún más los pigmentos y caracterizar su composición. Estos pasos pueden ayudar a elucidar las contribuciones moleculares a la coloración en los cefalópodos.Este método puede ayudar a responder preguntas clave para biólogos marinos, químicos e ingenieros, como: ¿Cuál es la composición de los pigmentos utilizados durante el cambio de color? ¿Y cómo contribuyen a la función y estructura de los gránulos nanoestructurados dentro de los órganos dérmicos de cromatóforos? Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo extraer pigmento de cromatóforos de calamar recién diseccionados, Doryteuthis pealeii.

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