Un modelo de ratón de la fatiga inducida por irradiación periférica

El objetivo general de este procedimiento es medir el comportamiento similar a la fatiga inducido por la irradiación periférica. Este método puede ayudar a responder preguntas clave sobre la fatiga y, en particular, la fatiga relacionada con la irradiación. Por ejemplo, se puede utilizar para explorar las diferentes funciones del sistema inmunitario y del sistema nervioso central en la fatiga después de la irradiación.

La principal ventaja de esta técnica es que utiliza específicamente la irradiación periférica para afectar esencialmente el comportamiento de fatiga impulsado. Comience por aleatorizar los ratones en grupos de control irradiados simulados o grupos irradiados. A continuación, identifique a los ratones machos de cinco semanas de edad mediante un tatuaje en la cola y asigne a cada ratón una jaula individual con ventilación estándar.

Permita que los ratones se aclimaten a sus jaulas durante al menos tres días más, manipulando cada ratón suavemente durante un período de tres minutos por día. A continuación, introduzca a los ratones en jaulas individuales y voluntarias de actividad de carrera con ruedas, o VWRA, cada una equipada con una rueda para correr conectada a un contador electrónico para un registro continuo. Inicie la grabación de VWRA a través de la interfaz del software del ordenador.

Establezca los intervalos de grabación en una hora y la duración en al menos cinco días. Finalmente, después de cinco días, detenga la grabación de VWRA a través de la interfaz del software y devuelva los ratones a sus jaulas estándar sin ruedas de funcionamiento. Después de anestesiar al ratón, confirme que la anestesia fue efectiva con un pellizco en el dedo del pie.

Use ungüento en los ojos para prevenir la sequedad. A continuación, transfiera el ratón anestesiado a un dispositivo de protección de cables. Coloque el ratón en el protector de modo que solo queden expuestos la parte inferior del abdomen y la región pélvica.

Luego, use cinta médica para asegurar la base de la cola del ratón en su posición dentro del blindaje para asegurarse de que la posición no cambie durante la irradiación. Si el ratón está en el grupo de irradiación, administre 800 centigray a una tasa de dosis de aproximadamente 110 centigray por minuto. Si el ratón está en el grupo de control de irradiación simulado, déjelo en el irradiador inactivo durante el tiempo equivalente.

Una vez completada la irradiación, retire el ratón del irradiador y del blindaje y devuélvalo a su jaula estándar original. Monitoree al ratón continuamente hasta que haya recuperado la conciencia suficiente para mantener la decúbito esternal. Después de tres días consecutivos de irradiación, transfiera a los ratones a sus jaulas individuales de VWRA.

Por último, para capturar la fatiga inducida por la radiación, registre la VWRA durante 15 días. El efecto fue significativo durante los primeros siete días después de la radiación, y la distancia media más baja de VWRA se produjo el tercer día después de la radiación. Aquí se muestra la distribución del cambio en VWRA desde antes hasta después de la irradiación.

Si bien la mayoría de los ratones analizados mostraron síntomas similares a la fatiga, hubo un pequeño número de ratones que mostraron pocos cambios o incluso un aumento en VWRA. Al intentar este procedimiento, es importante asegurarse de que los ratones estén completamente anestesiados durante la irradiación, ya que cualquier movimiento puede afectar el objetivo y la dosis de irradiación. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo usar la irradiación dirigida periféricamente para inducir un comportamiento similar a la fatiga en ratones.